盐酸氨基葡萄糖片中吡嗪类杂质含量测定及成因分析

目的建立测定盐酸氨基葡萄糖片中吡嗪类杂质含量的高效液相色谱法,并探讨杂质形成的影响因素。方法色谱柱为Shim-pack GIST C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,3μm),流动相为0.05%庚烷磺酸钠溶液-乙腈(20∶1,V/V),流速为0.8 mL/min,检测波长为195 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。考察果糖嗪及脱氧果糖嗪在不同温度(50,60,70,80℃)及相对湿度(RH,60%、75%、92%)条件下的含量变化规律。结果果糖嗪、脱氧果糖嗪质量浓度分别在0.18~9.23μg/mL和0.98~49.26μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r>0.9997);定量限分别为0.92 ng和0.99 ng,检测限分别为0.37 ng和0.33 ng;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均回收率分别为98.77%和99.43%,RSD分别为0.77%和0.27%(n=9)。2种杂质含量均与加热温度及RH呈显著正相关,且脱氧果糖嗪含量变化规律符合零级动力学;80℃条件下最高含量分别为加热前含量的1.5倍、3.7倍;40℃时,92%RH条件下最高含量分别为60%RH条件下的10倍、1.6倍。结论所建立的方法操作简便、结果准确,精密度、稳定性、重复性均较好,可用于盐酸氨基葡萄糖片中吡嗪类杂质的含量测定。高温、高湿条件分别对制剂中脱氧果糖嗪、果糖嗪含量影响较大。