含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)炎性体抑制剂及其作用机制研究进展

含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)炎性体是由NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及胱天蛋白酶1(caspase-1)组成的蛋白复合体,主要介导白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的前体成熟参与炎症反应。NLRP3炎性体的异常活化与代谢紊乱、神经退行性疾病、自身免疫性疾病等炎症性疾病的发生发展关系密切。寻找并开发NLRP3炎性体的有效抑制剂成为治疗炎症性疾病的新策略。我们总结了已报道的在NLRP3炎性体活化的起始阶段和激活阶段发挥作用的抑制剂及其作用机制,期望为开发以NLRP3炎性体为靶点的抗炎药物提供新思路。

猪颈动脉粥样硬化斑块易损性与Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3炎性小体的关系

目的 观察小型猪颈动脉粥样硬化模型中斑块组织Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3（NLRP3）炎性小体的表达.方法 高脂高胆固醇饮食联合部分结扎颈动脉方法,在6头小猪建立双侧颈动脉粥样硬化模型.3个月后观察颈动脉粥样硬化斑块中NLRP3蛋白的表达.结果 12根小猪颈动脉片段中可形成不同程度的粥样硬化改变.早期斑块中,NLRP3主要表达在新生内膜的内皮细胞;进展期斑块中,NLRP3主要分布在斑块的内皮细胞、斑块基底部和脂质核心周围.NLRP3的阳性表达评分与斑块破裂[（6.65±4.32）分比（1.77±3.15）分,P＜O.01]、斑块内出血[（6.18±4.31）分比（1.83±3.30）分,P＜0.05]和血管新生[（6.10±4.56）分比（3.69±3.57）分,P ＜0.05]密切相关.结论 小型猪动脉粥样硬化斑块中NLRP3蛋白的高表达反映了斑块易损性特征.

炎性体成分NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3对重型颅脑损伤患者预后评估的价值

目的探讨炎性体成分NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3（NLRP3）对重型颅脑损伤患者预后评估的价值。方法采用酶联免疫吸附法检测20例重型颅脑损伤患者脑脊液NLRP3浓度，结合格拉斯哥预后评分（GOS）等临床资料对比分析。结果重型颅脑损伤患者脑脊液NLRP3浓度为（33．8±11．6）μg/L，明显高于中型颅脑损伤组[（11．4±2．9）μg/L，P〈0．01]和正常对照组[（1．1±0．3）μg/L，P〈0．01]；预后不良组NLRP3浓度为（42．8±14．4）μg/L，明显高于预后良好组[（29．9±7．9）μg／L，P〈0．05]；患者NLRP3浓度与CT表现（r=0．601，P〈0．01）及GOS评分（r=0．665，P〈0．01）明显相关。结论脑脊液中NLRP3水平可以反映脑损伤程度，可作为评估颅脑损伤患者预后的标志物。

NLRP3炎症小体与代谢性疾病关系研究进展

代谢性疾病是以慢性炎症反应为重要特征的一类疾病。NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)作为炎症小体的关键调控蛋白之一,参与机体炎症反应调控。NLRP3不仅是先天性免疫系统的模式识别受体(PRRs),也是代谢紊乱的感应器。研究表明NLRP3参与多种代谢性疾病的发生、发展,包括糖尿病、痛风、非酒精性脂肪性肝炎、动脉粥样硬化、肥胖等。本文就NLRP3炎症小体结构、激活、调控及与2型糖尿病、1型糖尿病、动脉粥样硬化、痛风等代谢性疾病关系的研究进展分别进行讨论,旨在为进一步探讨代谢性疾病的发病机制提供理论依据,从而为代谢性疾病的防治开辟新的途径。

X线辐照激活NLRP3炎性体引起损伤肺组织细胞焦亡(pyroptosis)

目的建立放射性肺损伤模型,研究胱天蛋白酶1(caspase-1)依赖的程序性细胞死亡即细胞焦亡(pyroptosis)在放射性肺炎发病机制中的作用。方法 BALB/c小鼠胸腔15 Gy X线辐照5 d,处死小鼠。HE染色观察肺组织形态变化,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测辐照后肺组织细胞凋亡情况,Western blot法检测肺组织γ组蛋白2AX(γ-H2AX)、抗原KI-67(ki67)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、caspase-1和含CARD结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC/TMS-1)的表达情况,实时荧光定量PCR检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18的m RNA水平,采用免疫组织化学染色检测肺组织NLRP3、caspase-1和TMS1的表达情况,使用caspase-1活性检测试剂盒检测caspase-1活性;ELISA检测血清IL-1β和IL-18水平。结果辐照后小鼠肺泡壁毛细血管扩张充血,炎性细胞浸润,肺泡壁增厚;肺组织细胞TUNEL染色阳性指数升高,γ-H2AX和ki67的表达增强,提示细胞DNA遭到破坏且细胞增殖活性降低;肺组织细胞中IL-6、IL-8、TNF-α和MCP-1 m RNA水平增加;血清IL-1β和IL-18水平增加,肺组织NLRP3、caspase-1、ASC/TMS-1表达水平增加,caspase-1活性增强。结论辐照后,激活小鼠肺组织NLRP3炎性体诱导肺组织的细胞发生pyroptosis。

内质网参与NLRP3炎症小体激活的机制研究进展

内质网是动态的膜系统,参与分泌蛋白的合成与折叠、调控脂类合成、维持Ca^(2+)稳态等。核苷酸结合寡聚化结构域NOD样受体家族含Pryrin结构域蛋白3(NLRP3)炎症小体是细胞内的一种多蛋白复合物,被激活后引起机体炎症反应的发生,参与天然免疫防御。错误折叠蛋白应答激活内质网应激反应从而调节NLRP3炎症小体的组装和激活。线粒体相关的内质网膜是脂质等物质转运和NLRP3炎症小体装配的重要分子平台。内质网Ca^(2+)信号转导促进NLRP3炎症小体激活。脂质通过触发Ca^(2+)信号或增强内质网膜流动性激活NLRP3炎症小体。内质网及其相关分子参与NLRP3炎症小体的组装、激活和调控的相关研究为相关疾病的发病机制及治疗靶点提供参考。

格列本脲对大鼠膀胱炎性衰老的影响及其可能的机制研究

目的:探讨格列本脲对衰老膀胱炎症的影响及其可能机制。方法:将SD大鼠根据月龄随机分为3组:2月龄青年组、24月龄衰老对照组和24月龄衰老格列本脲组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1),口服1个月),每组10只。采用HE染色观察膀胱形改变,天狼猩红染色检测胶原沉积,尿动力学测定膀胱功能,Western Blot检测膀胱组织中NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)和白细胞介素-1β(IL1β)分子表达和衰老相关蛋白P16表达,免疫荧光检测α-SMA在膀胱黏膜下血管中的表达,免疫组化检测NLRP3和IL1β表达。结果:衰老对照组和衰老格列本脲组的NLRP3和IL1β表达量较青年组增加,而衰老格列苯脲组增加的程度低于衰老对照组(P <0. 05)。HE和天狼腥红染色结果显示衰老对照组和衰老格列本脲组膀胱黏膜和平滑肌层结构重塑,胶原沉积明显增加,且衰老格列本脲组的胶原蛋白肌纤维面积比衰老对照组减少(P <0. 05)。衰老对照组和衰老格列本脲组中膀胱黏膜下血管壁结构形态紊乱,管腔较青年组狭窄。衰老相关蛋白p16在衰老对照组和衰老组中较青年组显著增加(P <0. 05)。尿动力学未检测到明显的不稳定收缩,但衰老对照组排尿时间延长,残余尿量较青年组和衰老格列苯尿组增加。结论:格列本脲可以一定程度缓解衰老膀胱功能,作用机制可能与抑制衰老膀胱中NLRP3/IL-1β炎症小体活化相关。

小胶质细胞在MS/EAE中的作用及研究进展

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是发生在中枢神经系统(central nervous system,CNS)的一种以炎症反应、髓鞘脱失、胶质增生等为主要病理特征的自身免疫性疾病,实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)由于与MS具有非常相似的病理特征及临床表现,已被国际公认为是研究MS发病机制和治疗策略的理想动物模型。尽管CD4~+T细胞所介导的自身免疫反应在MS/EAE的病理进程中处于核心地位,但小胶质细胞(microglia,MG)作为CNS与免疫系统沟通的“桥梁”,在MS/EAE中所发挥的作用受到越来越多的关注。除经典的抗原呈递、分泌细胞因子等途径,MG近年来还被证实可通过髓磷脂内化、激活胞内含吡啶结构域3的NOD样受体家族(NOD-like receptor family pyrin domain-containing3,NLRP3)炎性小体等途径参与MS/EAE病理进程。本文针对MG在MS/EAE中的作用及研究进展进行综述。