含有WW结构域的氧化还原酶的基因在骨肉瘤化疗中的作用

目的 探讨外源性含有WW结构域的氧化还原酶的基因（WWOX基因）转染骨肉瘤细胞株MG63后对化疗药物的增敏作用和化疗后WWOX基因的表达.方法 用慢病毒转染法将WWOX重组真核表达质粒及空载质粒转染至MG-63细胞,分别建立稳定表达WWOX基因的MG63-WWOX过表达细胞株（WWOX-OE）及空载质粒细胞株（CON）,然后细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测各组细胞的增殖,膜联蛋白Ⅴ（Annexin Ⅴ）和碘化丙锭（PI）双染法检测各组细胞的凋亡;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测各组WWOX基因的mRNA和蛋白水平的表达.结果 WWOX-OE组与CON组在加入化疗药物（顺铂＋多西他赛）处理后,结果显示WWOX-OE组与CON组比较增殖明显受抑制（24 h：2.595±0.088比2.658±0.132,P＞0.05;48 h：0.425±0.052比0.820 ±0.117,P ＜0.05;72 h：0.265±0.016比0.594±0.034,P＜0.05;96 h：0.112±0.011比0.265±0.016,P＜0.05）,凋亡明显增多（29.500±2.450比17.460±1.561,P＜0.05）.RT-PCR和Western blot法结果显示化疗药处理后的WWOX-OE组与CON组WWOX的表达均明显增高（RT-PCR结果：WWOX-OE组：51.29±10.20比259.90±36.33,P＜0.05;CON组：5.70±2.18比36.76±3.71,P＜0.05）.且RT-PCR结果显示化疗药处理后的WWOX-OE组较CON组WWOX的表达量更高（259.90±36.33比36.76±3.71,P＜ 0.05）.结论 在骨肉瘤细胞MG63中,上调WWOX基因的表达可以增加化疗的敏感性,这也为研究骨肉瘤化疗不敏感及耐药提供了新的思路.

含有WW结构域的氧化还原酶对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的观察含有WW结构域的氧化还原酶(WWOX)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集南阳市中心医院2015年8月到2019年8月经手术切除的189例胃癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析WWOX蛋白的表达水平。采用过表达WWOX和对照质粒的慢病毒感染胃癌细胞SGC-7901,建立稳定细胞株,分为WWOX组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)分析两组细胞的增殖情况;采用Transwell分析两组细胞的迁移和侵袭水平。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞的细胞核增殖抗原(Ki-67)、黏着斑激酶(FAK)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)蛋白的表达水平。计量数据比较采用t检验。结果胃癌组织中WWOX蛋白水平(89.33±7.12)较癌旁组织WWOX蛋白水平(190.32±13.09)明显下降,差异有统计学意义(t=3.142,P<0.05)。WWOX组细胞增殖(0.91±0.39)较对照组细胞增殖(1.79±0.51)显著下降,差异均有统计学意义(t=2.901,P<0.05)。WWOX组细胞EdU阳性率[(39.78±5.44)%]较对照组细胞EdU阳性率[(87.51±7.01)%]显著下降,差异均有统计学意义(t=3.182,P<0.05)。WWOX组迁移和侵袭细胞数量[(55.19±4.11)、(34.11±3.71)个]较对照组细胞迁移数量[(103.49±5.10)、(83.16±4.81)个]明显下降,差异有统计学意义(t=2.710、2.372,P<0.05)。与对照组细胞Ki-67、FAK和MMP-2表达水平(1.21±0.15、0.83±0.11和1.28±0.20)比较,WWOX组细胞Ki-67、FAK、MMP-2和MIIP蛋白表达水平(0.69±0.12、0.31±0.09和0.71±0.15)明显下降,差异有统计学意义(t=2.900、2.515,P<0.05;t=2.879,P<0.05)。结论 WWOX蛋白在胃癌组织中低表达,通过抑制细胞、迁移和侵袭起抑癌基因的作用。

含WW结构域的氧化还原酶在子宫颈癌中的表达及其临床意义

目的：检测含WW结构域的氧化还原酶（ WWOX）蛋白在子宫颈癌中的表达,并分析其临床病理意义。方法：利用免疫组织化学方法检测74例子宫颈鳞状细胞癌（ CSCC组）、20例宫颈上皮内瘤变（ CIN组）和20例正常宫颈组织（正常组）中WWOX蛋白的表达。结果：WWOX蛋白在CSCC组、CIN组和正常组中的阳性率分别为39.2%、65.0%和95.0%,3组WWOX的表达差异有统计学意义（P〈0.01）；WWOX蛋白的表达在CSCC组织不同分化程度、FIGO分期、浸润深度及淋巴结转移与否差异均有统计学意义（P〈0.05~P〈0.01）,在 CSCC患者的年龄及肿瘤大小差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：WWOX蛋白表达的异常降低或缺失参与了CSCC的发生、发展过程；在CSCC患者肿瘤组织中早期检测WWOX蛋白可以预测其浸润和转移。

含WW结构域的氧化还原酶在儿童骨肉瘤中表达的临床意义

目的 检测儿童骨肉瘤组织中含WW结构域的氧化还原酶(WWOX)基因的表达水平及其与其他临床病理特征的相关性.方法 本研究采用回顾性研究方法,选择2013年1月至2017年9月在新乡市第一人民医院诊治的分期为T2N0M0的153例骨肉瘤患儿为研究对象,收集治疗前活检组织标本,免疫组织化学染色分析WWOX表达水平及WWOX表达水平与骨肉瘤患儿的性别、年龄、肿瘤原发部位、对化疗反应等临床病理特征的关系,并采用Cox风险回归模型对骨肉瘤患儿无病生存期(DFS)的危险因素进行分析.结果 153例患儿中男91例,女62例,平均年龄13.9岁.WWOX表达较高的患儿化疗敏感性较好(P=0.027).WWOX的表达与微血管密度(MVD)呈负相关(r= -0.185,P=0.022),WWOX的表达与runt相关基因2(RUNX2)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达呈负相关(r= -0.182、-0.176,均P<0.05).儿童骨肉瘤患者DFS的危险因素包括低WWOX表达、高VEGF表达、四肢肿瘤和高MVD(均P<0.05),儿童骨肉瘤患者DFS独立危险因素包括低WWOX表达和高VEGF表达(均P<0.05).结论 WWOX在儿童骨肉瘤组织中出现表达缺失是DFS的危险因素,并与骨肉瘤患者的年龄、性别和肿瘤部位等临床病理特征相对独立,有助于预测对新辅助化疗的反应, WWOX对骨肉瘤预后的影响可能是通过抑制血管生成实现的.

WW结构域氧化还原酶和原癌基因C—JUN在瘢痕疙瘩中的表达

目的研究ww结构域氧化还原酶（WWOX）和原癌基因C—JUN在瘢痕疙瘩中的表达，探讨其在瘢痕疙瘩形成中的作用及机制。方法应用免疫组织化学sP法结合计算机病理图像分析、Western印迹和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测正常皮肤和瘢痕疙瘩组织中WWOX和C—JUN的表达，并对其表达进行统计学分析。结果瘢痕疙瘩中WWOX蛋白的表达定位于成纤维细胞细胞质中，且WWOX蛋白及其mRNA的表达减少，与正常皮肤对照组相比差异有统计学意义（P〈O．05）；C—JUN蛋白的表达定位于成纤维细胞细胞核和细胞质中，且C—JUN蛋白及其mRNA的表达增多，与正常皮肤对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。两者的表达存在负相关性（r=-0．626，P〈O．01）。结论WWOX在瘢痕疙瘩中低表达，c—JUN在瘢痕疙瘩中高表达，两者是瘢痕疙瘩相关基因，两者存在明显负相关，是瘢痕疙瘩的形成机制之一。ww（）X蛋白可能是C—JUN蛋白表达的抑制因素，两者可能通过成纤维细胞在瘢痕疙瘩的形成过程中发挥着重要作用。

食管鳞癌组织中WWOX蛋白的表达及临床意义

目的:研究食管鳞癌组织中含有WW结构域的氧化还原酶(WW domain-containing oxidoreductase,WWOX)蛋白的表达及其与临床病理参数的相关性。方法:采用蛋白质印迹法检测46例食管鳞癌组织及其癌旁正常组织中WWOX蛋白的表达情况。结果:食管鳞癌组织中WWOX蛋白的表达水平明显低于癌旁正常组织(P<0.01)。低分化癌组织较高分化、中分化组织中WWOX的表达量低。有淋巴结转移的组织较无转移的表达低。浸润程度越深,表达越低。WWOX蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论:WWOX蛋白在食管鳞癌组织中低表达,其表达量的高低与食管鳞癌分化程度、浸润深度和有无淋巴结转移有关。作为一种新的抑癌基因,WWOX蛋白的检测可以为食管鳞癌的诊断、治疗及判断预后提供有意义的生物学指标。

WWOX基因转染对胆管癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的:探讨WWOX基因转染胆管癌细胞株QBC939后对其增殖、凋亡与侵袭性的影响.方法:用脂质体转染法将WWOX重组真核表达质粒转染QBC939细胞,建立稳定表达WWOX基因的细胞株.将其分为以下3组:QBC939组,QBC939/con组和QBC939/WWOX组.荧光定量RT-PCR和Westernblot法检测各组WWOXmRNA和蛋白水平的表达;MTT实验检测转染前后各组细胞增殖活性的变化;FCM法检测各组细胞的凋亡;Transwell小室侵袭实验检测各组肿瘤细胞侵袭力的变化.结果:建立了稳定表达WWOX基因的QBC939/WWOX细胞株,WWOXmRNA和蛋白的表达增加[3.71(3.64-3.78)vs1.00(0.98-1.02),1.07(1.02-1.13);0.86±0.03vs0.25±0.01,0.27±0.02,均P<0.05],转染后的QBC939细胞MTT吸光度明显下降(0.63±0.04vs0.90±0.05,0.87±0.04,均P<0.01),FCM显示QBC939/WWOX组的细胞凋亡率明显增高(21.4%±2.35%vs1.24%±0.35%,1.73%±0.48%,均P<0.01),侵袭实验显示转移至下室滤膜的细胞数明显减少(70.00±4.58vs102.33±8.33,107.00±9.00,均P<0.01).结论:WWOX基因能抑制胆管癌细胞株QBC939的增殖,加速肿瘤细胞凋亡并降低其侵袭力,可能作为胆管癌基因治疗的一个新靶点.

WWOX基因转染对鼻咽癌CNE1细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的研究WWOX基因对鼻咽癌CNE1细胞增殖、迁移、侵袭的影响,寻求鼻咽癌基因治疗的新途径。方法将携有WWOX基因片段的慢病毒载体体外转染鼻咽癌细胞株CNE1(实验组),筛选稳定转染的细胞并进行扩增培养,以转染空载慢病毒(空载组)及未经转染(空白对照组)的CNE1细胞作为对照,并借助于Western blot测定和分析不同组别细胞蛋白的表达情况。同时,克隆形成实验、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法用来观察WWOX过表达对CNE1细胞的生长增殖能力的影响;划痕实验、Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验分别检测WWOX过表达对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建过表达WWOX的实验组CNE1/WWOX细胞株和空载组CNE1/CON细胞株。克隆形成及MTT实验结果显示WWOX过表达能明显抑制细胞克隆形成和增殖能力。划痕实验、Transwell迁移实验和侵袭实验结果显示WWOX过表达能够明显抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力。结论 WWOX过表达能够明显抑制鼻咽癌细胞CNE1的生长增殖、迁移及侵袭能力,这可能为鼻咽癌提供一个新的基因治疗靶点。

鼻咽癌组织FHIT、WWOX基因表达变化及其原因探讨

目的 观察鼻咽癌组织中脆性组氨酸三联体（FHIT）基因和WW结构域氧化还原酶（WWOX）基因表达变化,并探讨其原因。方法 选择89例鼻咽癌患者为观察组,取其手术切除的鼻咽癌组织标本和血液标本;61例慢性鼻黏膜炎患者为对照组,留取其鼻咽部黏膜组织标本以及血液标本。采用RT-PCR法检测观察组鼻咽癌组织和对照组鼻咽部黏膜组织FHIT mRNA、WWOX mRNA及启动子甲基化情况。用MSP法检测两组患者血液中FHIT、WWOX基因杂合性缺失情况。结果 观察组FHIT、WWOX mRNA相对表达量低于对照组（P均〈0.05）。观察组临床分期Ⅲ~Ⅳ期者FHIT、WWOX mRNA相对表达量低于Ⅰ~Ⅱ期者（P均〈0.05）。观察组鼻咽癌患者临床分期与FHIT、WWOX mRNA相对表达量呈负相关（r分别为-0.731、-0.816,P均〈0.05）。观察组FHIT、WWOX基因启动子甲基化程度分别为0.46±0.34、0.37±0.28,高于对照组的0.15±0.17、0.11±0.09,P均〈0.05。Spearman相关分析显示观察组FHIT、WWOX mRNA与该基因启动子甲基化程度呈负相关（r分别为-0.689、-0.594,P均〈0.05）。观察组39例（43.8%）存在至少1个FHIT基因位点杂合性缺失,42例（47.2%）存在至少1个WWOX基因位点杂合性缺失,明显高于对照组的3例（4.9%）和2例（3.3%）,P均〈0.05。观察组FHIT、WWOX mRNA与该基因基因杂合性缺失存在负相关（r分别为-0.239、-0.364,P均〈0.05）。结论 鼻咽癌的发生、发展与FHIT、WWOX基因的表达下调有关,而引起鼻咽癌组织FHIT、WWOX表达下调的原因可能是该基因启动子甲基化和杂合性缺失,其中基因启动子甲基化可能是导致其表达下调的主要原因。

WWOX与ERK1在食管鳞状细胞癌中表达及其临床病理意义

目的:检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中含WW结构域的氧化还原酶(WW domain-containing oxidoreductase,WWOX)蛋白和细胞外信号调节蛋白激酶1(extracellular signal regulated protein kinase 1,ERK1)表达及其与ESCC病人临床病理参数的相关性。方法:采用免疫组织化学EliVisionTM plus法检测150例ESCC和80例正常食管黏膜组织(对照组)中WWOX和ERK1蛋白的表达情况。结果:ESCC组织中WWOX和ERK1蛋白的阳性表达率分别为46.0%和58.7%;对照组中WWOX和ERK1蛋白的阳性率分别为85.0%和42.5%,差异均有统计学意义(P<0.05)。ESCC组织中WWOX蛋白阳性率与ERK1蛋白阳性率呈负相关关系(P<0.01)。WWOX和ERK1蛋白阳性表达率在ESCC病人不同肿瘤组织浸润深度、TNM分期和是否淋巴结转移间差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。生存分析显示,WWOX蛋白阳性表达病人的生存时间高于阴性者(P<0.05)。多因素回归分析显示,WWOX和ERK1蛋白阳性表达及TNM分期是影响ESCC病人术后生存的独立影响因子(P<0.05~P<0.01)。结论:WWOX和ERK1的异常表达参与了ESCC的发生、发展、浸润以及转移,早期联合检测WWOX和ERK1蛋白表达对ESCC的进展和预后判断有重要意义。

WWOX及P73蛋白在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及意义

目的:探讨WW结构域氧化还原酶基因(WW domain-containing oxidoreductase gene,WWOX)与P73蛋白在皮肤恶性黑色素瘤(cutaneous malignant melanoma,CMM)中的表达及其意义。方法:采用免疫组化法(SP)检测66例CMM、30例交界痣和20例正常皮肤组织蜡块中的WWOX、P73蛋白表达水平。使用SPSSl7.0统计软件包,采用卡方检验和Spearman等级相关分析方法进行统计学分析,检验标准a=0.05,以P<0.05为有统计学意义,χ2分割检验标准0.0167。结果:WWOX在正常皮肤的表达水平明显高于交界痣,其在交界痣的表达水平明显高于在CMM中的表达(P<0.0167);CMM中WWOX的表达水平随肿瘤浸润深度的增加而降低,伴有淋巴结转移者中的表达水平低于不伴有淋巴结转移者,并且差异均具有统计学差异(P<0.05)。P73蛋白在正常皮肤的表达水平低于交界痣,其在交界痣的表达水平低于CMM(P<0.0167);CMM中的P73蛋白表达水平随肿瘤浸润深度的增加而增高,伴有淋巴结转移者中的表达水平高于不伴有淋巴结转移者中的表达水平(P<0.05)。WWOX与P73蛋白在CMM中的表达呈负相关(r=-0.298,P=0.015)。结论:WWOX与P73共同参与调控CMM的发生发展,对其进行联合检测,有助于CMM的早期诊断,为临床治疗提供参考指标,同时也为CMM的基因治疗提供一个新思路。

miR-572靶向WWOX调控宫颈癌细胞增殖、凋亡的分子机制

目的探讨微小RNA(miR)-572对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用靶点。方法体外培养宫颈癌细胞株Hela与正常宫颈细胞株Ect1/E6E7。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-572及WW结构域的氧化还原酶基因(WWOX)mRNA表达水平;Western印迹检测WWOX蛋白表达水平。将anti-miR-572、anti-miR-NC分别转染至Hela细胞,分别为anti-miR-572组、anti-miR-NC组。构建pcDNA3.1-WWOX过表达载体转染至Hela细胞。双荧光素酶报告基因实验检测miR-572对WWOX基因的靶向调控。将WWOX siRNA(si-WWOX)、阴性对照siRNA(si-NC)转染至anti-miR-572组Hela细胞中,分别为anti-miR-572+si-WWOX组、anti-miR-572+si-NC组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测各组细胞凋亡。采用Western印迹法检测各组Hela细胞中WWOX蛋白表达水平。结果Hela细胞中miR-572表达水平显著高于Ect1/E6E7细胞(P<0.05),WWOX mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与anti-miR-NC组相比,anti-miR-572组Hela细胞增殖率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);WWOX过表达后可抑制Hela细胞增殖活性并提高细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验表明WWOX是miR-572的靶基因;与anti-miR-572+si-NC组相比,anti-miR-572+si-WWOX组WWOX蛋白表达水平及细胞凋亡率显著降低(P<0.05),细胞增殖率显著升高(P<0.05)。结论miR-572可直接靶向调控WWOX从而抑制宫颈癌细胞增殖、促进凋亡。

miR-572通过靶向调控WWOX影响肺癌细胞恶性生物学行为

目的探讨miR-572靶向氧化还原酶的WW结构域(WW domain containing oxidoreductase,WWOX)调控肺癌细胞增殖、凋亡的分子机制。方法选取50例2016年3月—2018年5月十堰市太和医院手术切除肺癌组织及其相应的癌旁组织。利用脂质体转染技术将miR-572 inhibitor和miR-572 mimics转染至肺癌A549和L9981细胞;采用qRT-PCR检测miR-572和WWOX的mRNA表达水平,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况。通过生物信息学软件Targetscan分析miR-572的靶基因,荧光素酶报告基因实验检验miR-572和WWOX的靶向关系。结果miR-572在肺癌组织和细胞中高表达(均P<0.05)。下调miR-572后,肺癌细胞A549、L9981中miR-572表达水平均降低(均P<0.05),细胞增殖能力也降低(均P<0.05),细胞G0/G1期比例和细胞凋亡率均升高(均P<0.05);而上调miR-572后,肺癌A549、L9981细胞增殖能力升高(均P<0.05),细胞G0/G1期比例和细胞凋亡率则降低(均P<0.05)。WWOX在肺癌组织和细胞中低表达(均P<0.05),且在肺癌组织中WWOX与miR-572表达呈负相关(r=-0.669,P<0.001)。下调WWOX可逆转下调miR-572对肺癌细胞的增殖抑制、周期阻滞和凋亡促进作用。结论下调miR-572可抑制肺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与靶向负调控WWOX有关。

miR-670-5p对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的:探讨miR-670-5p对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,分析其调控WW结构域氧化还原酶基因(WWOX)的机制。方法:收集2016年1月至2017年10月收治的28例肺癌组织和对应癌旁组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肺癌组织、癌旁组织中miR-670-5p的表达水平。将肺癌细胞A549分为anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-670-5p组(转染anti-miR-670-5p)、anti-miR-670-5p+si-NC组(转染anti-miR-670-5p与si-NC)、anti-miR-670-5p+si-WWOX组(转染anti-miR-670-5p与si-WWOX)。转染48 h后,RT-qPCR或蛋白质印记(Western blot)检测转染效果。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测P21、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-670-5p和WWOX的靶向关系。结果:肺癌组织中miR-670-5p的表达水平较癌旁组织显著升高(P<0.05)。抑制miR-670-5p可抑制MMP-2蛋白表达(P<0.05),促进P21和E-cadherin表达(P<0.05),抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。WWOX是miR-670-5p的靶基因,miR-670-5p负调控WWOX表达。抑制WWOX可部分逆转anti-miR-670-5p对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响(P<0.05)。结论:miR-670-5p通过靶向WWOX能够促进肺癌细胞增殖、迁移、侵袭。

脆性位点基因FHIT和WWOX在肝细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨脆性位点基因脆性组氨酸三聚体基因（FHIT）和含有WW结构域的氧化还原酶基因（WWOX）在肝细胞癌（HCC）中的表达及其与临床病理特征的关系. 方法采用免疫组织化学染色方法评价142例HCC及其癌旁肝组织和15例正常肝组织中FHIT和WWOX的表达情况,结合临床病理资料进行分析.统计学分析采用Kruskal-Wallis H检验对2或多个独立样本的计数资料或等级资料进行分析,Wilcoxon符号秩检验对2个配对样本的等级资料进行分析,Spearman秩相关进行指标间的相关性分析.结果 68.3%和77.5%的HCC患者中出现FHIT和WWOX表达缺失或下降.肝癌与其相应癌旁组织及正常肝组织表达强度和总水平比较,u值为-9.952～-7.564,P值均＜0.01;且二者的表达具有明显的相关性（P＜0.01）.随HCC分化程度的降低,FHIT和WWOX的表达也减弱（P＜0.05）,并且与血管侵犯、包膜破坏、卫星病灶出现等提示肿瘤侵袭转移的指标有关（P＜0.05）,在术后复发与未复发组中,二者的表达亦有差别（P＜0.05）.结论 FHIT与WWOX在HCC中的缺失或低表达与HCC的恶性表型有关,预示HCC患者的不良预后,二者可能起肿瘤抑制作用.

抑癌基因FHIT和WWOX在胃腺癌中的表达及其临床意义

目的通过检测FHIT蛋白和WWOX蛋白在胃腺癌组织中表达情况和FHITmRNA和WWOXmRNA在胃腺癌和癌旁正常组织的表达情况,分析两者与临床病理特征之间的关系及两者之间是否具有相关性。方法随机抽取佳木斯大学附属第一医院普外科2000年到2011年期间的70例胃腺癌切除组织标本,采用免疫组化和RT-PCR方法检测胃腺癌组织中临床病理关系及胃腺癌与癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5CM)的关系。结果 (1)FHIT和WWOX均阳性表达28例。FHIT和WWOX均阴性表达24例。FHIT阳性而WWOX阴性8例。FHIT阴性而WWOX阳性10例。FHIT和WWOX在胃腺癌中的表达成正相关性。(2)FHITmRNA与WWOXmRNA在70例胃腺癌组织中表达较癌旁组织低者分别有22例和28例;较癌旁胃正常组织高者均有6例。FHITmRNA和WWOXmRNA在胃腺癌的表达低于癌旁胃组织。结论 (1)FHIT和WWOX在胃腺癌组织中阳性表达率较低,在组织学分级,病理分期中呈正相关,而与年龄和病理分型无相关性。(2)FHIT和WWOX的在胃腺癌组织中与癌旁胃正常组织中差异有显著性。(3)FHITmRNA和WWOXmRNA在胃腺癌组织中的低表达呈低度正相关性。(4)FHIT和WWOX是重要的抑癌基因。

STATS和WWOX在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的探讨信号转导和转录激活因子5（STAT5）和WW结构域氧化还原酶（WWOX）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及相关性研究。方法用免疫组化SP法检测40例手术切除的NSCLC组织和20例正常肺组织中STAT5和WWOX的蛋白表达。结果STAT5蛋白在NSCLC中的表达明显高于正常肺组织，而WWOX在NSCLC中的表达明显低于正常肺组织（P〈0．01）；STAT5表达水平与NSCLC组织学类型有关，在腺癌组织中的表达明显高于鳞癌（P〈0．01），WWOX的表达与淋巴结转移相关，有淋巴结转移的表达低于无淋巴结结转移（P〈0．01）；STAT5蛋白和WWOX蛋白在NSCLC组织中的表达呈负相关（P〈O．05）。结论在NSCLC中存在STAT5的过度表达以及WWOX的失表达，STAT5表达水平与NSCLC组织学类型有关，而WWOX的表达与淋巴结转移相关。提示在NSCLC的发生机制中，WWOX可能通过抑制STAT5系统，促进细胞凋亡，起到抑癌作用。

PD98059联合顺铂对卵巢癌细胞增殖的影响

目的观察MEK1/2特异性抑制剂PD98059联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法按不同处理因素对卵巢癌SKOV3细胞分组:空白对照组、单纯PD98059组、单纯顺铂组、联合用药组。CCK-8法检测各组细胞的增殖抑制率。实时定量PCR检测各组细胞含有WW结构域的氧化还原酶(WWOX)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)在基因水平的表达。Western-blot检测各组细胞磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达。光镜下观察各组细胞的生长状态及形态学改变。流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。结果联合用药组细胞增殖抑制率明显高于其他各组(P<0.05);单纯顺铂组及联合用药组WWOX mRNA表达量较空白对照组明显增加(P<0.05),单纯PD98059组WWOX表达量无明显改变(P>0.05);ERK mRNA在各组间的表达无明显变化(P>0.05);与空白对照组相比,p-ERK1/2表达量在单纯PD98059组及联合用药组中明显降低(P<0.05),在单纯顺铂组的表达无明显变化。光镜下可观察到空白对照组及单纯PD98059组细胞生长状态好,细胞密集,无明显形态学改变;单纯顺铂组及联合用药组贴壁细胞少,细胞稀疏,联合用药组部分细胞出现胞浆溶解样改变。结论 PD98059联合顺铂可能通过调控WWOX基因表达及ERK通路,对卵巢癌细胞增殖产生较强的抑制作用。