脆性组氨酸三聚体基因和含有WW结构域的氧化还原酶基因基因在喉癌中的表达及其相关性

本研究旨在探讨脆性组氨酸三聚体基因（FHIT）及含有ww结构域的氧化还原酶基因（WWOX）在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及意义，现报道如下。1．临床资料：所有标本均取自2007至2010年手术治疗且资料完整的58例喉鳞状细胞癌患者，术前皆未行放疗和化疗。其巾男56例，女2例，平均年龄（59．2±6．2）岁。

含WW结构域的氧化还原酶在子宫颈癌中的表达及其临床意义

目的：检测含WW结构域的氧化还原酶（ WWOX）蛋白在子宫颈癌中的表达,并分析其临床病理意义。方法：利用免疫组织化学方法检测74例子宫颈鳞状细胞癌（ CSCC组）、20例宫颈上皮内瘤变（ CIN组）和20例正常宫颈组织（正常组）中WWOX蛋白的表达。结果：WWOX蛋白在CSCC组、CIN组和正常组中的阳性率分别为39.2%、65.0%和95.0%,3组WWOX的表达差异有统计学意义（P〈0.01）；WWOX蛋白的表达在CSCC组织不同分化程度、FIGO分期、浸润深度及淋巴结转移与否差异均有统计学意义（P〈0.05~P〈0.01）,在 CSCC患者的年龄及肿瘤大小差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：WWOX蛋白表达的异常降低或缺失参与了CSCC的发生、发展过程；在CSCC患者肿瘤组织中早期检测WWOX蛋白可以预测其浸润和转移。

含有WW结构域的氧化还原酶的基因在骨肉瘤化疗中的作用

目的 探讨外源性含有WW结构域的氧化还原酶的基因（WWOX基因）转染骨肉瘤细胞株MG63后对化疗药物的增敏作用和化疗后WWOX基因的表达.方法 用慢病毒转染法将WWOX重组真核表达质粒及空载质粒转染至MG-63细胞,分别建立稳定表达WWOX基因的MG63-WWOX过表达细胞株（WWOX-OE）及空载质粒细胞株（CON）,然后细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测各组细胞的增殖,膜联蛋白Ⅴ（Annexin Ⅴ）和碘化丙锭（PI）双染法检测各组细胞的凋亡;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测各组WWOX基因的mRNA和蛋白水平的表达.结果 WWOX-OE组与CON组在加入化疗药物（顺铂＋多西他赛）处理后,结果显示WWOX-OE组与CON组比较增殖明显受抑制（24 h：2.595±0.088比2.658±0.132,P＞0.05;48 h：0.425±0.052比0.820 ±0.117,P ＜0.05;72 h：0.265±0.016比0.594±0.034,P＜0.05;96 h：0.112±0.011比0.265±0.016,P＜0.05）,凋亡明显增多（29.500±2.450比17.460±1.561,P＜0.05）.RT-PCR和Western blot法结果显示化疗药处理后的WWOX-OE组与CON组WWOX的表达均明显增高（RT-PCR结果：WWOX-OE组：51.29±10.20比259.90±36.33,P＜0.05;CON组：5.70±2.18比36.76±3.71,P＜0.05）.且RT-PCR结果显示化疗药处理后的WWOX-OE组较CON组WWOX的表达量更高（259.90±36.33比36.76±3.71,P＜ 0.05）.结论 在骨肉瘤细胞MG63中,上调WWOX基因的表达可以增加化疗的敏感性,这也为研究骨肉瘤化疗不敏感及耐药提供了新的思路.

含有WW结构域的氧化还原酶对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的观察含有WW结构域的氧化还原酶(WWOX)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集南阳市中心医院2015年8月到2019年8月经手术切除的189例胃癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析WWOX蛋白的表达水平。采用过表达WWOX和对照质粒的慢病毒感染胃癌细胞SGC-7901,建立稳定细胞株,分为WWOX组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)分析两组细胞的增殖情况;采用Transwell分析两组细胞的迁移和侵袭水平。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞的细胞核增殖抗原(Ki-67)、黏着斑激酶(FAK)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)蛋白的表达水平。计量数据比较采用t检验。结果胃癌组织中WWOX蛋白水平(89.33±7.12)较癌旁组织WWOX蛋白水平(190.32±13.09)明显下降,差异有统计学意义(t=3.142,P<0.05)。WWOX组细胞增殖(0.91±0.39)较对照组细胞增殖(1.79±0.51)显著下降,差异均有统计学意义(t=2.901,P<0.05)。WWOX组细胞EdU阳性率[(39.78±5.44)%]较对照组细胞EdU阳性率[(87.51±7.01)%]显著下降,差异均有统计学意义(t=3.182,P<0.05)。WWOX组迁移和侵袭细胞数量[(55.19±4.11)、(34.11±3.71)个]较对照组细胞迁移数量[(103.49±5.10)、(83.16±4.81)个]明显下降,差异有统计学意义(t=2.710、2.372,P<0.05)。与对照组细胞Ki-67、FAK和MMP-2表达水平(1.21±0.15、0.83±0.11和1.28±0.20)比较,WWOX组细胞Ki-67、FAK、MMP-2和MIIP蛋白表达水平(0.69±0.12、0.31±0.09和0.71±0.15)明显下降,差异有统计学意义(t=2.900、2.515,P<0.05;t=2.879,P<0.05)。结论 WWOX蛋白在胃癌组织中低表达,通过抑制细胞、迁移和侵袭起抑癌基因的作用。

含WW域的氧化还原酶在颅内动脉瘤中表达分析及作为分子标志物的研究

目的目前颅内动脉瘤(IA)尚无明确的早期筛查分子标志物, 分析含WW域的氧化还原酶(WWOX)作为IA筛查指标的价值。方法通过病例对照研究对2021年至2023年采集自新疆医科大学第一附属医院IA患者102例(男41例, 女61例;未破裂者78例, 破裂者24例)和健康人群100例(男59例, 女41例)血液及20例组织样本(IA组织8例, 颞浅动脉12例)行实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及免疫荧光, 对42份血浆样本(IA组男8例, 女13例;对照组男10例, 女11例)行酶联免疫吸附测定(ELISA)检测, 经多因素逻辑回归分析后行受试者工作特征曲线(ROC)建模, 综合评价WWOX基因与IA的关系。两组间比较采用独立样本t检验, 多组间比较采用单因素方差分析。结果组织中WWOX基因含量IA组低于对照组(15.100±12.751比0.788±0.598, t=3.16, P<0.01), 免疫荧光染色示IA中WWOX水平降低。血液中WWOX基因含量IA组高于健康人群(0.715±1.647比1.484±0.971, t=7.524, P<0.01)。对照组低于未破裂及破裂组(0.701±0.152比1.434±0.745比1.005±0.597, F=40.52, P<0.01)。血液中女性IA组高于男性IA组(0.924±0.476比1.601±0.916, t=3.845, P<0.01)。ELISA检测提示WWOX蛋白含量IA组高于对照组(148.651±18.071比169.366±25.998, t=2.642, P<0.05)。血液和血浆ROC曲线结果示曲线往左上偏移(AUC=0.762 4, 误差0.035 73;AUC=0.727 9, 误差0.088 67)。结论 WWOX参与IA的发生发展, 血液中WWOX基因可作为IA早期临床筛查的分子标志物。

WWOX基因转染对胆管癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的:探讨WWOX基因转染胆管癌细胞株QBC939后对其增殖、凋亡与侵袭性的影响.方法:用脂质体转染法将WWOX重组真核表达质粒转染QBC939细胞,建立稳定表达WWOX基因的细胞株.将其分为以下3组:QBC939组,QBC939/con组和QBC939/WWOX组.荧光定量RT-PCR和Westernblot法检测各组WWOXmRNA和蛋白水平的表达;MTT实验检测转染前后各组细胞增殖活性的变化;FCM法检测各组细胞的凋亡;Transwell小室侵袭实验检测各组肿瘤细胞侵袭力的变化.结果:建立了稳定表达WWOX基因的QBC939/WWOX细胞株,WWOXmRNA和蛋白的表达增加[3.71(3.64-3.78)vs1.00(0.98-1.02),1.07(1.02-1.13);0.86±0.03vs0.25±0.01,0.27±0.02,均P<0.05],转染后的QBC939细胞MTT吸光度明显下降(0.63±0.04vs0.90±0.05,0.87±0.04,均P<0.01),FCM显示QBC939/WWOX组的细胞凋亡率明显增高(21.4%±2.35%vs1.24%±0.35%,1.73%±0.48%,均P<0.01),侵袭实验显示转移至下室滤膜的细胞数明显减少(70.00±4.58vs102.33±8.33,107.00±9.00,均P<0.01).结论:WWOX基因能抑制胆管癌细胞株QBC939的增殖,加速肿瘤细胞凋亡并降低其侵袭力,可能作为胆管癌基因治疗的一个新靶点.

WW结构域氧化还原酶和原癌基因C—JUN在瘢痕疙瘩中的表达

目的研究ww结构域氧化还原酶（WWOX）和原癌基因C—JUN在瘢痕疙瘩中的表达，探讨其在瘢痕疙瘩形成中的作用及机制。方法应用免疫组织化学sP法结合计算机病理图像分析、Western印迹和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测正常皮肤和瘢痕疙瘩组织中WWOX和C—JUN的表达，并对其表达进行统计学分析。结果瘢痕疙瘩中WWOX蛋白的表达定位于成纤维细胞细胞质中，且WWOX蛋白及其mRNA的表达减少，与正常皮肤对照组相比差异有统计学意义（P〈O．05）；C—JUN蛋白的表达定位于成纤维细胞细胞核和细胞质中，且C—JUN蛋白及其mRNA的表达增多，与正常皮肤对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。两者的表达存在负相关性（r=-0．626，P〈O．01）。结论WWOX在瘢痕疙瘩中低表达，c—JUN在瘢痕疙瘩中高表达，两者是瘢痕疙瘩相关基因，两者存在明显负相关，是瘢痕疙瘩的形成机制之一。ww（）X蛋白可能是C—JUN蛋白表达的抑制因素，两者可能通过成纤维细胞在瘢痕疙瘩的形成过程中发挥着重要作用。

鼻咽癌组织FHIT、WWOX基因表达变化及其原因探讨

目的 观察鼻咽癌组织中脆性组氨酸三联体（FHIT）基因和WW结构域氧化还原酶（WWOX）基因表达变化,并探讨其原因。方法 选择89例鼻咽癌患者为观察组,取其手术切除的鼻咽癌组织标本和血液标本;61例慢性鼻黏膜炎患者为对照组,留取其鼻咽部黏膜组织标本以及血液标本。采用RT-PCR法检测观察组鼻咽癌组织和对照组鼻咽部黏膜组织FHIT mRNA、WWOX mRNA及启动子甲基化情况。用MSP法检测两组患者血液中FHIT、WWOX基因杂合性缺失情况。结果 观察组FHIT、WWOX mRNA相对表达量低于对照组（P均〈0.05）。观察组临床分期Ⅲ~Ⅳ期者FHIT、WWOX mRNA相对表达量低于Ⅰ~Ⅱ期者（P均〈0.05）。观察组鼻咽癌患者临床分期与FHIT、WWOX mRNA相对表达量呈负相关（r分别为-0.731、-0.816,P均〈0.05）。观察组FHIT、WWOX基因启动子甲基化程度分别为0.46±0.34、0.37±0.28,高于对照组的0.15±0.17、0.11±0.09,P均〈0.05。Spearman相关分析显示观察组FHIT、WWOX mRNA与该基因启动子甲基化程度呈负相关（r分别为-0.689、-0.594,P均〈0.05）。观察组39例（43.8%）存在至少1个FHIT基因位点杂合性缺失,42例（47.2%）存在至少1个WWOX基因位点杂合性缺失,明显高于对照组的3例（4.9%）和2例（3.3%）,P均〈0.05。观察组FHIT、WWOX mRNA与该基因基因杂合性缺失存在负相关（r分别为-0.239、-0.364,P均〈0.05）。结论 鼻咽癌的发生、发展与FHIT、WWOX基因的表达下调有关,而引起鼻咽癌组织FHIT、WWOX表达下调的原因可能是该基因启动子甲基化和杂合性缺失,其中基因启动子甲基化可能是导致其表达下调的主要原因。

含WW结构域的氧化还原酶在儿童骨肉瘤中表达的临床意义

目的 检测儿童骨肉瘤组织中含WW结构域的氧化还原酶(WWOX)基因的表达水平及其与其他临床病理特征的相关性.方法 本研究采用回顾性研究方法,选择2013年1月至2017年9月在新乡市第一人民医院诊治的分期为T2N0M0的153例骨肉瘤患儿为研究对象,收集治疗前活检组织标本,免疫组织化学染色分析WWOX表达水平及WWOX表达水平与骨肉瘤患儿的性别、年龄、肿瘤原发部位、对化疗反应等临床病理特征的关系,并采用Cox风险回归模型对骨肉瘤患儿无病生存期(DFS)的危险因素进行分析.结果 153例患儿中男91例,女62例,平均年龄13.9岁.WWOX表达较高的患儿化疗敏感性较好(P=0.027).WWOX的表达与微血管密度(MVD)呈负相关(r= -0.185,P=0.022),WWOX的表达与runt相关基因2(RUNX2)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达呈负相关(r= -0.182、-0.176,均P<0.05).儿童骨肉瘤患者DFS的危险因素包括低WWOX表达、高VEGF表达、四肢肿瘤和高MVD(均P<0.05),儿童骨肉瘤患者DFS独立危险因素包括低WWOX表达和高VEGF表达(均P<0.05).结论 WWOX在儿童骨肉瘤组织中出现表达缺失是DFS的危险因素,并与骨肉瘤患者的年龄、性别和肿瘤部位等临床病理特征相对独立,有助于预测对新辅助化疗的反应, WWOX对骨肉瘤预后的影响可能是通过抑制血管生成实现的.

人口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞过表达WWOX基因的基因表达谱分析及WWOX基因的抑癌作用机制

目的:分析人口腔鳞状细胞癌(OSCC)Tca8113细胞过表达包含WW域的氧化还原酶(WWOX)基因的基因表达谱变化,探讨WWOX基因的抑癌作用机制。方法:Tca8113细胞分为WWOX基因过表达组和对照组。采用携带WWOX基因的pGV287-LV-WWOX慢病毒颗粒和携带空载体的pGV287-LV慢病毒颗粒分别感染2组Tca8113细胞。采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western blotting法检测2组Tca8113细胞中WWOX mRNA和蛋白表达情况。采用基因芯片技术筛选差异表达基因并进行生物学分析。采用定量PCR法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的差异表达基因的mRNA相对表达水平。结果:慢病毒感染后,WWOX基因过表达组Tca8113细胞中WWOX mRNA相对表达水平较对照组明显升高(P<0.05),WWOX基因过表达组Tca8113细胞中WWOX蛋白表达水平升高。基因芯片筛选出差异倍数(FC)1.5倍以上的基因共347个,其中表达上调171个,表达下调176个。生物信息学分析显示这些基因分布于癌症、p53信号、MAPK信号和白细胞介素2 (IL-2)等多条信号传导通路。WWOX基因过表达组MAPK信号通路中的丝裂原活化蛋白激酶2 (MAP2K)、孤核受体4A1 (NR4A1)、双特异性磷酸酶5 (DUSP5)和双特异性磷酸酶6 (DUSP6)mRNA相对表达水平较对照组明显升高(P<0.05),而成纤维生长因子受体2 (FGFR2)mRNA相对表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。结论:WWOX基因过表达导致Tca8113细胞的基因表达谱发生变化,WWOX基因的抑癌作用机制与调节MAPK信号途径的多个基因表达有关联。

抑癌基因WWOX甲基化与肿瘤的研究进展

含WW域的氧化还原酶(WW domain-containing oxidaseredurase,WWOX)是位于人类16号染色体q23.3~24.1脆性位点区域的抑癌基因,WWOX基因参与调控肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移等生物学行为。近年研究发现WWOX基因在乳腺癌、肝癌、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌、胃癌、膀胱癌等多种肿瘤中低表达或不表达,可能与DNA甲基化共价修饰抑制其转录有关,DNA甲基转移酶抑制剂去甲基化治疗能内源性地恢复WWOX表达,抑制肿瘤的发生发展。肿瘤的发生由遗传学和表观遗传学共同调控,抑癌基因甲基化是肿瘤早期发生过程中的频发事件,有望成为肿瘤早期诊断、预后评估的潜在标志物和抗肿瘤治疗靶点。本文就WWOX作为抑癌基因,着重阐述其甲基化与肿瘤的研究进展。

WWOX基因转染对鼻咽癌CNE1细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的研究WWOX基因对鼻咽癌CNE1细胞增殖、迁移、侵袭的影响,寻求鼻咽癌基因治疗的新途径。方法将携有WWOX基因片段的慢病毒载体体外转染鼻咽癌细胞株CNE1(实验组),筛选稳定转染的细胞并进行扩增培养,以转染空载慢病毒(空载组)及未经转染(空白对照组)的CNE1细胞作为对照,并借助于Western blot测定和分析不同组别细胞蛋白的表达情况。同时,克隆形成实验、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法用来观察WWOX过表达对CNE1细胞的生长增殖能力的影响;划痕实验、Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验分别检测WWOX过表达对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建过表达WWOX的实验组CNE1/WWOX细胞株和空载组CNE1/CON细胞株。克隆形成及MTT实验结果显示WWOX过表达能明显抑制细胞克隆形成和增殖能力。划痕实验、Transwell迁移实验和侵袭实验结果显示WWOX过表达能够明显抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力。结论 WWOX过表达能够明显抑制鼻咽癌细胞CNE1的生长增殖、迁移及侵袭能力,这可能为鼻咽癌提供一个新的基因治疗靶点。

含WW域的氧化还原酶基因对肺癌转移的抑制作用

目的观察含WW域的氧化还原酶基因（WWOX）基因对肺癌转移有无抑制作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）及Western blot检测手术后肺癌组织，高侵袭性肺癌细胞株A549、NCI—H1299及低侵袭性肺癌细胞株HBFA—E6／E7、NL9980的WWOX基因的表达。比较癌组织与肺癌旁组织、肺癌Ⅰ期与Ⅱ期＋Ⅲ期、高侵袭性肺癌细胞株与低侵袭性肺癌细胞株WWOX表达情况。将外源性WWOX基因稳定转染入WWOX表达阴性但高侵袭性的NCI—H1299细胞株，在WWOX表达阳性但低侵袭性的NL9980细胞株，应用小干扰RNA（siRNA）沉默WWOX的表达。应用Transwell法检测肺癌细胞的侵袭性。观察肺癌细胞株侵袭力的改变。结果WWOXmRNA在肺癌组织中的表达（0．03±0．01）明显低于癌旁组织（P〈0．05），在Ⅱ期＋Ⅲ期肺癌组织中的表达（0．24±0．09）明显低于I期肺癌组织（P〈0．05）。WWOXmRNA在高侵袭性H1299细胞中几乎不表达（0．91±0．01），而在低侵袭性NL9980细胞中呈现高表达（5．22±0．02）。Transwell小室显示转染了WWOX过表达质粒的H1299细胞数[（1156±133）个]与阴性对照细胞数[（3487±822）个]比较差异有统计学意义（P〈0．05），转染了WWOXsiRNA的NL9980细胞数[（1860±389）个]与阴性对照细胞数[（667±85）个]比较差异有统计学意义（P〈0．05）。且在H1299＋WWOX细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2（0．58±0．06）及波形蛋白（Vimentin，0．24±0．09）比H1299＋Mock表达均减少，而NL9980＋WWOXsiRNA细胞中MMP-2（1．51±0．08）及Vimentin（2．08±0．04）比NL9980＋NCsiRNA表达有增加。结论WWOX基因与肺癌转移相关，通过调控WWOX基因的表达可以对肺癌细胞的侵袭性产生明显的影响。

食管鳞癌组织中WWOX蛋白的表达及临床意义

目的:研究食管鳞癌组织中含有WW结构域的氧化还原酶(WW domain-containing oxidoreductase,WWOX)蛋白的表达及其与临床病理参数的相关性。方法:采用蛋白质印迹法检测46例食管鳞癌组织及其癌旁正常组织中WWOX蛋白的表达情况。结果:食管鳞癌组织中WWOX蛋白的表达水平明显低于癌旁正常组织(P<0.01)。低分化癌组织较高分化、中分化组织中WWOX的表达量低。有淋巴结转移的组织较无转移的表达低。浸润程度越深,表达越低。WWOX蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论:WWOX蛋白在食管鳞癌组织中低表达,其表达量的高低与食管鳞癌分化程度、浸润深度和有无淋巴结转移有关。作为一种新的抑癌基因,WWOX蛋白的检测可以为食管鳞癌的诊断、治疗及判断预后提供有意义的生物学指标。

WWOX与ERK1在食管鳞状细胞癌中表达及其临床病理意义

目的:检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中含WW结构域的氧化还原酶(WW domain-containing oxidoreductase,WWOX)蛋白和细胞外信号调节蛋白激酶1(extracellular signal regulated protein kinase 1,ERK1)表达及其与ESCC病人临床病理参数的相关性。方法:采用免疫组织化学EliVisionTM plus法检测150例ESCC和80例正常食管黏膜组织(对照组)中WWOX和ERK1蛋白的表达情况。结果:ESCC组织中WWOX和ERK1蛋白的阳性表达率分别为46.0%和58.7%;对照组中WWOX和ERK1蛋白的阳性率分别为85.0%和42.5%,差异均有统计学意义(P<0.05)。ESCC组织中WWOX蛋白阳性率与ERK1蛋白阳性率呈负相关关系(P<0.01)。WWOX和ERK1蛋白阳性表达率在ESCC病人不同肿瘤组织浸润深度、TNM分期和是否淋巴结转移间差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。生存分析显示,WWOX蛋白阳性表达病人的生存时间高于阴性者(P<0.05)。多因素回归分析显示,WWOX和ERK1蛋白阳性表达及TNM分期是影响ESCC病人术后生存的独立影响因子(P<0.05~P<0.01)。结论:WWOX和ERK1的异常表达参与了ESCC的发生、发展、浸润以及转移,早期联合检测WWOX和ERK1蛋白表达对ESCC的进展和预后判断有重要意义。

乳腺癌组织中WWOX蛋白表达及其临床意义

目的探讨包含氧化还原酶的WW域(WWOX)蛋白的表达在乳腺癌发生发展中的作用及其临床意义。方法应用免疫组织化学S-P法,检测31例乳腺癌组织及癌旁组织中WWOX蛋白的表达情况,并分析其与乳腺癌各临床病理指标的关系。结果对比癌旁组织,在31例乳腺癌中有16例发生WWOX蛋白表达下降或缺失(51.6%),WWOX蛋白表达与淋巴结转移和ER状态相关(P<0.05),而与年龄、肿块大小及PR、CerbB-2状态无关(P>0.05)。结论在乳腺癌中存在WWOX蛋白的表达减弱或缺失,这可能对乳腺癌的发生发展起到一定的作用。

白血病患儿WW域的氧化还原酶mRNA的表达及其意义

目的了解包含WW域的氧化还原酶(WWOX)基因在儿童白血病中的表达,分析WWOX基因与儿童白血病的关系;探讨WWOX基因在儿童白血病中的发病机制。方法收集湖南省人民医院和长沙市其他医院2009年1月-2011年3月白血病患儿51例作为白血病组,同期非白血病患儿10例作为对照组,本研究经患儿监护人知情同意,采用巢式-聚合酶链反应检测2组儿童骨髓单个核细胞中WWOX mRNA表达,应用SPSS 17.0统计软件进行数据分析。结果白血病组患儿WWOX mRNA表达阳性率明显低于对照组(31.37%vs 100.00%,P<0.01);白血病缓解组患儿WWOX mRNA表达阳性率亦明显低于对照组(33.33%vs100.00%,P<0.01),2组比较差异有统计学意义;白血病组患儿WWOX mRNA表达阳性率在不同性别、年龄、白血病类型、治疗阶段、肿瘤负荷组间比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论儿童白血病患儿中WWOX mRNA的表达阳性率较低;WWOX mR-NA的表达阳性率可能与儿童白血病的发生发展有关。

WWOX及P73蛋白在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及意义

目的:探讨WW结构域氧化还原酶基因(WW domain-containing oxidoreductase gene,WWOX)与P73蛋白在皮肤恶性黑色素瘤(cutaneous malignant melanoma,CMM)中的表达及其意义。方法:采用免疫组化法(SP)检测66例CMM、30例交界痣和20例正常皮肤组织蜡块中的WWOX、P73蛋白表达水平。使用SPSSl7.0统计软件包,采用卡方检验和Spearman等级相关分析方法进行统计学分析,检验标准a=0.05,以P<0.05为有统计学意义,χ2分割检验标准0.0167。结果:WWOX在正常皮肤的表达水平明显高于交界痣,其在交界痣的表达水平明显高于在CMM中的表达(P<0.0167);CMM中WWOX的表达水平随肿瘤浸润深度的增加而降低,伴有淋巴结转移者中的表达水平低于不伴有淋巴结转移者,并且差异均具有统计学差异(P<0.05)。P73蛋白在正常皮肤的表达水平低于交界痣,其在交界痣的表达水平低于CMM(P<0.0167);CMM中的P73蛋白表达水平随肿瘤浸润深度的增加而增高,伴有淋巴结转移者中的表达水平高于不伴有淋巴结转移者中的表达水平(P<0.05)。WWOX与P73蛋白在CMM中的表达呈负相关(r=-0.298,P=0.015)。结论:WWOX与P73共同参与调控CMM的发生发展,对其进行联合检测,有助于CMM的早期诊断,为临床治疗提供参考指标,同时也为CMM的基因治疗提供一个新思路。

miR-572靶向WWOX调控宫颈癌细胞增殖、凋亡的分子机制

目的探讨微小RNA(miR)-572对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用靶点。方法体外培养宫颈癌细胞株Hela与正常宫颈细胞株Ect1/E6E7。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-572及WW结构域的氧化还原酶基因(WWOX)mRNA表达水平;Western印迹检测WWOX蛋白表达水平。将anti-miR-572、anti-miR-NC分别转染至Hela细胞,分别为anti-miR-572组、anti-miR-NC组。构建pcDNA3.1-WWOX过表达载体转染至Hela细胞。双荧光素酶报告基因实验检测miR-572对WWOX基因的靶向调控。将WWOX siRNA(si-WWOX)、阴性对照siRNA(si-NC)转染至anti-miR-572组Hela细胞中,分别为anti-miR-572+si-WWOX组、anti-miR-572+si-NC组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测各组细胞凋亡。采用Western印迹法检测各组Hela细胞中WWOX蛋白表达水平。结果Hela细胞中miR-572表达水平显著高于Ect1/E6E7细胞(P<0.05),WWOX mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与anti-miR-NC组相比,anti-miR-572组Hela细胞增殖率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);WWOX过表达后可抑制Hela细胞增殖活性并提高细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验表明WWOX是miR-572的靶基因;与anti-miR-572+si-NC组相比,anti-miR-572+si-WWOX组WWOX蛋白表达水平及细胞凋亡率显著降低(P<0.05),细胞增殖率显著升高(P<0.05)。结论miR-572可直接靶向调控WWOX从而抑制宫颈癌细胞增殖、促进凋亡。

miR-572通过靶向调控WWOX影响肺癌细胞恶性生物学行为

目的探讨miR-572靶向氧化还原酶的WW结构域(WW domain containing oxidoreductase,WWOX)调控肺癌细胞增殖、凋亡的分子机制。方法选取50例2016年3月—2018年5月十堰市太和医院手术切除肺癌组织及其相应的癌旁组织。利用脂质体转染技术将miR-572 inhibitor和miR-572 mimics转染至肺癌A549和L9981细胞;采用qRT-PCR检测miR-572和WWOX的mRNA表达水平,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况。通过生物信息学软件Targetscan分析miR-572的靶基因,荧光素酶报告基因实验检验miR-572和WWOX的靶向关系。结果miR-572在肺癌组织和细胞中高表达(均P<0.05)。下调miR-572后,肺癌细胞A549、L9981中miR-572表达水平均降低(均P<0.05),细胞增殖能力也降低(均P<0.05),细胞G0/G1期比例和细胞凋亡率均升高(均P<0.05);而上调miR-572后,肺癌A549、L9981细胞增殖能力升高(均P<0.05),细胞G0/G1期比例和细胞凋亡率则降低(均P<0.05)。WWOX在肺癌组织和细胞中低表达(均P<0.05),且在肺癌组织中WWOX与miR-572表达呈负相关(r=-0.669,P<0.001)。下调WWOX可逆转下调miR-572对肺癌细胞的增殖抑制、周期阻滞和凋亡促进作用。结论下调miR-572可抑制肺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与靶向负调控WWOX有关。