糖类对冬虫夏草菌Ophiocordyceps sinensis芽生孢子产量及毒力的影响

冬虫夏草(Chinese cordyceps)是食药两用的传统名贵资源。其人工培养需要冬虫夏草菌Ophiocordyceps sinensis的优质芽生孢子。为获得高产量及高感染力芽生孢子,本研究测定不同糖类培养基对冬虫夏草菌芽生孢子产量及毒力(对小金蝠蛾Thitarodes xiaojinensis幼虫的存活率、携菌率和僵虫率)的影响。两个冬虫夏草菌株于含6种糖(葡萄糖、果糖、阿拉伯糖、麦芽糖、蔗糖和海藻糖)的液体培养基中分别培养30 d、45 d和60 d,计数芽生孢子产量并将收集的孢子注射感染两个品系的小金蝠蛾6龄幼虫,置于不同温度下观察幼虫的存活率、携菌率及僵虫率。结果显示:不同糖源培养基中芽生孢子的产量差异显著,其中含麦芽糖培养基中芽生孢子产量最高;注射菌株和幼虫品系对被注射幼虫的存活率无显著差异;不同糖源培养基获得的芽生孢子对蝠蛾幼虫的存活率无显著差异,对携菌率和僵虫率产生影响;以含麦芽糖为糖源的培养基、芽生孢子培养时间显著影响被注射幼虫的存活率与僵虫率,其中培养30 d的冬虫夏草菌所注射的幼虫的存活率、僵虫率显著高于60 d的;温度也显著影响被注射幼虫的存活率、僵虫率,10℃的幼虫存活率和僵虫率显著高于14℃、18℃的。研究结果为培养优质冬虫夏草芽生孢子,提高被侵染蝙蝠蛾幼虫僵虫率提供了参考。

复方胰酶散中乳酶生的含量测定

目的:建立复方胰酶散中乳酶生含量测定的方法。方法:进行乳酶生(屎肠球菌)在不同培养基上生长、菌落特征比较试验,选定屎肠球菌有特征菌落的培养基。结果:屎肠球菌在1%碳酸钙含糖牛肉琼脂培养基上的菌落形成透明钙化圈,排除了需氧菌对屎肠球菌计数干扰。结论:复方胰酶中乳酶生含量测定可采用1%碳酸钙含糖牛肉琼脂培养基,计透明钙化圈的菌落数的方法。

复方胰酶散中牛奶凝固力试验的探讨

目的:建立以屎肠球菌活菌的有无和数量作为乳酶生的鉴别方法。方法:采用10-1样品溶液0.2 mL涂布于1%碳酸钙含糖牛肉琼脂培养基上,含屎肠球菌的样品,形成透明钙化圈。结果:用牛奶凝固力试验体现复方胰酶散中乳酶生量,由于胰酶对牛奶凝固力试验有消解作用,凝固现象不明确;用屎肠球菌形成透明钙化圈,直观、明确。结论:复方胰酶散中乳酶生的鉴别,采用屎肠球菌形成透明钙化圈方法代替牛奶凝固试验,方法简单,结论明确。