含胱天蛋白酶富集功能域凋亡抑制因子在心血管疾病中的研究进展

细胞凋亡在维持机体正常发育以及内环境稳定中发挥重要作用,同时也对多种疾病的病理生理产生影响。研究表明心肌细胞凋亡参与了多种心血管疾病的发生发展过程。含胱天蛋白酶富集功能域凋亡抑制因子(ARC)是迄今为止唯一在心脏特异性高表达的抗凋亡蛋白,并可通过其抗凋亡能力发挥心肌保护作用。本文就ARC的结构和特点、ARC在心血管疾病中的作用及机制予以综述。

心脏特异抗凋亡蛋白ARC研究进展

含胱冬肽酶富集功能域的凋亡抑制因子(apoptosis repressor with CARD,ARC)蛋白是20世纪末发现的在心肌、骨骼肌和大脑等终末分化组织中大量表达的抗凋亡蛋白。ARC的主要功能是抗凋亡作用。由于其在心脏中表达的特异性和抗凋亡的多层次性,使ARC在心脏中的作用成为近年来研究的热点。本文主要对其抗凋亡途径以及近年来在心肌病中的研究进展两方面进行综述。

ARC基因沉默对缺氧诱导持续性肺动脉高压小鼠的影响

目的探讨带有Caspases富集功能域的凋亡抑制因子(ARC)基因沉默对缺氧诱导持续性肺动脉高压(PPH)小鼠的影响。方法18只新生C57BL/6小鼠随机分为对照组、PPH组和ARC沉默组,每组6只。PPH组和ARC沉默组采用12%O_(2)诱导构建PPH模型后,ARC沉默组小鼠尾静脉注射短发夹RNA-ARC重组腺相关病毒100μL,PPH组小鼠尾静脉注射生理盐水100μL,每天1次,注射14 d。测定小鼠右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),HE染色观察肺血管形态,计算血管壁厚度占血管外径百分比(WT%),TUNEL染色观察肺动脉壁细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR检测凋亡因子的表达情况。结果与对照组比较,PPH组和ARC沉默组RVSP、RVHI、WT%升高(P<0.05),肺动脉壁细胞凋亡数减少(P<0.05),Caspase-3和Bcl-2基因相关启动子mRNA表达降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达增加(P<0.05);与PPH组比较,ARC沉默组RVSP、RVHI和WT%降低(P<0.05),肺动脉壁细胞凋亡数增多(P<0.05),Caspase-3和Fas相关死亡域蛋白mRNA表达增加(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达下降(P<0.05)。结论ARC基因沉默能够抑制缺氧诱导PPH小鼠肺血管重塑,促进肺动脉壁细胞凋亡。

siRNA沉默ARC对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞活力的影响

目的利用小干扰RNA(siRNA)技术干扰大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)含胱冬肽酶富集功能域的凋亡抑制因子(ARC)的表达,验证ARC在PASMCs活力变化中的作用。方法体外培养PASMCs,分为常氧组、缺氧组、siRNA-Negative+缺氧组、siRNA-ARC+缺氧组。采用CCK-8法检测细胞活力情况,免疫荧光染色法及Western blot检测ARC在PASMCs中的表达,RT-PCR法分别检测caspase-3、Fadd、Bcl-2、Bad mRNA表达。结果低氧下PASMCs活力较常氧下增加,并呈时间依赖性;与siRNA-Negative+缺氧组比较,siRNA-ARC+缺氧组的PASMCs活力受到抑制;siRNA-ARC+缺氧组PASMCs的caspase-3、Bad、Fadd mRNA表达较siRNA-Negative+缺氧组增加,而Bcl-2 mRNA表达较siRNA-Negative+缺氧组减少(P<0.05)。结论ARC参与调控低氧下大鼠PASMCs生长,对PASMCs活力具有一定的增强作用,可能是促凋亡因子及抗凋亡因子共同作用的结果。