密蒙花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响

目的:观察密蒙花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型中泪腺上皮细胞Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响。方法:将培养生长状态良好的泪腺上皮细胞,随机分为无雄激素培养黄酮治疗组(以下简称密蒙花总黄酮组),含雄激素培养对照组(以下简称雄激素组),无雄激素培养空白组(以下简称空白组)。分别加入含密蒙花总黄酮血浆、丙酸睾酮、含空白血浆开始进行干预。建立干眼症细胞模型。用Trizol试剂提取细胞总RNA。RT-PCR法检测泪腺上皮细胞中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA的表达。结果:密蒙花组、雄激素组能够抑制泪腺上皮细胞中BaxmRNA的表达,与空白组比较差异有显著性(P<0.01);密蒙花组Bax mRNA的表达低于雄激素组,比较差异有显著性(P<0.01)。密蒙花组、雄激素组Bcl-2 mRNA的表达均高于空白组,比较差异有显著性(P<0.01);密蒙花组Bcl-2 mRNA的表达高于雄激素组,比较差异有显著性(P<0.01)。结论:密蒙花总黄酮含药血浆作用于雄激素水平下降所致干眼症的细胞模型可抑制Bax mRNA的表达,使Bax mRNA的表达量降低,同时促进Bcl-2 mRNA的表达,使Bcl-2 mRNA的表达量增加。密蒙花总黄酮含药血浆很可能是通过抑制泪腺上皮细胞中Bax mRNA及促进Bcl-2 mRNA表达的途径而达到抑制细胞凋亡的作用。

9种中药多糖含药血浆对小鼠腹腔Mφ准释放细胞因子的影响

目的研究黄芪等中药多糖干预机体免疫功能的部分机制。方法常规提取黄芪、防风、当归、柴胡、枸杞、地黄、板蓝根、蒲公英、香菇等9味中药多糖组份,分别按大、中、小剂量罐胃给药,制备小鼠含药血浆;选择浓度为20%的含药血浆干预体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ),并用ELISA法检测M准释放IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子(CK)的水平。结果除柴胡多糖外,其余8种中药多糖含药血浆对IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α中1个或多个细胞因子水平具有明显升高或降低作用(P<0.05或P<0.01),且具有浓度差异性(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪等8味中药调节机体免疫功能的机制,可能与这些中药的多糖组份在体内干预巨噬细胞释放IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子有关。

壮骨镇痛胶囊含药血浆培养乳腺癌细胞rac-1,PI3-K转录和细胞伪足的变化

背景:前期实验已证实壮骨镇痛胶囊能显著抑制体外培养乳腺癌细胞的迁移和增殖。目的:进一步观察壮骨镇痛胶囊对高转移人乳腺癌MDA-MB-231细胞rac-1,PI3-K转录和细胞伪足生长的影响。方法:SD大鼠以3倍剂量灌服壮骨镇痛胶囊连续7d,以大鼠含药血浆培养MDA-MB-231细胞24h后,采用扫描电镜法观察不同浓度壮骨镇痛胶囊含药血浆对MDA-MB-231细胞伪足生长的影响,采用RT-PCR法检测含药血浆对MDA-MB-231细胞中rac-1,PI3-K转录的影响。结果与结论:5.0%和1.25%壮骨镇痛胶囊含药血浆能显著抑制MDA-MB-231细胞伪足的形成和生长以及rac-1和PI3-K基因的转录(P<0.05);0.63%壮骨镇痛胶囊含药血浆对伪足生长和rac-1基因转录无显著影响,但可显著抑制了PI3-K基因的转录(P<0.05)。由此推测壮骨镇痛胶囊含药血浆抑制MDA-MB-231细胞迁移可能与其抑制rac-1和PI3-K基因转录进而影响细胞伪足形成和生长密切有关,并且该作用可能与浓度相关。

活血散结中药复方含药血浆对PDGF干预下兔RPE细胞增殖的影响

目的:观察活血散结中药复方含药血浆对血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)干预下兔RPE细胞增殖的影响。方法:酶消化法获取RPE原代细胞,进行RPE细胞的原代培养和传代;制备活血散结中药复方含药血浆;选取第4代兔RPE细胞为实验细胞,PDGF低、中、高剂量(5、10、20μg/L)干预48h后,CCK-8法检测并选取适宜细胞实验干预浓度;建立PDGF干预下RPE细胞增殖模型。实验分组为空白对照组(DMEM)、正常血浆组、PDGF(10μg/L)组、PDGF(10μg/L)+AG1296(10μmol/L)组、PDGF(10μg/L)+10%含药血浆组,PDGF(10μg/L)+20%含药血浆组,分别加入相应处理因素干预24h后,Transwell法测定兔RPE细胞迁移力;而干预48h后,CCK-8法测定兔RPE细胞的细胞活力OD值。结果:10%和20%浓度的活血散结中药复方含药血浆能有效抑制PDGF干预下RPE细胞的细胞活力、细胞迁移。结论:活血散结中药复方含药血浆能够抑制PDGF干预下兔RPE细胞增殖,这可能是其有效治疗增殖性玻璃体视网膜病变的机制之一。

热淋清颗粒含药血浆的高效液相色谱分析

[目的]对热淋清颗粒的含药血浆进行分析,为筛选确定热淋清颗粒的药效成分奠定基础。[方法]在建立热淋清颗粒高效液相色谱指纹图谱的基础上,通过比较热淋清颗粒甲醇提取物、热淋清颗粒含药血浆和空白血浆的高效液相色谱指纹图谱,确定热淋清颗粒血中移行成分。[结果]在热淋清颗粒含药血浆中发现了6个入血成分,其中3个为原型成分,其余几个可能为代谢产物。[结论]6个入血成分可能成为热淋清颗粒的体内直接作用物质,对其进行深入研究,将有助于探索热淋清颗粒的药效物质基础。

基于PPARγ、PTEN基因探讨胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞的影响

目的观察胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞凋亡及PPARγ、PTEN表达的影响,并探讨其作用机制。方法通过灌胃给药制备胃复方含药血浆,采用MTS法检测胃复方含药血浆对人胃癌BGC-823细胞生长的影响,并确定后续给药浓度。将体外培养的人胃癌BGC-823细胞随机分为胃复方含药血浆组(15%胃复方含药血浆)、空白对照组(15%磷酸缓冲盐溶液)、阳性对照组(15%氟尿嘧啶含药血浆)、阴性对照组(15%蒸馏水血浆),处理72 h后采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用RT-PCR法、蛋白质印迹法分别检测PPARγ、PTEN mRNA或蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,胃复方含药血浆组与阳性对照组的细胞凋亡率、PPARγmRNA及蛋白表达水平、PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与阴性对照组比较,胃复方含药血浆组与阳性对照组的细胞凋亡率、PPARγmRNA及蛋白表达水平、PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);但胃复方含药血浆组的细胞凋亡率、PPARγmRNA及蛋白表达水平、PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著低于阳性对照组(P<0.05)。结论胃复方含药血浆可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡,其作用机制可能与活化的PPARγ上调PTEN表达有关。

前癃通含药血浆对前列腺间质细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨前癃通胶囊含药血浆对体外培养前列腺间质细胞增殖和凋亡的影响,为中药复方治疗前列腺增生(BPH)提供实验理论依据。方法按随机原则对入选患者进行实验分组,制备低、中、高剂量前癃通含药血浆,当细胞接近长成单层后进行免疫荧光检测间质细胞鉴定,加含药血浆后培养0、24、48、72 h再分别进行[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT法3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]检测,培养到24 h进行流式细胞分析法检测(Flow Cytometry,FCM)。结果 MTT法检测,不同剂量含药血浆作用于前列腺间质细胞以后,24 h时高剂量组与各组比较差异均有显著统计学意义(P<0.01);48 h时各剂量组间比较差异均有显著统计学意义(P<0.01);72 h时高、中剂量组与空白组比较差异均有显著统计学意义(P<0.01),高剂量组与各组比较差异均有显著统计学意义(P<0.01)。流式细胞检测,中剂量组与空白组比较差异有显著统计学意义(P<0.01);高剂量组与各组间比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论中药前癃通含药血浆可抑制体外培养前列腺间质细胞增殖,促进前列腺间质细胞凋亡。

左归降糖舒心方含药血浆调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制ox-LDL诱导J774A.1巨噬细胞焦亡的机制

目的基于NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/Gasdermin D(GSDMD)通路探讨左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导J774A.1巨噬细胞焦亡的调控机制。方法将分化完全的J774A.1巨噬细胞分为空白血浆组、模型组、左归降糖舒心方含药血浆组、MCC950(NLRP3特异性抑制剂)组,每组6个复孔。除空白血浆组外,其余各组以100 mg·L^(-1)ox-LDL诱导细胞,构建细胞焦亡模型。空白血浆组、模型组、MCC950(50μmol·L^(-1))组以含10%空白血浆进行培养,左归降糖舒心方含药血浆组用10%含药血浆培养细胞24 h。采用CCK-8法测定各组细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率;采用LDH释放实验检测细胞膜完整性及细胞焦亡水平;采用ELISA法及免疫荧光法检测细胞白细胞介素(IL)1β、IL-18含量及蛋白表达情况;采用Western Blot法检测NLRP3、Caspase-1及GSDMD蛋白表达。结果与空白血浆组比较,模型组细胞的IL-18、IL-1β含量及LDH释放率明显增高(P<0.01),IL-1β、IL-18及NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达明显上调(P<0.01)。与模型组比较,左归降糖舒心方含药血浆组细胞的IL-18、IL-1β含量及LDH释放率明显下降(P<0.01),IL-1β、IL-18及NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论左归降糖舒心方含药血浆能够抑制ox-LDL诱导的J774A.1巨噬细胞焦亡状态及炎性反应,其作用机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路,下调细胞炎性因子IL-18、IL-1β表达有关。

活血散结方含药血浆对视网膜色素上皮细胞毒性作用的研究

目的制备活血散结方含药血浆,并研究其不同浓度对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的毒性作用。方法以成年健康家兔为对象,制备活血散结方含药血浆。将提取的兔原代RPE细胞分9个组,分别为:空白对照组、正常血浆组、5%含药血浆组、10%含药血浆组、20%含药血浆组、40%含药血浆组、60%含药血浆组、80%含药血浆组、100%含药血浆组,予以相对应浓度的含药血浆干预,CCK8法检测含药血浆对兔RPE细胞毒作用。结果活血散结方各浓度含药血浆对RPE细胞有抑制作用,其中5%～20%含药血浆对RPE细胞有较弱的抑制作用,但与正常血浆比较,抑制率差异无统计学意义(P>0.05);而40%～100%含药血浆对RPE细胞生长有明显的抑制作用,与正常血浆比较,抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。结论活血散结方含药血浆对RPE细胞有一定的抑制作用,抑制程度与含药血浆浓度成量效关系,可以考虑选择5%～20%含药血浆浓度作为后续实验研究的干预浓度。

前癃通胶囊含药血浆对前列腺间质细胞Smad4基因表达的影响

目的：探讨中药前癃通胶囊含药血浆对体外培养前列腺间质细胞Smad4基因表达的影响,为中药复方治疗良性前列腺增生（BPH）提供实验依据。方法：收集2012年8-10月门诊BPH患者15例,按照随机数字表对入选患者进行实验分组,分为前癃通高、中、低剂量组,制备前癃通含药血浆。同时,体外培养前列腺间质细胞,当细胞接近长成单层后进行免疫荧光检测,进行间质细胞鉴定;加含药血浆后培养24 h,采用实时荧光定量PCR（q-PCR）技术检测间质细胞Smad4基因表达;Western印迹检测Smad4蛋白在间质细胞的表达。结果：经含药血浆处理后间质细胞Smad4基因mRNA的表达随药物剂量增加依次增强,与空白组、无血浆组比较,各组差异均有统计学意义（P〈0.01）。经含药血浆处理后间质细胞Smad4蛋白的表达随药物剂量增加依次增强,与空白组比较,低剂量组差异无统计学意义（P〉0.05）,中剂量组差异有统计学意义（P〈0.01）;与低剂量组比较,中剂量组差异有统计学意义（P〈0.05）;与高剂量组比较,各组之间差异均有统计学意义（P均〈0.01）。结论：中药前癃通胶囊含药血浆体外培养前列腺间质细胞,可抑制其增殖,其机制与促进Smad4基因及蛋白表达有关。

壮骨镇痛胶囊含药血浆对破骨细胞骨吸收功能的影响

目的探讨壮骨镇痛胶囊含药血浆对破骨细胞(osteoclast,oc)骨吸收功能的影响。方法取1日龄新生SD大鼠四肢骨髓分离培养OC,实验组加入2.5%含药血浆,对照组采用生理盐水对照血浆,运用重氮盐法检测含药血浆对OC分泌抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)的影响;运用甲苯胺蓝染色法观察含药血浆对OC形成骨吸收陷窝的影响。结果 2.5%含药血浆共育组在48h、72h、96h对OC分泌TRAP的量都小于对照血浆组且呈明显的时效关系,与对照血浆组比较,其差异具有统计学意义(P<0.01)。2.5%含药血浆组在48h、72h、96hOC的存活数低于对照血浆组,且呈明显的时效关系,与对照血浆组比较,其差异具有统计学意义(P<0.01)。结论壮骨镇痛胶囊含药血浆能够明显抑制OC的活性。

益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

目的探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及相关机制。方法将分化完全的CFs随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6个复孔。除空白血浆组外,其余各组以AngⅡ(10-7 mol·L^(-1))诱导构建细胞增殖及纤维化模型。空白血浆组及模型组以15%空白血浆培养,益心泰含药血浆组以15%益心泰含药血浆培养,干预24 h。采用CCK-8法检测CFs细胞增殖情况;ELISA法测定细胞中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)及转化生长因子(TGF-β1)含量;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western Blot法检测细胞中TGF-β1、B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测CFs的增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平。结果15%益心泰含药血浆对CFs无明显的促细胞增殖或抑制作用。与空白血浆组比较,模型组细胞G0/G1期的细胞百分率明显降低(P<0.01),S期和G2/M期的细胞百分率明显升高(P<0.01);细胞凋亡率有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平均显著升高(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显上调(P<0.01),Bax蛋白表达明显下调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,益心泰含药血浆组细胞的G0/G1期细胞百分率明显升高(P<0.01),S期和G2/M期的细胞百分率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平明显降低(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.01),Bax蛋白表达明显上调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。结论益心泰含药血浆能够抑制CFs细胞增殖分化及纤维化,可能与其调控Bax/Bcl-2平衡及下调纤维化相关因子表达有关。

左归降糖舒心方含药血浆对ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响

目的探讨左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响及其作用机制。方法将巨噬细胞J774A.1随机分为正常组、模型组、牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组、左归降糖舒心方含药血浆组、西药联合含药血浆组,每组5个复孔。除正常组外其余各组以ox-LDL(100 mg/L)处理构建巨噬细胞泡沫化模型。正常组和模型组正常培养,其余各组分别用10%相应含药血浆培养24 h。CCK-8法比较各组J774A.1细胞增殖情况,计算细胞抑制率;油红O染色检测细胞内脂质蓄积水平;Western blot检测双链RNA样内质网激酶(PEPK)、活化转录因子4(ATF4)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)及半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(Caspase-12)的表达水平。结果与正常组比较,模型组细胞抑制率增高,在ox-LDL浓度为100 mg/L时细胞抑制率为(50.06±0.09)%,有明显的脂质颗粒蓄积(P<0.01)。与模型组比较,各药物干预组细胞抑制率降低,可有效阻断ox-LDL的摄入及脂质堆积,其中左归降糖舒心方含药血浆组优于西药联合含药血浆组,与TUDCA组作用效应相当。ox-LDL可诱导细胞内质网应激相关蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP与Caspase-12表达上调。左归降糖舒心方含药血浆可显著抑制100 mg/L ox-LDL所致的p-PERK、p-eIF2α、ATF4的上调,降低内质网相关凋亡蛋白CHOP与Caspase-12的表达(P<0.01),和TUDCA组作用相当(P>0.05),其效果较西药联合含药血浆组明显(P<0.01)。结论左归降糖舒心方含药血浆能有效改善ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化、细胞凋亡及内质网应激状态,其作用机制可能与调控内质网应激信号通路PERK/eIF2α/ATF4通路,降低细胞内CHOP与Caspase-12表达有关。

基于干眼症细胞凋亡模型观察淫羊藿总黄酮含药血浆对foxp3mRNA的作用

目的基于干眼症细胞凋亡模型观察淫羊藿总黄酮含药血浆对foxp3mRNA的作用。方法对雄性新西兰大耳白兔的泪腺上皮细胞进行培养,实验采用3代泪腺上皮细胞,将其随机分为淫羊藿总黄酮、雄激素和空白组。建立干眼细胞模型,将含有淫羊藿总黄酮、丙酸睾酮和空白的血浆分别加入三组泪腺上皮细胞进行干预,然后加入Trizol试剂分离RNA,最终免疫反应相关因子Foxp3mRNA的表达采用定量PCR法来检测。结果雄激素组和淫羊藿总黄酮组中Foxp3mRNA的含量高于空白组,差异显著(P <0.01);淫羊藿总黄酮组中Foxp3mRNA的含量高于雄激素组,差异显著(P <0.01)。结论含有淫羊藿总黄酮的血浆可增加干眼泪腺上皮细胞凋亡模型中Foxp3mRNA的含量。淫羊藿总黄酮含药血浆可增加Foxp3mRNA的含量来减少细胞凋亡。

淫羊藿总黄酮含药血浆对干眼症泪腺上皮细胞模型IL-6表达的影响

目的研究淫羊藿总黄酮含药血浆对干眼症泪腺上皮细胞模型中IL-6表达的影响。方法取健康1月龄雄性新西兰大耳白兔61只,按随机的方法取1只雄兔泪腺,用于培养泪腺上皮细胞,取第3代泪腺上皮细胞用于实验。按随机的方法将60只雄兔分为空白组、淫羊藿总黄酮2.5倍组、淫羊藿总黄酮5倍组以及淫羊藿总黄酮10倍组。利用MTT法决定后面干预细胞含药血浆的浓度。将生长良好的泪腺上皮细胞,随机分成空白组、淫羊藿总黄酮组和雄激素组,分别添加空白血浆、淫羊藿总黄酮血浆、丙酸睾酮进行干预。干预48 h后,再分别加入H2O2继续培养1 h,以建立干眼症细胞模型。通过H2O2诱导雄兔泪腺上皮细胞凋亡,以建立干眼症细胞凋亡模型。用流式细胞术检测各组IL-6的表达。结果根据MTT实验结果选取干预细胞含药血浆的浓度为淫羊藿总黄酮2.5倍组。空白组中IL-6的表达均高于雄激素组、淫羊藿总黄酮组,差异具有统计学意义(P <0.05)。雄激素组中IL-6的表达均高于淫羊藿总黄酮组,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论淫羊藿总黄酮含药血浆作用于干眼症泪腺上皮细胞模型中可抑制IL-6表达,从而使IL-6的表达下调。含淫羊藿总黄酮含药血浆可能是抑制IL-6表达途径从而达到抑制炎症作用,这可能是它治疗干眼症的关键机理之一。

天香丹胶囊含药血浆对H_(2)O_(2)诱导损伤心肌细胞的影响

目的探究天香丹胶囊含药血浆对氧化损伤心肌细胞的影响。方法制备含药血浆和原代培养心肌细胞,用H_(2)O_(2)诱导心肌细胞建立氧化损伤模型,将细胞分为对照组、模型组(100μmol/L H_(2)O_(2))、空白血浆组预处理24 h、天香丹胶囊含药血浆低、中、高浓度组预处理24 h,用MTT法检测天香丹胶囊含药血浆对100μmol/L H_(2)O_(2)氧化损伤心肌细胞2 h的细胞活力;Hoechst 33342染色法观察心肌细胞凋亡形态变化;生化试剂法测定心肌细胞中总抗氧化能力(total antioxidant capacity,TAOC),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;Western blot法检测心肌细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)和三磷酸肌醇受体(Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor,IP3R)的蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组心肌细胞的存活率、T-AOC和SOD水平显著降低并有明显凋亡形态变化,心肌细胞中MDA含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,天香丹胶囊含药血浆组预处理心肌细胞后,可明显增强心肌细胞活力,提高T-AOC和SOD水平,减轻细胞凋亡变化和降低MDA含量,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,模型组心肌细胞的Nrf2蛋白表达水平明显降低,而IP3R蛋白表达水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,天香丹胶囊含药血浆组预处理心肌细胞后,可明显提高Nrf2的表达水平,降低IP3R的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论天香丹胶囊含药血浆对氧化损伤的心肌细胞有保护作用。

活血散结中药复方含药血浆对bFGF干预下兔RPE细胞Bax、Bcl-2表达的影响

目的:探索活血散结中药复方含药血浆对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)干预下兔视网膜色素上皮(RPE)细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法:选用对数生长期兔RPE细胞,分为正常血浆组、bFGF组、bFGF+BGJ398组、bFGF+含药血浆组,Western blotting法检测各组兔RPE细胞Bcl-2、Bax蛋白表达情况,观察活血散结中药复方含药血浆作用后RPE细胞Bcl-2、Bax蛋白在兔RPE细胞中的表达。结果:bFGF+含药血浆组与bFGF比较,Bax蛋白表达明显增强,Bcl-2蛋白表达明显抑制,差别均有显著统计学意义(P<0.01)。结论:活血散结中药复方含药血浆作用于bFGF干预下所致增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的细胞模型,可促进RPE细胞Bax蛋白的表达,同时抑制Bcl-2蛋白的表达,使Bax/Bcl-2构成比升高。

黄芩含药血浆与含药血清中黄芩苷对比研究

目的从大鼠灌胃黄芩煎液的给药剂量、天数及采血时间方面开展试验,比较含药血浆与含药血清中黄芩苷,初步探讨建立规范的黄芩中药血浆药理方法。方法大鼠灌胃黄芩煎液后,取其第1、3天给药后的1h,2h及第5天给药后1h、2h、6h、12h含药血浆和含药血清,采用HPLC-MS法,测定含药血浆和含药血清中黄芩苷含量。结果大鼠灌胃黄芩3~5天取药后1h含药血浆与血清黄芩苷浓度相对较高。结论为黄芩中药血浆药理方法学给药剂量、时间及采血时间提供了理论依据。

左归降糖益肾方药含药血浆对足细胞损伤模型miRNA-30d及GPP78表达的影响

目的探讨左归降糖益肾方药含药血浆处理体外培养的小鼠足细胞对miRNA-30d及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平的影响。方法将体外培养的小鼠足细胞随机分为空白血浆组(25mmol/L葡萄糖,10%空白血浆)、模型组(D-葡萄糖50 mmo/L联合棕榈酸2 mmo/L,10%空白血浆)、中药含药血浆组(D-葡萄糖50 mmo/L联合棕榈酸2 mmo/L,10%中药含药血浆),4-苯基丁酸(4-PBA)含药血浆组(D-葡萄糖50 mmo/L联合棕榈酸2 mmo/L,10%4-PBA含药血浆)。处理48h后,采用Real-time RT-PCR法检测miRNA-30d表达水平;RT-PCR法、Western blot法检测GRP78mRNA或蛋白表达水平的变化。结果与空白组相比,模型组足细胞miRNA-30d表达水平下调、GRP78 mRNA和蛋白的表达水平均上调(P<0.01),且miRNA-30d与GRP78表达水平呈负相关(P<0.05);与模型组相比,中药含药血浆组足细胞miRNA-30d表达水平上调,GRP78 mRNA和蛋白的表达水平均下调,差异均有统计学意义(P<0.01),且在下调miRNA-30d表达水平方面与4-PBA含药血浆组作用相当。结论左归降糖益肾方药含药血浆可以上调miRNA-30d表达水平,下调GRP78 mRNA和蛋白表达水平,从而改善D-葡萄糖联合棕榈酸诱导的足细胞损伤。

肿节风总黄酮含药血浆对大鼠骨髓巨核细胞增殖及TPO、TGF-β1含量的影响

目的:探讨肿节风总黄酮含药血浆对大鼠骨髓巨核细胞增殖及TPO、TGF-β1含量的影响。方法:分别一次性灌胃给予SD大鼠肿节风总黄酮0.39、2.0 g/kg,于给药后20、40、60 min眼眶取血收集肿节风总黄酮含药血浆。采用兔抗大鼠血小板相关抗体(稀释倍数为128倍)建立大鼠骨髓巨核细胞增殖障碍模型,考察肿节风总黄酮0.39、2.0 g/kg含药血浆对大鼠骨髓巨核细胞增殖及培养上清液中TPO、TGF-β1含量的影响。结果:(1)兔抗大鼠血小板相关抗体可显著降低大鼠骨髓巨核细胞增殖;相对于空白血浆组,肿节风总黄酮0.39、2.0 g/kg含药血浆可显著促进大鼠骨髓巨核细胞的增殖。(2)兔抗大鼠血小板相关抗体可显著降低大鼠骨髓巨核细胞培养体系中TPO含量,显著增加TGF-β1含量;相对于空白血浆组,肿节风总黄酮0.39、2.0 g/kg含药血浆可显著增加大鼠骨髓巨核细胞培养体系中TPO含量,显著降低TGF-β1含量。结论:肿节风总黄酮0.39、2.0 g/kg含药血浆可显著促进大鼠骨髓巨核细胞的增殖,可能与增加大鼠骨髓巨核细胞培养体系中TPO含量,降低TGF-β1含量等有关。