芝麻Cu/Zn超氧化物歧化酶基因的全基因组鉴定与分析

铜/锌超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)是植物体内非常重要的一种活性氧清除酶系统,本研究通过blast的方法,在芝麻全因组水平进行Cu/Zn-SOD的鉴定。结果显示,芝麻中含有4条Cu/Zn-SOD,分别命名为SiCSD1、SiCSD2、SiCSD3、SiCSD4。理化性质分析表明,4种蛋白质均为酸性蛋白质,除SiCSD3外,均为亲水蛋白。结构域分析发现,蛋白质均含有Cu/Zn-SOD特有的结构域和金属离子结合域,但都不具有跨膜结构和信号肽。亚细胞定位预测分析发现,SiCSD1-3均定位于叶绿体,SiCSD4除了叶绿体,也有可能定位于细胞质。进化树分析发现,SiCSD3与拟南芥AtCSD2聚为一支,SiCSD4与拟南芥AtCSD3聚为一支,SiCSD1和SiCSD2与烟草NpSODC、番茄SlSODC1和SlSODC2聚在一个大的分支。以上结果初步表明,SiCSD1-4具有Cu/Zn-SOD共同的理化性质,其序列的鉴定将为后续功能的研究打下基础。

杨梅Cu/Zn超氧化物歧化酶基因(MrSOD1)cDNA的克隆及表达分析

以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/ZnSOD的特征信号序列;序列同源性分析表明,其与GenBank中注册的Cu/ZnSOD序列的同源性均在77%以上。该基因命名为MrSOD1(GenBank登录号:GQ404510)。半定量RT-PCR分析显示,MrSOD1在4种组织中表达量为:果>叶>花>枝条。本试验为进一步研究MrSOD1的时空表达特性、调控途径及杨梅抗氧化伤害的分子机理奠定基础。

盐胁迫下花花柴 miR398 对 Cu/Zn 超氧化物歧化酶基因的调控研究

植物miRNA能够参与盐胁迫下基因表达的调控。在盐胁迫条件下盐生植物花花柴miR398（KcmiR398）呈现显著性差异表达，为了探讨rniR398的靶基因及其对靶基因的调控方式，通过生物信息学分析（http：／／plant—grn．noble．Org／psRNATarget／），预测KcmiR398的靶基因分别为Cu／Zn超氧化物歧化酶（SOD）基因CSDl和CSD2。利用RACE技术从花花柴中克隆到CSDl和CSD2基因全长序列，分别命名为KcCSDl和KcCSD2。qRTPCR结果表明：（1）KcmiR398在盐胁迫的花花柴茎中上调表达，在新叶中下调表达；KcCSDl在盐胁迫的老叶中上调表达，而在老茎和根中下调表达；KcCSD2在盐胁迫的老茎和根中上调表达。（2）300mmol／I，NaCl胁迫24~48h，KcmiR398与对照无显著差异；KcCSDl的表达为对照的3倍以上，而KcCSD2的表达没有显著差异。研究表明，花花柴的KcmiR398和KcCSDl、KcCSD2有组织差异性表达，盐胁迫可以影响KcmiR398和KcCSDl、KcCSD2基因的表达以适应盐胁迫产生的氧化危害。

铜锌超氧化物歧化酶(Cu_2Zn_2SOD)在汞电极上的吸附研究

Adsorption behaviors of Cu2Zn2SOD on mercury electrodes were studied by the electrostatic capillary curve and the relationship between polarographic ultimate current and height of mercury column in the absence of the mediators. The effects of impure and denatured SOD on cyclic voltammogram were investigated, confirming that no denaturation was caused during adsorption on mercury electrodes. Double potential step chronocoulometry has confirmed that SOD adsorption on mercury electrode to be the absorption of monomolecular layer.

肝片吸虫含Cu/Zn超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)的分子克隆与表达

肝片吸虫是一种引起哺乳动物片吸虫病的肝内吸虫,寄生于胆管,主要进行无氧代谢,通常认为宿主可借助氧自由基杀伤虫体。超氧化物岐化酶(SOD)是一种重要的抗氧化酶,在肝片吸虫抵抗宿主氧自由基介导的杀伤机制中对虫体起保护作用。为进一步阐明其机制,作者从感染肝片吸虫的牛肝内收集成虫,抽提SOD,经纯化后分析其特性,并建立cDNA文库;克隆其基因,在大肠杆菌中表达。

细胞外超氧化物歧化酶的研究进展

超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）是机体内广泛存在的一类金属抗氧化酶．能催化超氧阴离子自由基的歧化反应．清除细胞生命活动中产生的超氧离子。真核细胞内存在两类SOD：Cu／Zn—SOD和Mn—SOD。1982年Marklund等发现了第3种SOD并命名为胞外SOD（extracellular—SOD，EC—SOD），它是细胞外体液．如淋巴液、滑膜液及血浆中最主要的SOD。

可见光谱法研究铜锌超氧化物歧化酶与精氨酸钴(Ⅱ)的相互作用

采用可见光谱（ＶＩＳ）及酶活性测定等方法，研究铜锌超氧化歧化酶 （Ｃｕ_２Ｚｎ_２ＳＯＤ）与精氨酸钴（Ⅱ）（Ｃｏ（Ａｒｇ）ｎ）的直接相互作用以及外加精氨酸钻（Ⅱ）的量、溶液ｐＨ值对此类相互作用的影响．结果发现：在水溶液中原酶活性中心处的Ｚｎ（Ⅱ）离子可被外加的精氨酸钻（Ⅱ）部分诱导、交换出来，而溶液中外加的 Ｃｏ（Ａｒｇ）ｎ中的 Ｃｏ（ Ⅱ）进入酶的活性中心，形成“Ｃｏ－ＳＯＤ”酶衍生物，并相应影响了酶的催化活性．与此同时，外加精氨酸钴（Ⅱ）的量、溶液ｐＨ值对此类相互作用进行有重要的影响．

牦牛铜锌超氧化物歧化酶基因cDNA克隆测序及其分子进化研究

对牦牛Cu/Zn-SOD cDNA进行克隆测序。所扩增片段长度为842bp,编码区长度为459bp。扩增片段与奶牛Cu/Zn-SOD cDNA序列比较发现有16个碱基存在差异。通过与已知Cu/Zn-SOD cDNA序列的7个物种:人、猪、鼠、大鼠、奶牛以及马的cDNA序列的比较构建了分子进化系统树。对所得序列的ORF分析发现,牦牛Cu/Zn-SOD由152个氨基酸组成,并对氨基酸序列进行了比对分析。

超氧化物歧化酶研究中辩证思想的体现

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,简称SOD),是一种重要的氧自由基(又称活性氧)清除剂。它与人类的健康和疾病的发生发展有着密切的关系,因此,在医药界和生化界引起了人们的广泛研究兴趣。本文试从SOD的发现、发展及研究现状出发,说明人们是如何运用辩证法思想认识问题、解决问题的。

儿童红细胞超氧化物歧化酶活性与血清铜锌分析

超氧化物歧化酶(SOD)是生物细胞内天然的自由基清除剂,其生物学意义已受到医学界的广泛关注。人类红细胞SOD有数种,其主要形式是铜锌SOD(CuZn-SOD)。微量元素Cu、Zn对维持CuZn-SOD的结构及其催化活性起着重要作用,且血清中Cu、Zn水平与CuZn-SOD活性亦存在一定的关系。我们对35例4～6岁学龄前儿童血清Cu、Zn、Cu/Zn比值及红细胞活性进行了测定分析,现报告如下。 1 材料与方法 1.1 研究对象

Cu^(2+)、Zn^(2+)对罗氏沼虾鳃中SOD同工酶的影响

采用生态学单因子梯度试验方法,研究了水环境中添加0.01mg/L,0.08mg/L,0.64mg/L,5.12mg/L的Cu2+,Zn2+对罗氏沼虾鳃中超氧化物歧化酶(SOD)同工酶活力和酶谱的影响.结果显示:随着Cu2+,Zn2+浓度的增加鳃中SOD酶活力均呈先增加后减少的变化趋势,分别在0.64 mg/L Cu2+和0.08 mg/L Zn2+时SOD酶活力达到最大(73.57±0.12 U/mg和53.63±0.17 U/mg),且均与对照组有显著差异(P<0.05);低浓度Cu2+处理组SOD同工酶酶谱出现SOD酶带变宽、颜色加深现象,并在0.08 mg/L和0.64 mg/L浓度组中新增一条酶带(SOD2),而高浓度组(5.12mg/L)明显抑制SOD酶带活性,新增的条带也缺失;同样低浓度的Zn2+使得SOD酶谱的条带变宽,颜色加深,但没有出现新增酶带,而高浓度(5.12 mg/L)Zn2+使得条带变窄,颜色变淡.结果表明:这两种金属离子对罗氏沼虾鳃中SOD同工酶活力及酶谱的影响与浓度有关,Cu2+对SOD的影响明显大于Zn2+,SOD同工酶活力和酶谱的变化可以灵敏地反映Cu2+的胁迫程度和毒性.

铜锌金属天然酶活性中心量子化学计算

以菠菜叶中天然超氧化物歧化酶 (SOD)铜锌活性中心及人为去掉金属锌的活性中心为模板 ,运用Gaussian 94量子化学程序 ,在B3LYP/LANL2DZ基组水平上进行了计算 ,获得了分子轨道能量、电荷分布以及原子轨道对前沿分子轨道贡献的信息 .结果表明 ,金属铜对于催化歧化超氧阴离子O2 -·具有至关重要的作用 ,而金属锌起到稳定结构和促成构建活性中心的作用 .

饲料中添加铁、铜、锰和锌对异育银鲫生理机能的影响

为研究铁(Fe)、铜(Cu)、锰(Mn)和锌(Zn)4种微量元素对鲫鱼生理机能的影响,试验采用正交设计L9(34),添加Fe、Cu、Mn和Zn4种微量元素,配制9种试验饲料饲喂异育银鲫当年鱼种,进行为期8周的饲养试验。结果表明,在4种微量元素中,Zn对血清溶菌酶、黏液溶菌酶、肝胰总SOD酶(T-SOD)和血红蛋白的影响最大,Mn对血清T-SOD酶、黏液T-SOD酶、肝胰CuZnSOD酶和肝胰谷丙转氨酶(GPT)的影响最大,Cu对血清CuZnSOD酶的影响最大,而Fe对血清谷丙转氨酶影响最大。

PEP-1-SOD1融合蛋白预处理对大鼠骨髓间充质干细胞在缺氧无血清条件下的保护作用

目的:研究PEP-1-SOD1融合蛋白转导入大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的能力及其在缺氧无血清条件下对MSCs的保护作用。方法:将纯化后的SOD1和PEP-1-SOD1蛋白分别加入到培养及鉴定后的第3代MSCs中,免疫荧光法和Western blot分析PEP-1-SOD1穿透入MSCs的变化,黄嘌呤氧化酶法分析其SOD酶活性。将2.5μmol/L PEP-1-SOD1预处理MSCs 45 min后去除PEP-1-SOD1,缺氧无血清条件下再处理24 h,Annexin V/PI双染标记,流式细胞术分析MSCs凋亡情况。结果:PEP-1-SOD1融合蛋白可以转导入MSCs,呈时间和剂量依赖性分布于胞浆和胞核,缺氧无血清条件下MSCs凋亡率明显降低(P<0.05)。结论:PEP-1-SOD1融合蛋白可以高效、稳定转导入MSCs,并对缺氧无血清所诱导的MSCs凋亡具有显著保护作用。

真菌铜离子内稳态(homeostasis)调节的多样性

铜是生物体中必需的微量元素之一,作为多种氧化酶的辅助因子参与不同的生物反应,对于维持生命活动起到重要的作用。但在过量的情况下,无论是一价铜离子还是二价铜离子对于生物体都具有很强的细胞毒性,因此铜的代谢是受细胞严格调控的。以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为模式生物对铜代谢的研究已取得了很大进展,对其它高等生物体内铜代谢及其重要生理功能提供了重要信息。本文对酿酒酵母中铜离子的吸收、转运以及在细胞内的代谢调控的新进展进行了归纳,并结合自己的研究综述了真菌铜代谢调节的共性与差异。