miR-let-7b-5p靶向调控LIMD2对胃癌细胞间质-上皮转化的影响

目的:探究微小RNA(miR)-let-7b-5p靶向调控含LIM域2蛋白(LIMD2)对胃癌(GC)细胞间质-上皮转化(MET)的影响。方法:采用qRT-PCR检测GES-1、SCG-7901、MGC-803、BGC-823细胞中miR-let-7b-5p相对表达水平;构建绿色荧光蛋白(GFP)和miR-let-7b-5p稳定过表达细胞株,qRT-PCR法检测miR-let-7b-5p过表达效率;生物信息学和双荧光素酶实验预测并验证miR-let-7b-5p与LIMD2靶向关系;构建pcDNA5-LIMD2过表达载体,将细胞分为NC组、miR-let-7b-5p组、miR-let-7b-5p-pcDNA5组和miR-let-7b-5p-LIMD2组,Western Blot检测各组细胞中LIMD2、Vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达;Transwell法检测miR-let-7b-5p对MGC-803细胞侵袭能力的影响。结果:与GES-1相比,SCG-7901、MGC-803、BGC-823细胞中miR-let-7b-5p相对表达水平明显下降(P<0.05)。与NC组相比,miR-let-7b-5p组miR-let-7b-5p相对表达量升高(P<0.05),转染LIMD2-WT的细胞相对荧光素酶活性明显降低(P<0.05),LIMD2、Vimentin、N-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达上调(P<0.05),细胞侵袭个数减少(P<0.05)。与miR-let-7b-5p组相比,miR-let-7b-5p-LIMD2组LIMD2、Vimentin、N-cadherin蛋白表达上调(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),细胞侵袭个数增多(P<0.05)。结论:过表达miR-let-7b-5p可靶向下调LIMD2促进胃癌细胞的MET,从而有效改善肿瘤细胞的侵袭。

子宫内膜癌组织中LIMD2的表达及临床意义

目的探讨子宫内膜癌组织中含LIM域2蛋白(LIMD2)的表达及临床意义。方法收集2014年1月至2017年12月经手术切除的子宫内膜癌组织89例、正常内膜组织57例及不典型增生组织61例,采用实时定量PCR(QPCR)法检测上述组织中LIMD2的表达情况,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估组织LIMD2水平诊断子宫内膜癌的效能;分析LIMD2表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系(年龄、淋巴结转移、FIGO分期、病理类型、组织学分级和肌层浸润深度);采用Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析LIMD2表达与子宫内膜癌预后的关系。结果子宫内膜癌组织的LIMD2 mRNA水平为3.095±1.236,高于不典型增生组织的1.297±0.420和正常内膜组织的1.176±0.444(P<0.05),而不典型增生组织与正常内膜组织LIMD2表达水平的差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线显示,组织LIMD2水平诊断子宫内膜癌的曲线下面积为0.901(95%CI:0.851~0.951),以1.918为截断值对应的约登指数最大(0.7865),灵敏度和特异度分别为78.65%和100.0%。LIMD2表达与年龄和病理类型及均无关(P>0.05),与淋巴结转移、FIGO分期、肌层浸润深度和组织学分级均有关(P<0.05)。Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析结果发现,LIMD2表达与无复发生存期有关(HR=0.53,95%CI:0.29~0.98,P<0.05),而与总生存期无关(P>0.05)。结论子宫内膜癌组织中LIMD2高表达,且与淋巴结转移、FIGO分期、组织学分级、肌层浸润深度和复发有关,可能参与该肿瘤的发生、发展,可能成为子宫内膜癌诊断和病情预测的新型分子标记物。