含TPR干扰素诱导蛋白在消化系统肿瘤中作用的研究进展

本文从含TPR干扰素诱导蛋白(IFITs)的基本特征、在消化系统肿瘤中的生物学功能及其分子机制及在消化系统肿瘤诊治中的价值等方面进行综述。

严重烧伤小鼠肝细胞IFIT1表达与凋亡的关系

目的:探讨严重烧伤急性应激期干扰素诱导含TPR基序的蛋白1(interferon-induced protein with tetratricopetide repeats 1,IFIT1)表达与肝细胞凋亡的关系。方法:健康C57/129小鼠25只,随机分成5组,每组5只:正常对照(0 h)组、烧伤后1,6,12和24 h组。制作烧伤组大鼠20%总体表面积(total body surface area,TBSA)III度烧伤模型。取肝组织,Western印迹观察IFIT1表达;免疫组织化学检测caspase-3和caspase-8表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测肝细胞凋亡。结果:IFIT1烧伤后1 h开始增高,6 h最高,12 h开始降低,24 h降至最低,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);caspase-3和caspase-8烧伤后随时间逐渐增高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);TUNEL法显示烧伤后肝细胞凋亡1 h与0 h比较差异无统计学意义(P>0.05),6 h至24 h呈逐渐增高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:严重烧伤后IFIT1表达增高可促使肝细胞凋亡的增强。

干扰素诱导基因IFIT3对膀胱癌细胞生物学功能及化疗耐药性的影响

目的:探讨干扰素诱导基因IFIT3在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞生物学功能和化疗耐药性的影响。方法:本研究通过q RT-PCR或Western blot检测了30例膀胱移行细胞癌患者的肿瘤组织和配对正常癌旁组织标本以及人膀胱癌细胞系T24及人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1中IFIT3的表达水平。通过浓度递增法构建顺铂(DDP)耐药T24细胞(T24/DDP),然后对细胞转染靶向IFIT3的si RNA(si-IFIT3)及阴性对照(si-NC)。将细胞分为4组,分别为T24-si-NC组、T24-si-IFIT3组、T24/DDP-si-NC组、T24/DDP-si-IFIT3组,通过MTT法检测细胞增殖,使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,使用Transwell法检测细胞侵袭能力。通过qRT-PCR或Western blot检测HSP90α(HSP90AA1)、MMP2、MMP9、Cleaved-caspase-3、Bcl-2和Bax的表达水平。结果:与配对癌旁组织和SV-HUC-1相比,膀胱癌组织和T24细胞中IFIT3的m RNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.001)。与正常T24细胞相比,T24/DDP细胞中的IFIT3 m RNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.001)。与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的IC_(50)值和侵袭细胞数显著降低,而细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的Bcl-2、MMP2和MMP9蛋白相对表达量显著降低,而Bax和Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。String数据库显示,IFIT3与HSP90AA1基因存在互作关系。与T24/DDP-si-NC组相比,T24/DDP-si-IFIT3组的HSP90α(HSP90AA1)表达水平显著降低(P<0.05)。结论:下调IFIT3的表达可抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭,并促进细胞凋亡,下调IFIT3可部分通过抑制HSP90α(HSP90AA1)的表达来降低膀胱癌细胞对顺铂的耐药性。

PPARα在移植免疫中的作用

器官移植是治疗器官终末期疾病的主要方法,而移植排斥是移植物丧失功能的主要原因。先天性和获得性免疫均参与了移植排斥反应。长途/白细胞介素1受体结构域含适配器蛋白诱导干扰素（toll/interleukin-1receptor domain-containing adaptor-protein inducing interferon,TRIF）和髓样分化因子88（myeloid Differentiation Factor 88，MyD88）先天性免疫反应中具有重要作用，在先天性和获得性免疫中具有桥梁作用，过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator—activated receptor．PPAR）α具有抑制免疫反应和调节免疫偏移及抑制TRIF和MyD88表达的作用，因此，PPARα可能在诱导移植耐受上具有潜在的应用价值。

肠道缺血-再灌注致远隔组织损伤的信号传导机制

目的 应用不同的抗体蛋白研究小鼠肠道缺血-再灌注致远隔组织损伤时Toll样受体4（TLR4）-高迁移率族蛋白1（HMGB1）及其下游信号的传导途径.方法 SPF级雄性C57BL/6小鼠40只,采用随机数字表法分为5组：假手术组、对照组、抗HMGB1组、抗髓样细胞分化基因88 （MyD88）组和抗含诱导干扰素β的衔接蛋白（TRIF）组,每组8只.对照、抗-HMGB1、抗-MyD88和抗-TRIF组在行肠道缺血-再灌注手术前30 min分别经尾静脉注射对照IgG、HMGB1、MyD88和TRIF抗体（剂量为1 mg/kg,浓度为0.025％）.所有小鼠麻醉、开腹后,除假手术组外的4组用无创血管夹夹闭肠系膜上动脉60 min后再灌注60 min,假手术组只开腹120 min,不进行缺血-再灌注.检测血浆核因子-κB（NF-κB） p65、白细胞介素6（IL-6）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度;肺和肠道组织形态学变化和HMGB1与NF-κB的mRNA和蛋白表达.结果 小鼠肠道缺血-再灌注损伤时,与对照组[（228.534-24.85）、（104.91±31.18）及（70.81±46.97） ng/L]比较,缺血前通过注射抗体抑制HMGB1[（145.00±33.63）、（62.28±6.73）及（52.76±5.71） ng/L]、MyD88[（191.12± 13.22）、（85.90± 17.37）及（63.19±5.47） ng/L]和TRIF[（183.73±10.81）、（78.14±7.38）及（59.70±4.63） ng/L]的表达能明显降低血浆炎症因子NF-κB（P=0.000、0.005、0.001）、IL-6 （P=0.000、0.004、0.000）及TNF-α（P=0.000、0.024、0.002）的水平,同时减轻了肺脏和小肠组织的损伤.抗-HMGB1组、抗-MyD88组和抗-TRIF组小鼠肺脏和回肠的HMGB1 mRNA（肺脏：1.89±0.18、2.35±0.31和2.29±0.28,回肠：4.93±0.55、5.96±0.73和5.76±0.51）、NF-κB mRNA（肺脏：1.42±0.23、1.77±0.18和1.70±0.13,回肠：2.23±0.55、3.11±0.38和2.99±0.24）和蛋白表达较假手术组[肺脏HMGB1mRNA （1.04±0.19） （P=0.000、0.000、0.000）、NF-κB mRNA （1.03±0.21） （P=0.004、0.000、0.000）,回肠HMGB1 mRNA （1.14±0.54） （P=0.000、0.000、0.000）、NF-κB mRNA （1.03±0.23）（P=0.000、0.000、0.000）]升高,差异有统计学意义,但与对照组[肺脏HMGB1 mRNA（2.67±0.30） （P=0.000、0.035、0.016）、NF-κB mRNA （2.04±0.29） （P=0.000、0.039、0.012）,回肠HMGB1 mRNA （6.70±0.66） （P=0.001、0.038、0.015）、NF-κB mRNA（3.71±0.53） （P=0.000、0.018、0.006）]相比其余3组的升高程度明显降低,其中抗-HMGB1组降低的程度最为显著.抗-HMGB1抗体、抗-MyD88抗体和抗-TRIF抗体的应用能明显减轻缺血-再灌注引起的组织损伤,其中抗-HMGB1抗体的作用最为显著.结论 HMGB1及其下游信号途径在小鼠肠道缺血-再灌注损伤中具有重要作用,在两条下游信号途径中,TRIF依赖途径发挥的作用比MyD88依赖途径更大些.