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铜绿假单胞菌随机启动子库的构建及受铁调控基因的筛选和鉴定 被引量:2
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作者 王琰 魏金花 +1 位作者 沈立新 段康民 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期863-868,共6页
【目的】针对铁这种几乎所有微生物都必需的,对病原菌尤为重要的营养元素,在全基因组水平上检测铜绿假单胞菌的铁感应基因。【方法】采用含LuxCDABE报道子的质粒pMS402为载体,构建了铜绿假单胞菌的随机启动子库,建立了特定条件下研究铜... 【目的】针对铁这种几乎所有微生物都必需的,对病原菌尤为重要的营养元素,在全基因组水平上检测铜绿假单胞菌的铁感应基因。【方法】采用含LuxCDABE报道子的质粒pMS402为载体,构建了铜绿假单胞菌的随机启动子库,建立了特定条件下研究铜绿假单胞菌全基因组基因表达变化的高通量平台。【结果】验证了2个已知的受铁调控的基因,并发现了尚未报道的二氢叶酸还原酶,磷酸葡萄糖脱水酶和柠檬酸铁转运蛋白受铁调控的现象,发现与铁相关的四个功能未知的基因和3个假定蛋白的基因。【结论】研究结果对于阐明铁在铜绿假单胞菌中的调控作用,揭示铁对细菌生理及致病性的作用机制提供了理论基础。随机启动子库的构建也为细菌基因组水平研究基因表达提供了一个有用的工具。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 随机启动子库 基因调控
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氧化葡萄糖酸杆菌启动子的筛选及鉴定 被引量:1
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作者 肖苏珂 杨雪鹏 +1 位作者 魏东芝 林金萍 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期654-658,共5页
利用缺乏启动子的绿色荧光蛋白TFP作为报告基因,与广宿主型质粒pBBR1MCS-5相结合,构建了可在氧化葡萄糖酸杆菌中稳定存在的探针质粒pBBR1MCS5-TFP。利用构建的启动子探针质粒从氧化葡萄糖酸杆菌中分离到多个具有启动子功能的DNA片段——... 利用缺乏启动子的绿色荧光蛋白TFP作为报告基因,与广宿主型质粒pBBR1MCS-5相结合,构建了可在氧化葡萄糖酸杆菌中稳定存在的探针质粒pBBR1MCS5-TFP。利用构建的启动子探针质粒从氧化葡萄糖酸杆菌中分离到多个具有启动子功能的DNA片段——G12、G65、G69和G78,序列测定结果显示G12片段上具有典型的细菌启动子保守序列(-35和-10区)和核糖体结合位点(RBS),将其命名为Lhp启动子。鉴定Lhp在氧化葡萄糖酸杆菌中的启动活性,结果显示该启动子能有效启动异源基因绿色荧光蛋白以及NADH脱氢酶Ⅱ基因的表达。 展开更多
关键词 氧化葡萄糖酸杆菌 随机启动子库 启动子探针质粒 特征序列与功能
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phoA为报告基因的甲型副伤寒沙门氏菌启动子文库的建立及初步鉴定 被引量:1
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作者 许泽仰 洪愉 +7 位作者 冯梦蝶 毛普加 宋武战 杨洪文 赵继华 黄芬 井申荣 曾韦锟 《医学分子生物学杂志》 CAS 2014年第4期187-191,共5页
目的:构建以phoA为报告基因的甲型副伤寒沙门氏菌启动子文库。方法构建了以phoA为报告基因的“启动子陷阱载体” pPhoA,将甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA的随机酶切片段(500~1500 bp)连接到载体上,启动phoA表达产物与BCIP产生蓝色... 目的:构建以phoA为报告基因的甲型副伤寒沙门氏菌启动子文库。方法构建了以phoA为报告基因的“启动子陷阱载体” pPhoA,将甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA的随机酶切片段(500~1500 bp)连接到载体上,启动phoA表达产物与BCIP产生蓝色反应筛选启动子,经过PCR、测序、比对等分析文库质量。结果库容量达到30000个,覆盖基因组全长的2.6倍,同时验证了4个能够在加入BCIP的平板中表现出蓝色的菌落,发现了4个启动子插入片段。结论成功构建高质量的甲型副伤寒沙门氏菌启动子文库,为进一步研究甲型副伤寒沙门氏菌的基因表达与调控奠定了基础。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 PHOA BCIP 启动子库
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Study on Cloning and Polymorphism of Porcine Adiponectin Promoter 被引量:2
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作者 凌飞 汪亮亮 +2 位作者 杜红丽 李仕新 陈瑶生 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第6期53-56,共4页
[ Objective] The aim of this study was to provide a basis for study on adiponectin as a candidate gene for fat deposition. [ Method] The promoter sequence of adiponectin was obtained by porcine BAC library screening a... [ Objective] The aim of this study was to provide a basis for study on adiponectin as a candidate gene for fat deposition. [ Method] The promoter sequence of adiponectin was obtained by porcine BAC library screening and primer-walking method. The polymorphisms of adiponectin promoter from 290 pigs, including 5 breeds of Lantang pig, Large spotted pig, Large white pig, Landrace and Duroc, were analyzed with PCR-RFLP. [ Result] At SNP site of adiponectin 5'-flanking region -1 010 bp (G/A), GG genotype frequency in Chinese indigenous pigs was significantly higher than that in exotic pigs. At SNP site of adiponectin 5'-flanking region -394 bp (T/C), the genotype distribution of Chi- nese indigenous pigs was abundant, while no CC genotype was detected in exotic pigs, and T allele frequency was higher in exotic pigs. [ Conclusion] SNP site mutation of - 1 010 bp (G/A) may lead to changes of the gene transcription level, while SNP site of -394 bp (T/C) properly has no relationship with gene transcription level and fat deposition. 展开更多
关键词 PORCINE BAC library ADIPONECTIN PROMOTER SNP
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