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人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体的构建与鉴定
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作者 曾琪 胡巢凤 +1 位作者 孙丽萍 陆大祥 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期128-132,共5页
目的:构建人NOD8基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体。方法:用特定的限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因启动子不同长度2段序列,并进行酶切以切除启动子的pEGFP-C2作框架结构,插入表达载体pEGFP-C2中,构建含有... 目的:构建人NOD8基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体。方法:用特定的限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因启动子不同长度2段序列,并进行酶切以切除启动子的pEGFP-C2作框架结构,插入表达载体pEGFP-C2中,构建含有人NOD8基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-NOD8(520 bp)、pEGFP-C2-NOD8(760 bp),用VspⅠ和NheⅠ双酶切和PCR鉴定重组质粒,再将重组质粒进行DNA序列分析。构建的重组质粒经脂质体(lipofectam ine)TM2000介导转染HEK293、K562和HeLa细胞,转染48 h后在倒置荧光显微镜下观察。结果:pEGFP-C2-NOD8(520 bp)、pEGFP-C2-NOD8(760 bp)分别经酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,构建的2段重组质粒转染HEK293、K562及HeLa细胞均能表达绿色荧光,其中构建的pEGFP-C2-NOD8(760 bp)重组质粒绿色荧光表达强于pEGFP-C2-NOD8(520 bp)。结论:成功构建2段不同长度的人NOD8基因启动子绿色荧光蛋白表达载体。 展开更多
关键词 核苷酸结合寡聚化结构域8启动子(NOD8启动子) 载体 绿色荧光蛋白 基因表达
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具有真细菌启动子功能的盐生盐杆菌质粒DNA片段的结构与功能初步分析
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作者 叶学成 夏小翔 沈萍 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S3期362-362,共1页
关键词 盐生盐杆菌 结构与功能 启动子功能 DNA片段 真细菌 初步分析 启动子探针质粒 真核生物 生命科学学院 启动子结构
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《中国癌症防治杂志》 CAS 1998年第4期246-246,共1页
关键词 视网膜母细胞瘤 基因启动子 正常人 点突变 序列测定 基因产物 患者 片段 启动子结构 活性下降
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高粱叶绿体psbA基因的结构特征及其5'-非编码区的调控效应 被引量:7
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作者 吴乃虎 方晓华 +4 位作者 施晓梅 张晓武 周立 黄美娟 孙凯鸣 《中国科学(C辑)》 CSCD 1999年第4期397-406,共10页
报道高粱叶绿体光系统ⅡpsbA基因的结构特征及其 5′ 非编码区的调控效应 .比较分析表明 ,C4 植物高粱与C3植物水稻psbA基因的核苷酸序列及其推测的氨基酸序列的一级结构之间 ,存在着高度的同源性 .高粱psbA基因 5′ 非编码区 ,含有类... 报道高粱叶绿体光系统ⅡpsbA基因的结构特征及其 5′ 非编码区的调控效应 .比较分析表明 ,C4 植物高粱与C3植物水稻psbA基因的核苷酸序列及其推测的氨基酸序列的一级结构之间 ,存在着高度的同源性 .高粱psbA基因 5′ 非编码区 ,含有类似原核的 -10和 -3 5保守的启动子元件 ,以及类似于真核的TATA盒启动子元件 ,但与水稻的相比 ,前者比后者在mRNA的前导序列区多出了一段 7bp的额外序列 ,这在有关文献中尚未见报道 .应用体外分析体系 ,证实在高粱叶绿体蛋白质提取物中存在着与psbA基因 5′ 非编码区特异性结合的蛋白质因子 .荧光素酶表达量的检测结果是 ,在大肠杆菌中 ,带有高粱psbA基因前导序列区的表达质粒pALqs,其荧光素酶表达量 ,要比带有水稻相应结构的表达质粒pALqr的高出 2~ 5倍 . 展开更多
关键词 高粱 叶绿体 PSBA基因 启动子结构 转录调控
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DNA G-quadruplex and its potential as anticancer drug target 被引量:3
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作者 ONEL Buket LIN Clement YANG Dan Zhou 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2014年第12期1605-1614,共10页
G-quadruplex secondary structures are four-stranded globular nucleic acid structures form in the specific DNA and RNA G-rich sequences with biological significance such as human telomeres,oncogene-promoter regions,rep... G-quadruplex secondary structures are four-stranded globular nucleic acid structures form in the specific DNA and RNA G-rich sequences with biological significance such as human telomeres,oncogene-promoter regions,replication initiation sites,and 5′and 3′-untranslated(UTR)regions.The non-canonical G-quadruplex secondary structures can readily form under physiologically relevant ionic conditions and are considered to be new molecular target for cancer therapeutics.This review discusses the essential progress in our lab related to the structures and functions of biologically relevant DNA G-quadruplexes in human gene promoters and telomeres,and the opportunities presented for the development of G-quadruplex-targeted smallmolecule drugs. 展开更多
关键词 DNA G-quadruplexes oncogene promoters human telomeres G-quadruplex-targeted small molecules anticancer drug target
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