IRES特异性IRNA对HCV IRES启动蛋白翻译细胞内抑制作用

目的:研究核糖体内部进入位点(internalribosomeentrysite,IRES)特异性抑制性RNA(inhibitorRNA,IRNA)细胞内对丙型肝炎病毒(HCV)IRES介导蛋白翻译的抑制作用.方法:体外应用脂质体细胞转染法,将IRNA及其突变体mIRNA真核表达载体pcRz-IRNA/pcRz-mIRNA转染人肝癌细胞株(HHCC),经G418筛选4wk后建立IRNA及mIRNA表达株;以相同的方法构建pcHCVcluc转染株;以脂质体介导细胞转染法将pCMVNCRLuc转染IRNA及mIRNA细胞株,于转染后48h检测荧光素酶表达量;将IRNA及mIRNA真核表达体转染pcHCVcLuc表达株,于转染后不同时间检测荧光素酶表达量.结果:HCVIRES介导蛋白翻译在IRNA表达株明显受到抑制,同样IRNA对HCV翻译复制子的蛋白翻译作用有明显抑制性;突变体mIRNA表达株和空载体对照株中未见相似的抑制性.结论:pcHCVcluc在HHCC细胞中获得有效表达;IRES特异性IRNA能有效的抑制HCVIRES介导细胞内蛋白翻译作用.

翻译启动因子4E蛋白在喉癌手术切缘的表达及意义

目的探讨翻译启动因子4E(eIF4E)蛋白在喉癌手术病理检查切缘中的表达及意义。方法选择1987年10月至1998年10月因喉癌行手术切缘苏木精伊红(HE)染色为阴性的患者46例,采用免疫组织化学方法检测切缘与原发灶中的eIF4E蛋白表达,比较阳性与阴性表达患者的生存率。结果喉癌手术切缘和原发灶中eIF4E表达阳性率分别为32.6%(15/46例)和100.0%(46/46例)。eIF4E切缘阳性组的肿痛复发、转移或死亡的发生率(73.3%,11/15例)明显高于阴性组(29.0%,9/31例,P=0.007)。采用寿命表法统计切缘阳性组和阴性组的5年生存率分别为42.2%和76.5%,差异有显著性(P=0.0006)。结论喉癌手术病理检查切缘阴性而eIF4E蛋白表达阳性者的预后较差。

丙型肝炎

HepG2细胞中HCV NS5A蛋白对HCV IRES启动蛋白翻译的影响；免疫沉淀法分离血清APO-B在慢性丙型肝炎与脂代谢研究中的应用；中国深圳地区丙型肝炎病毒RNA阳性与人类白细胞抗原分型的关联研究；结构域Ⅰ缺失的丙型肝炎病毒5＇NCR调控荧光素酶基因的表达；丙型肝炎病毒F蛋白磷酸化位点突变与细胞内分布；丙型肝炎病毒的细胞培养系统。