吴茱萸提取物的透皮吸收促进剂的筛选

目的筛选吴茱萸提取物中吴茱萸碱、吴茱萸次碱的最佳透皮促渗剂及浓度。方法以裸鼠腹部皮肤为实验屏障,用改良Franz扩散池法建立离体经皮吸收试验方法,收集吴茱萸提取物的透皮接受液,用高效液相色谱法测定其吴茱萸碱、吴茱萸次碱的透皮速率。结果 3种促渗剂质量分数3%时对吴茱萸碱与吴茱萸次碱的促渗效果依次为油酸>氮酮>1,2-丙二醇,油酸不同用量下促渗效果依次为7%油酸>5%油酸>3%油酸。结论以7%的油酸作为促渗剂时可以较好的促进吴茱萸碱和吴茱萸次碱的经皮吸收。

吴茱萸提取物抑制野百合碱所致右心室肥厚的作用

目的观察吴茱萸提取物（evodiae，EV）对野百合碱（monocrotaline，MCT）所致大鼠右心室肥厚的影响并探讨其可能的机制。方法雄性Wistar大鼠腹腔注射MCT60mg／kg，建立大鼠右室肥厚模型。连续灌胃EV18d，测定大鼠右心室收缩压、右心室肥厚指数、肺重／体重，肺组织HE．染色观察肺小动脉形态学的改变，观察EV的防治作用。结果大鼠注射MCT后18d，心室收缩压、右室肥厚指数显著增加（P〈0．01），肺小动脉肌层增厚，管腔狭窄。连续灌胃EV50～200mg 18d，右心室收缩压、右心室肥厚指数肺重／体重明显降低（P〈0．05），明显减轻MCT所致大鼠肺动脉重构。结论EV对MCT引起的大鼠右心室肥厚产生明显的防治作用，该作用与减轻肺动脉重构，降低肺动脉压力有关。

吴茱萸提取物和挥发油对牙龈卟啉单胞菌的影响

目的探讨吴茱萸提取物和挥发油对牙龈卟啉单胞菌的影响,以验证其相关功效。方法采用厌氧菌药物敏感试验琼脂稀释法测定实验检品的MIC。结果观察组组方1制剂对3株实验菌抗菌作用最强,其MIC均≤制剂原浓度的1/80;组方2对3株实验菌的抗菌活性次之,其MIC为制剂原浓度的1/40或≤制剂原浓度的1/80;组方3对ATCC33227和参考株W83、47A-1等3株实验菌也有一定的抗菌作用,其MIC分别为制剂原浓度的1/40;组方4中药制剂对3株实验菌的抗菌作用则较差,其MIC≥制剂原浓度的1/10。实验表明,吴茱萸提取物和挥发油中含小檗碱、黄芩素、大黄酸、厚扑酚等有效成分,其抗菌作用最强。结论结果表明,具有抗菌有效成分的吴茱萸提取物和挥发油活性成分,与其相关的临床功效及主治相符,为其临床治疗种植体周围炎提供了一定的实验依据。

吴茱萸提取物对大鼠右室肥大细胞外信号调节激酶-mRNA表达的抑制作用

目的观察吴茱萸提取物(evodiae,EV)对野百合碱(monocrotaline,MCT)所致大鼠右心室肥大细胞外信号调节激酶-1mRNA(ERK-1 mRNA)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠腹腔注射MCT60 mg/kg建立大鼠右室肥大模型。灌胃给药18d,观察大鼠体质量及一般状态,测定右室肥大指数、右室相对质量和肺质量/体质量,实时定量PCR检测心肌组织心室肥大标志基因心房利钠因子(atrial natriuretic factor,ANF)mRNA的表达、ERK-1 mRNA的表达。结果与模型组比较,EV50,100,200 mg/kg均使右室肥大指数、右室相对质量和肺质量/体质量显著降低,ANF,ERK-1 mRNA的表达呈剂量依赖性降低。结论 EV能明显改善MCT引起的大鼠右心室肥大,其机制可能与抑制ERK-1 mRNA的表达有关。

大鼠灌胃不同纯度吴茱萸提取物后吴茱萸碱及吴茱萸次碱的药动学研究

目的:研究灌胃给予不同纯度吴茱萸提取物后大鼠体内吴茱萸次碱(Rut)和吴茱萸碱(Evo)的药动学特点。方法:以Rut、Evo分别为40、31mg·kg-1的剂量,灌胃给予雌性大鼠高、中、低不同纯度(Rut:45%、28%、9%,Evo:35%、21%、7%)的吴茱萸提取物混悬液(n=6),分别于灌胃后0·25、0·5、0·75、1·0、1·5、2·0、2·5、3·0、4·0h眼底静脉丛采血0·5mL,高效液相色谱法测定血样中Rut和Evo含量,并计算药动学参数cmax、tmax和AUC0～4h。结果:高、中、低纯度组中,cmax:Rut:(215·3±80·4)、(94·5±28·8)、(22·8±4·4)ng·mL-1,Evo:(164·8±65·1)、(78·8±23·5)、(43·4±17·2)ng·mL-1(两两比较P<0·01);tmax:Rut:(0·5±0·0)、(0·6±0·1)、(0·5±0·0)h,Evo:(0·5±0·2)、(0·7±0·2)、(0·5±0·0)h;AUC0～4h:Rut:(117·1±26·5)、(117·4±42·2)、(36·8±5·6)ng·h·mL-1,Evo:(148·9±39·1)、(122·2±23·3)、(80·4±14·3)ng·h·mL-1。3种纯度组中Rut和Evo的cmax具有统计学差异,AUC0～4h随纯度的升高而增加(P<0·01)。结论:吴茱萸提取物的纯度与Rut和Evo的吸收明显有关,在纯度为16%～80%(以二者总含量计)范围内,随着纯度的提高,二者生物利用度均明显增加。

吴茱萸水和70%乙醇提取物的急性毒性和遗传毒性试验

目的：研究吴茱萸水和70％乙醇提取物的急性毒性和致突变性。方法：采用霍恩氏法研究灌胃给予小鼠吴茱萸水和70％乙醇提取物的半数致死量（LD50）。选用健康昆明种小鼠40只，雌雄各半，体重17—22g，随机分为4个受试药物剂量组：1．00，2．15，4．64，10．00g·kg-1，灌胃给药，观察7d，记录中毒和死亡情况，计算得出LD50。采用鼠伤寒沙门菌回复突变试验（Ames试验）研究其致突变性，小鼠精子畸变试验和小鼠骨髓细胞微核试验研究其致畸变性。结果：小鼠口服吴茱萸水和70％乙醇提取物的LD50大于10．0g·kg-1；2种提取物各剂量组小鼠灌胃后未见明显中毒症状，亦无死亡。2种提取物的Ames试验阴性、未发现对小鼠精子产生畸变作用、对小鼠骨髓细胞染色体未见损伤。在急性毒性、小鼠精子畸变和小鼠骨髓细胞微核试验中，从试验开始到结束，小鼠体重增重情况良好。结论：吴茱萸水和70％乙醇提取物对小鼠属实际无毒，LD50大于10．0g·kg-1；在本试验条件下，未发现其有遗传毒性。

LC-MS测定制吴茱萸提取物中吴茱萸碱、吴茱萸次碱在大鼠体内的药动学

目的:建立LC-MS测定大鼠血浆中吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量的方法,并探讨其在大鼠体内的药动学过程。方法:大鼠灌胃制吴茱萸提取物后不同时间点采血,LC-MS测定受试成分血药浓度,并用WinNonlin 5.1软件计算药动学参数。结果:吴茱萸碱、吴茱萸次碱分别在0.5～100μg.L-1(r=0.995 9)和1～200μg.L-1(r=0.999 3)线性关系良好,平均回收率均大于76%,日内、日间RSD均小于15%。大鼠灌胃制吴茱萸提取物0.4,0.8,2.4 g.kg-1后,吴茱萸碱AUC分别为(2 215.24±414.49),(4 230.62±753.77),(13 219.21±3 740.95)min.ng-1.mL-1;t1/2分别为(146.57±38.38),(114.38±14.65),(163.37±8.83)min;CL_F分别为(184 607.29±32 502.21),(192 878.22±31 897.37),(193 224.63±62278.74)mL.min-1;吴茱萸次碱的AUC分别为(2 283.53±298.51),(4 424.84±276.95),(14 239.93±3 648.27)min.ng-1.mL-1;t1/2分别为(167.10±15.82),(131.58±20.07),(144.41±13.65)min;CL_F分别为(1 177 340.54±24942.21),(181 262.92±11 162.22),(177 508.10±52 611.80)mL.min-1。结论:本法专属性强,灵敏度高,可用于吴茱萸碱、吴茱萸次碱的体内定量分析。吴茱萸碱、吴茱萸次碱在大鼠体内符合一级吸收的一室模型。

以体外经皮渗透性为指标优化吴茱萸提取物乳膏处方

采用单因素试验,以吴茱萸碱和吴茱萸次碱体外经皮累积渗透量为考察指标,筛选了乳膏类型、乳化剂和载药量。所得优化处方为:以司盘-60和Cremophor RH40为复合乳化剂,载药量为0.2%的o/w型乳膏。该乳膏为淡黄色半固体,乳滴呈圆球形,pH为6.81±0.04,锥入度在102.4～119.7 mm,离心(1 000×g)30 min未分层,在40℃和-20℃条件下放置10 d稳定。

吴茱萸提取物对大鼠右室肥大及钙调神经磷酸酶的抑制作用研究

目的:研究吴茱萸提取物(EV)对野百合碱(MCT)所致大鼠右室肥大及钙调神经磷酸酶的抑制作用。方法:将60只雄性Wistar大鼠均分为正常对照、右室肥大模型、硝苯地平(20mg·kg-1)和EV低、中、高剂量(50、100、200mg·kg-1)组。连续ig给药18d,测定大鼠右室肥大指数、右室相对质量和肺重/体重,实时定量PCR检测心肌组织钙调神经磷酸酶(CaN)mRNA的表达,免疫组化染色测定CaN催化亚基(CnA)的蛋白表达。结果:与模型组比较,EV50、100、200mg·kg-1使右室肥大指数、右室相对质量和肺重/体重显著降低(P<0.01或P<0.05),CaNmRNA和CnA的蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:EV能明显改善MCT引起的大鼠右心室肥大,其机制可能与其抑制CaN信号转导通路有关。

吴茱萸氯仿提取物对小鼠溃疡性结肠炎的药效学研究

目的 :观察吴茱萸氯仿提取物 (主要成分为吴茱萸碱和吴茱萸次碱 )对小鼠实验性结肠炎的作用。方法 :TNBS/乙醇两次灌肠制作小鼠溃疡性结肠炎模型 ,小鼠经口给予吴茱萸氯仿提取物 ( 5 0 ,10 0 ,3 0 0mg/kg× 14d) ,考察吴茱萸的药效作用 ,同时考察吴茱萸对炎症反应中PGE含量的影响。结果 :TNBS诱发结肠炎后 ,小鼠腹泻、便血、结肠出现了粘连、充血 ,溃疡出血甚至穿孔等变化。吴茱萸能改善结肠炎小鼠大体形态学损伤 ,降低MPO含量 ,抑制脾肿大 ,对小鼠一般状况如腹泻、便血、体重变化都有所改善。吴茱萸降低小鼠角叉菜胶致炎足PGE含量。结论 :吴茱萸氯仿提取物能抑制实验性结肠炎模型小鼠的炎性浸润、渗出和增生 ,减轻结肠局部的病理损害。

吴茱萸氯仿提取物对胃排空的影响

目的 :研究吴茱萸氯仿提取物 (Evo)对胃肠动力的影响并初步探讨其作用机制。方法 :吴茱萸以乙醇热回流 ,并以氯仿萃取 ,其主要有成分为生物碱。以胃残留率为指标 ,考察Evo对正常小鼠及胃排空亢进模型小鼠胃残留率的影响 ,并观察其对离体肠管收缩的作用。结果 :Evo抑制正常小鼠、利血平化小鼠胃排空 ,对抗新斯的明、胃复安所致的胃排空亢进 ,协同阿托品胃排空抑制作用 ,抑制乙酰胆碱及氯化钡所致肠平滑收缩运动。结论 :Evo具有抑制胃排空 ,缓解胃肠平滑肌痉挛的作用 ,其机制作用可能是其对M胆碱能受体的直接拮抗作用。

吴茱萸乙醇提取物对大鼠急性毒性及肝毒性的影响

目的:评价灌服吴茱萸乙醇提取物对大鼠的急性毒性和肝靶器官的毒性损害及其可逆性。方法:将5～6周龄雌雄各半的SD大鼠80只随机均分为4组,禁食不禁水16 h后分别一次性灌胃吴茱萸乙醇提取物15、30、60 g(原生药)/kg及等量蒸馏水,分别于第1、2、3、7、14天称大鼠体重,并测定灌胃前及第1、2天摄食量,观察各组动物出现的毒性反应情况。并于第3天和第14天各组取10只动物取血测定其血液细胞学、血液生化学指标,计算肝脏等脏器系数,光镜观察肝脏组织病理变化。结果:(1)血液生化指标:3天后,吴茱萸乙醇提取物30、60g/kg组血清总胆红素(TBIL)、尿素氮(BUN)及碱性磷酸酶(ALP)较对照组升高;吴茱萸乙醇提取物30、60g/kg组血清总蛋白(TP),白蛋白(ALB)含量明显降低。14天后,吴茱萸乙醇提取物30、60g/kg组血清谷草转氨酶(AST)含量较对照组升高。(2)脏器指数:给予吴茱萸乙醇提取物3天后,吴茱萸乙醇提取物30、60g/kg组肝脏系数明显增大;14天后,吴茱萸乙醇提取物60g/kg组肝脏系数较对照升高。(3)病理学检查:吴茱萸乙醇提取物给大鼠一次灌胃后3天光镜检查发现,给药组部分大鼠中央静脉、小叶下静脉周围肝细胞显疏松及灶性坏死;14天光镜检查发现,吴茱萸乙醇提取物30、60g/kg组部分动物肝组织结构显紊乱,散在灶性肝细胞变性、坏死等病理改变。结论:大鼠一次灌胃给予吴茱萸乙醇提取物后可对其产生一定的毒性;肝脏为其主要毒性靶器官之一,主要表现为血清转氨酶及肝脏系数增加,肝脏中央静脉及小叶下静脉周围肝细胞疏松。