吴门枳壳甘草汤对腰椎间盘突出大鼠酸敏感离子通道及相关因子影响的实验研究

目的探究吴门枳壳甘草汤对腰椎间盘突出症(Lumbar disc herniation,LDH)大鼠脊髓酸敏感离子通道2(acid-sensing ion channel-2,ASIC2)、酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channel-3,ASIC3)蛋白及相关因子表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、甲基强的松龙组和枳壳甘草汤组,每组10只。通过自体椎间盘移植方法制备LDH大鼠模型,假手术组仅暴露神经根后缝合伤口。造模后5 d连续给药28 d,甲基强的松龙组腹腔注射9 mg/mL注射液,枳壳甘草汤组灌胃给予1.2 g/mL的药液。假手术组和模型组给予等量生理盐水。给药后检测神经功能BBB(Basso,Beattie,Bresnahan)评分,HE染色观察脊髓形态变化,用酶联免疫吸附试验法(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)测定脊髓中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、丙二醛(Model Driven Architecture,MDA)水平及血清中血栓素(thromboxane,TXA2)、6-酮前列腺素F1(6-keto-PGF1)水平。应用蛋白印迹技术检测脊髓组织ASIC2、ASIC3蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组BBB评分明显降低(P<0.01),MDA和TXB2、6-Keto-PGF1的水平均增加(P<0.05),SOD降低(P<0.01);与模型组比较,甲基强的松龙组及枳壳甘草汤组均显著降低MDA及TXB2、6-Keto-PGF1水平(P<0.05),提高SOD水平(P<0.05)。HE染色结果显示,与假手术组相比,模型组脊髓结构受损,胶质细胞增殖明显增加。与模型组相比,甲基强的松龙组和枳壳甘草汤组大鼠脊髓损伤较轻,胶质细胞增殖改善,正常神经元数量增加。蛋白印迹技术检测结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠髓核ASIC2和ASIC2蛋白表达水平均显著升高(P<0.001或P<0.01)。与模型组比较,甲基强的松龙组和枳壳甘草汤组ASIC3蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01),但是ASIC2蛋白表达与其相当。结论吴门枳壳甘草汤能明显减轻LDH大鼠的病情,并推测与抑制大鼠髓核 ASIC3蛋白表达密切相关。