LC-MS/MS法研究黄芩素及其主要代谢物在大鼠体内的组织分布与排泄

目的:研究黄芩素及其主要代谢物黄芩苷在大鼠体内组织分布及排泄。方法:液相色谱分离采用C18柱(150mm×6.0 mm,5μm),甲醇-10 mmol/L醋酸铵溶液(含0.5%甲酸)(70∶30)为流动相;质谱检测采用ESI离子源,正离子SRM方式检测。生物样品处理采用加入磷酸盐缓冲液,以甲醇-乙腈(1∶1)提取,上清液以氮气流吹干,流动相复溶进样分析。结果:大鼠灌服黄芩素,原形药物及其主要代谢物在大鼠体内分布在20～40 min及10 h呈现双峰现象,与血药浓度曲线规律一致。给药20 min后肾组织中代谢物浓度显著高于原形,胃、肝及肠中原形药物浓度高于代谢物,肺中两者接近。排泄研究显示,大鼠胆汁与尿液中代谢物浓度远高于原形药物,而在粪便中以原形药物为主。结论:黄芩素在大鼠体内吸收迅速,20～40 min迅速分布至各主要脏器,并发生生物转化。

高效液相色谱-串联质谱法研究哌虫啶在大鼠体内的吸收、分布及排泄

为阐明杀虫剂哌虫啶在SD大鼠体内的代谢动力学过程，以期为进一步的毒理学研究提供依据，采用所建立的高效液相色谱-串联质谱（HPLC—MS／MS）分析方法，测定了单次灌胃给药后大鼠血浆、组织（心、肝、脾、肺、肾、脑、骨骼肌、脂肪）、粪便和尿液样品中哌虫啶的含量，对该药在大鼠体内的吸收、分布和排泄进行了研究。结果表明：哌虫啶750mg／kg单次经口灌胃给药，雌性大鼠血药浓度一时间曲线下面积（AUC）高于雄性大鼠，且达到峰值时间（Lmax）明显长于雄性大鼠，具有统计学差异，提示在此剂量下，哌虫啶在代谢及毒性效应上可能存在性别差异；在100～750mg／kg受试剂量范围内，哌虫啶的平均半衰期为4～8h，表观分布容积为10～30L／kg，给药剂量与血药浓度-时间曲线下总面积（AUC0-inf）呈线性相关性（雄：r=0．9964，雌：r=0．9913）。组织分布试验表明，哌虫啶经口给药后，能迅速、广泛地分布到各组织中，并可有效地透过血脑屏障，其中肝、肾中哌虫啶的含量最高，提示其可能主要经肝、肾代谢。排泄试验显示，经尿液及粪便排出的原形哌虫啶含量极低，提示哌虫啶在大鼠体内可能发生广泛的代谢后再排出体外。

吲哚美辛5-氟尿嘧啶甲酯的代谢物5-氟尿嘧啶在大鼠体内组织分布和排泄

采用高效液相色谱法对吲哚美辛5-氟尿嘧啶甲酯（indomethacin5-fluorouraeil-1-ylmethylester，IFM）的代谢物5-氟尿嘧啶在大鼠体内的分布和排泄进行研究。生物样品经液-液萃取后，以甲醇-水-36％乙酸（3：96．9：0．1，v／v）或甲醇-水-36％乙酸（10：89．9：0．1，v／v）为流动相，使用Diamonsi^TM C18色谱柱进行分离，检测波长为260nm。大鼠灌胃IFM100mg·kg^-1后，5-氟尿嘧啶在胃、小肠、肝组织中浓度较高，其他组织和血浆中较低。5-氟尿嘧啶从尿液（0～24h）、粪便（0～48h）中排泄量分别占给药总量的0．0065％和0．063％。该方法准确、专属性强，适用于IFM代谢物5-氟尿嘧啶的临床前药代动力学研究。

2-碘芴在鲮鱼(Cirrhina molitorella)中的积累、分布、代谢和排泄

卤代芴是近年发现的新型环境污染物,目前尚无其生态毒理学研究的报道。以^(125)I-2-碘芴(^(125)I-2-IFlu)作为2-碘芴(2-IFlu)的放射性示踪剂,研究了2-IFlu在鲮鱼(Cirrhina molitorella)中的吸收、分布、代谢和排泄过程;同时,以2-溴芴(2-Br Flu)作为2-IFlu的质谱示踪剂,进一步对2-IFlu在鲮鱼体内的生物转化产物进行结构表征。结果表明,鲮鱼对2-IFlu的积累表现为波浪式增长,浓集系数在积累7 d时达到1 251.13。2-IFlu及其代谢产物主要积累在鲮鱼的胆囊部位,峰值时所占比例超过生物总吸收量的60%,此时胆囊的浓集系数达78.85×103。鲮鱼对2-IFlu的排泄具有清晰的快、慢两个排泄阶段,排泄实验开始后短时间内拥有较快排泄速度,残留率降至19.20%,之后转入慢速排泄。快排泄期2-IFlu及其代谢物仍主要分布于胆囊部位,慢排泄期时分布于其余内脏和剩余组织中。对胆汁的甲醇提取物进行薄层层析-放射自显影分析发现,积累4 d时鲮鱼胆汁中的2-IFlu全部以其代谢物形式存在,主代谢产物为3种大极性物质。经质谱确认,鲮鱼胆汁中的2-IFlu代谢主产物为2-IFlu-硫酸酯、2-IFlu-(OH)-硫酸酯、2-IFlu-葡萄糖醛酸和2-IFlu-(OH)-葡萄糖醛酸。表明2-IFlu进入鲮鱼体内后,很快被转化为一相代谢氧化产物,随之发生后续的二相代谢过程进一步转化为极性基团加合的代谢产物,最终排出体外。

结肠菌群触发型5-氨基水杨酸壳聚糖胶囊大鼠体内的吸收与分布研究

目的评价口服5-氨基水杨酸(5-ASA)壳聚糖胶囊后在大鼠体内的吸收与在结肠组织中的分布规律.方法在轻度乙醚麻醉下通过聚乙烯管给大鼠口服5-ASA壳聚糖胶囊3粒(1.6mg/粒),对照组口服5-ASA羧甲基纤维素混悬液1 ml(4.8mg).于给定的时间间隔从大鼠心脏取血,并取出结肠组织.用HPLC法测定大鼠血液及结肠中药物的浓度.结果壳聚糖胶囊组血清中的时间-浓度曲线下面积(AUC0～12)是对照组AUC0～12的0.62倍;而结肠组织中壳聚糖胶囊组AUC～12是对照组AUC0～12的3.62倍.结论5-ASA壳聚糖胶囊具有较好的结肠定位靶向释药特性.

舒洛地特和缬沙坦联合治疗对代谢综合征合并微量白蛋白尿患者尿白蛋白排泄率和β_2-微球蛋白水平的影响

目的观察舒洛地特和缬沙坦对代谢综合征合并微量白蛋白尿患者的尿白蛋白排泄率(UAER)和β2-微球蛋白(β2-MG)水平的影响。方法检测患者的一般临床指标,分析缬沙坦、舒洛地特干预治疗3个月、6个月后UAER和β2-MG水平的变化。结果治疗前各组血压、血糖、糖化血红蛋白、肾功、纤维蛋白原(Fib)比较无统计学差异;血压水平缬沙坦组和联合组明显下降(P<0.05);Fib水平舒洛地特组和联合治疗组明显下降(P<0.01)。治疗前各组UAER和尿β2-MG组间比较无显著差异(P>0.05);治疗3个月时与治疗前相比舒洛地特组和缬沙坦组UAER、尿β2-MG水平均有所下降(P<0.05),联合治疗组下降更加明显(P<0.01);治疗6个月与3个月相比舒洛地特组和缬沙坦组UAER、尿β2-MG水平均明显下降(P<0.01);联合治疗组较单药治疗组下降更明显(P<0.01)。结论舒洛地特和缬沙坦对代谢综合征合并微量白蛋白尿患者的UAER和β2-MG水平有显著影响,为代谢综合征合并微量白蛋白尿患者的治疗提供了新的方向。

黄体素和β-胡萝卜素在肉鸡消化道吸收和代谢过程中的相互影响

利用瘘管技术研究黄体素 (lutein)和 β 胡萝卜素 (βc)在肉鸡消化道吸收、代谢过程中的相互影响。实验分为两大组 :Ⅰ组为研究 βc对肉鸡肠道吸收、代谢lutein的影响 ,lutein与 βc的质量比分别为 4 0 0∶0 (对照组 )、4 0 0∶2 0 0、4 0 0∶4 0 0 ;Ⅱ组为研究lutein对肉鸡肠道吸收、代谢 βc的影响 ,lutein与 βc的质量比分别为 0∶4 0 0 (对照组 )、 2 0 0∶4 0 0、 4 0 0∶4 0 0。结果发现在肠道吸收过程中lutein和 βc没有相互影响 ;lutein在黏膜细胞中的滞留量随灌注液中 βc含量的增加而提高 ,并在 βc添加量为 4 0 0 μg时达到显著水平 (P <0 0 5 ) ;添加lutein后 ,黏膜细胞中 βc的含量极显著提高 (P <0 0 1) ,维生素A的水平极显著下降 (P <0 0 1) ;βc的添加使血浆中lutein的水平极显著降低 (P <0 0 1) ;同样血浆中 βc和维生素A的含量因lutein的添加而极显著下降 (P <0 0 1)。

小鼠灌胃3H—β，β-二甲基丙烯酰紫草素的组织分布与排泄研究

采用氧化燃烧炉技术处理小鼠给予3H-β，β-二甲基丙烯酰紫草素灌胃后的组织样品和粪样（尿样直接加闪烁液测定），用液闪计数仪测定其放射性水平，并采用HPLC法分析生物样品，以研究放射性药物在小鼠体内的组织分布与排泄情况。研究结果显示：小鼠的胃肠道放射性浓度最高，肝脏、肺脏、肾脏、心脏等组织内放射性浓度次之，骨骼肌、脊髓、脑中分布较少；小鼠灌服3H-β，β-二甲基丙烯酰紫草素（84．0mg／kg，22．3MBq／kg）后，336h从粪中收集到给药总放射剂量的（72．87±9．92）％，尿液中回收到（8．43±0．26）％，粪尿回收合计（81．30±9．79）％；小鼠粪便中以原形药物为主，血浆、尿样中均未检测到原形药物。以上结果提示，3H-β，β-二甲基丙烯酰紫草素在小鼠体内分布广，排泄较完全，经粪便排泄为主，经肾排泄为辅。

回-直肠吻合猪的排泄频率及其对水的代谢变化

本文采用了 4头回 直肠吻合猪和 3头正常猪研究了回 直肠吻合手术后第 4～ 2 8周荷术猪的排泄频率及水的代谢变化 ,并与同期的正常猪比较。结果为 :(1)荷术猪手术后第 4～ 2 8周 ,食糜的排泄频率逐渐降低 ,食糜排泄次数从术后第 4周的 9 2 1次 /d逐渐降低到术后第 2 8周的6 58次 /d。荷术猪肛门中食糜的排泄频率为正常猪的 2 85倍。同时随着猪只日龄的增长 ,正常猪粪便的排泄频率也有下降的趋势 ;(2 )荷术猪排泄物的含水量为正常猪的 2 90倍 ;荷术猪术后 4～ 2 8周间 ,排泄物中的含水量基本稳定 ,正常猪粪便中含水量也并未随猪只日龄增长而发生明显变化。

矢车菊素-3-葡萄糖苷在小鼠体内的吸收与代谢

【目的】研究花色苷矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)在小鼠体内的吸收与代谢情况。【方法】48只小鼠随机分为7个实验组和1个对照组,每组6只。实验组小鼠灌胃C3G后测定不同时间点血浆、肝脏、肾脏、膀胱、胃及小肠中C3G、总花色苷和原儿茶酸(PCA)含量,分析其代谢产物。【结果】实验组小鼠血浆、肝脏、肾脏和尿液中均有C3G存在,在血浆中检测到了C3G的甲基化产物,肝脏、肾脏和尿液中检测到了C3G的甲基化、葡萄糖醛酸化和硫酸化产物。另外,在小鼠血浆、肝脏、肾脏、尿液和小肠中发现了PCA,在小肠中发现了矢车菊素,在肝脏和肾脏中检测到了矢车菊素的甲基化、葡萄糖醛酸化产物和少量香草酸。【结论】花色苷除以原型吸收外,部分在肠道可被代谢成酚酸,酚酸种类可能与B环上取代基有关。

3,5-二碘酪氨酸在大鼠体内的吸收代谢研究

目的 : 研究 3,5-二碘酪氨酸 ( DIT) DIT在动物体内吸收代谢的方式与碘离子的异同 ,为科学补碘提供资料。方法 : 经口灌胃分别给予去甲状腺 Wistar大鼠 DIT或 KI溶液 ,不同时间测血清中 DIT含量变化。结果 : 去甲状腺大鼠和正常大鼠直接摄入 DIT后 ,血清中 DIT含量明显增高 ,至 3h达最高值 ,6h后基本恢复正常 ,而摄入 KI者 ,血清 DIT含量几乎不随时间变化。结论 : DIT是以分子形式吸收参加代谢的 ,而不是先转化成 I-形式后再吸收。

LC-MS/MS方法研究新型酪氨酸酶抑制剂UP302的大鼠皮肤吸收量和皮肤代谢稳定性

目的建立大鼠皮肤中UP302定量的LC-MS/MS方法,并应用于研究UP302乳膏在大鼠皮肤局部给药24h后的皮肤吸收量,以及离体大鼠皮肤中UP302的代谢稳定性。方法 UP302用甲醇溶解稀释,皮肤样品用2倍体积甲醇沉淀处理,内标法进行定量。采用Hypersil Gold C18色谱柱,柱温30℃;甲醇为流动相A,5mmol.L-1甲酸铵水溶液为流动相B,以0.2mL.min-1梯度洗脱,进行色谱分离,运行时间6min。采用负离子电喷雾离子化电离源和选择反应监测(SRM)模式进行串联质谱分析,用于定量分析的离子反应分别为m/z 301.1→135.2(UP302)和m/z 252.9→132.0(内标大豆苷元)。结果 UP302皮肤标准样品在5～2000ng.mL-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.9998)。UP302在大鼠皮肤匀浆中的最低定量限是5ng.mL-1。本方法日内准确度在100.00%～105.23%,日内精密度小于5.82%。结论本LC-MS/MS方法专属性强、灵敏度高、重现性好、操作简便、结果准确,可用于UP302在皮肤组织中含量的测定,以及UP302在大鼠皮肤组织中的代谢稳定性研究。

糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型在新生大鼠脑内的分布与表达

目的 观察新生大鼠脑发育成熟过程中糖皮质激素代谢酶 11β 羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型 (11β HSD1)的变化。 方法 免疫组织化学和Western印迹杂交的方法。 结果 免疫组织化学染色表明 ,11β HSD1分布于新生大鼠大脑皮层的各个层次 ,但以Ⅱ层 (外颗粒层 )含量为最高、Ⅲ (锥体细胞层 )、Ⅳ (内颗粒层 )层 11β HSD1的含量次之。海马的各个区域和齿状回也均有 11β HSD1的分布。Western印迹杂交分析表明 ,新生鼠顶叶皮层、海马和下丘脑 11β HSD1的表达在出生后 2周内表达一直比较高 ,第 15d时其表达开始下降。 结论 提示新生鼠大脑 11β HSD1的表达可能与糖皮质激素促进脑组织的发育和成熟有关。

利用^(32)P示踪研究马铃薯(合作-88)对磷素营养的吸收及分布规律

应用3 2 P研究“合作 88”马铃薯对磷素营养的吸收和分布规律 ,结果显示 :马铃薯对磷素营养的吸收率随植株的生长而增加。吸收率与栽培生长时间呈显著正相关。磷素主要分布为茎 >根 >叶 ,随生育期茎中含量相对增加 ,而叶中含量相对减少 ,根的不变。

2′-氯地西泮在大鼠体内分布及代谢降解规律研究

目的研究2′-氯地西泮及其代谢物(地洛西泮、氯甲西泮、劳拉西泮)在大鼠体内分布及代谢规律,为2′-氯地西泮相关案件的检验提供实验数据。方法40只SD大鼠随机分为4组,禁食12h,按2.625mg/kg 2′-氯地西泮灌胃给药,第一组给药后不同时间点经大鼠尾静脉采血,第二组为采血空白对照组,第三组给药30min后处死,取心、肝、肺、肾、脑、睾丸,经乙酸乙酯液液萃取后用高效液相色谱-三重四极杆质谱检测2′-氯地西泮及代谢物含量,第四组为分布空白对照组。结果2′-氯地西泮进入体内后,迅速代谢分布,在20min内达到血液最高浓度。2′-氯地西泮及代谢物在各器官中的分布特点为:肝>脑>心脏>肾>睾丸>肺。结论经灌胃2′-氯地西泮进入大鼠体内后,监测2′-氯地西泮及其代谢物在大鼠体内的分布及降解规律可以为2′-氯地西泮相关案件的检验鉴定提供参考依据。

^(32)P研究马铃薯(合作-88)和黄豆对磷素营养的吸收及分布规律

应用3 2 P研究“合作 88”马铃薯对磷素营养的吸收和分布规律 ,结果显示 :马铃薯对磷素营养的吸收率随植株的生长而增加。吸收率与栽培生长时间呈显著正相关。磷素主要分布为茎 >根 >叶。随生育期茎中含量相对增加 ,而叶中含量相对减少 ,根的不变。黄豆对磷素的吸收在 6d水培时间内随时间的延长而增加 ,过后则衰退。

非小细胞肺癌和肺炎性肿物18F-FDG代谢分布差异的研究

目的比较非小细胞肺癌(NSCLC)和肺内炎性肿物18 F-FDG代谢分布的差异。方法选择20例病理诊断明确的NSCLC和20例肺炎性肿物进行18 F-FDG显像和分析。以最大SUV值(SUVmax)的不同百分比作为阈值自动勾画感兴趣区(ROI),获得34%SUVmax到90%SUVmax阈值内病变组织的体积及18 F-FDG分布曲线。通过PMOD和MATLAB软件重建病变组织的18 F-FDG PET三维表面重建图、二维色温图及等高线图来进行比较。结果 (1)20例NSCLC和20例肺炎性肿物均可摄取18 F-FDG,两者SUVmax值有统计学差异(t=3.482,P<0.05)。(2)NSCLC18F-FDG PET 3D表面重建影像多近似球形,而肺炎性肿物形态多不规则(χ2=12.907,P<0.001)。(3)瘤体内高代谢区单一集中还是多发分散与肿物的性质无关(χ2=0.404,P>0.05),但受到肿物体积大小的影响(t=6.805,P<0.01)。(4)等高线图像显示,如果将80%SUVmax以上阈值区设为热点,在SUVmax层面NSCLC的热点多接近瘤体的几何中心,而炎性肿物多偏离瘤体的几何中心(χ2=4.912,P<0.05)。NSCLC18F-FDG不同阈值的等高线形态更加相似,与周围正常组织界限清晰。而炎性肿物中18 F-FDG不同阈值的等高线图形差别明显,与正常肺组织界限不易区分(χ2=10.000,P<0.05)。结论 NSCLC与肺炎性肿物的18F-FDG代谢分布存在差异,18F-FDG代谢分布影像有利于肺内肿物性质的诊断。

皮下注射^(99)Tc^(m)-硫胶体在大鼠体内药代动力学和组织分布研究

目的研究皮下注射^(99)Tc^(m)-硫胶体在大鼠体内的药代动力学、组织分布和排泄特征。方法取颈背部皮下注射^(99)Tc^(m)-硫胶体后不同时间点大鼠血液,采用三氯醋酸(TCA)沉淀法测定血清的放射性摄取值。另取足趾皮下注射^(99)Tc^(m)-硫胶体大鼠进行SPECT/CT扫描,通过图像分析测定其每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。结果大鼠皮下注射^(99)Tc^(m)-硫胶体后,药物在血液中极少分布,24h内血清放射性摄取值小于0.017%ID/mL。足趾皮下注射^(99)Tc^(m)-硫胶体后,药物主要聚集在注射部位、腘窝淋巴结和髂骨淋巴结,其他脏器摄取值均小于0.4%ID/g。给药后48h,经胆汁累积排泄率约为1.57%。给药后72h,经粪尿累积排泄率约为6.95%。结论大鼠皮下注射^(99)Tc^(m)-硫胶体后药物主要滞留在注射部位,通过淋巴系统向腘窝淋巴结和髂骨淋巴结扩散,血液和各脏器分布很低,排泄缓慢。

重组人ω-干扰素在金黄地鼠和Wistar大鼠体内的组织分布和排泄

目的:为进一步的临床试验提供重组人ω-干扰素(rhIFN-ω)的分布和排泄试验数据。方法:用125I同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法测定各主要器官组织的总放射性浓度和酸沉淀部分放射性浓度,获得rhIFN-ω的尿粪排泄和胆汁排泄数据。结果:各主要器官组织的总放射性浓度AUC0-4h排序由大到小依次为:尿、胸腺、胆囊、膀胱、肾、肾上腺、肠内容物、肠淋巴结、空肠、肺脏、血清、卵巢、脾、肝、肌肉、心脏、骨髓/股骨、睾丸、脂肪、脑。皮下注射125I-rhIFN-ω后48h尿和粪的累计排出量分别达到注入放射量的87.9%±2.8%和4.0%±1.6%,尿粪合计排出量占注入放射性量的91.9%±2.1%,而皮下注射125I-rhIFN-ω后20h内胆汁排泄放射性量占注入放射性量的3.34%。结论:rhIFN-ω在泌尿系统分布比较高,与血清蛋白结合比较少,在脑、脂肪和肌肉等组织的药物浓度最低。rhIFN-ω主要以尿的形式排泄。

新型α-葡萄糖苷酶抑制剂1-脱氧野尻霉素-羟基查耳酮杂合体在大鼠体内的吸收与代谢

本实验研究了新型、高效α-葡萄糖苷酶抑制剂1-脱氧野尻霉素-羟基查耳酮杂合体(DC-5)在大鼠体内的吸收与代谢。超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)检测结果表明,DC-5灌胃后大鼠血液中出现了加氢还原、甲基化、磺酸化及葡萄糖醛酸化4种代谢产物;灌胃后0.5 h,大鼠血液、心、肝、肺、胃、小肠中的DC-5含量达到峰值,而脾和肾中则在灌胃后1 h达到最高值;大鼠血液中DC-5的峰值质量浓度为162.76 ng/mL,半衰期(halflife in the terminal phase,T_(1/2))为30.66 h,平均驻留时间(mean residence time,MRT)为11.41 h;粪便是DC-5的主要排泄途径,24 h内排泄量为灌胃量的2.26%,显著高于24 h内尿液中的排泄量(0.0156%);药代动力学分析结果表明,DC-5在大鼠体内的生物利用度为1.47%。