评价水痘-带状疱疹病毒抗体的新型酶联免疫吸附方法

目的:水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白已被证明是高度准确的VZV特异性免疫指标。本研究以重组蛋白作为包被抗原建立了酶联免疫吸附方法(ELISA),用于评价水痘疫苗接种后的血清抗体水平。方法:筛选ELISA包被抗原,以重组蛋白gE和gB作为包被抗原,W1044国际参考品作为标准品,初步建立VZV抗体的ELISA法并对其进行验证。将建立的ELISA法与膜抗原荧光抗体(FAMA)法进行比对。结果:以gE和gB作为包被抗原,成功建立了ELISA方法,采用线性拟合,标准曲线在抗体浓度0.25~4 mIU·mL^(-1)范围内具有良好的线性关系,R^(2)>0.990,回收率为85%~120%,定量限为0.25mIU·mL^(-1),精密度CV<15%,特异性良好。与FAMA法相比,ELISA法的灵敏度为89%,特异性为93%,总符合率为90%。结论:本课题成功建立了VZV抗体ELISA检测方法,可作为一种灵敏、特异的水痘疫苗临床血清评价方法。

动物源性食品安全快速检测及酶联免疫吸附方法的应用

本文介绍了动物源性食品安全的定义和存在的主要问题,重点阐述了酶联免疫吸附方法(ELISA)在兽药残留、农药残留、动物疫病、微生物、动物毒素快速检测中的应用。

用等温吸附方法正确评价泥页岩吸附气含量

关于吸附气含量的获取是页岩气资源评价中面临的主要问题,目前普遍采用等温吸附实验方法获取吸附气含量。科研界一般在研究压力和温度对泥页岩吸附性能影响时,对这两个因素分开进行讨论,没有一个整体研究思路。而泥页岩随着埋深的变化,其储层温度和压力常常一起变化,因此研究温度和压力综合作用对泥页岩吸附特性的影响尤为重要。

榛子过敏原双抗夹心酶联免疫吸附方法的建立及应用

目的建立榛子过敏原双抗夹心酶联免疫吸附法(sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,sELISA)快速检测食品中微量榛子的方法。方法对两株抗体进行配对,确定捕获抗体和检测抗体,利用棋盘法确定捕获抗体、检测抗体、辣根过氧化物酶标记的兔抗大鼠IgG(horseradish peroxidase-IgG,HRP-IgG)的最佳稀释浓度,然后对各工作步骤的孵育时间进行优化,并应用于实际食品的检测。结果使用兔抗作为捕获抗体,鼠抗作为检测抗体,兔抗血清稀释度为1:10000(V:V)、鼠抗血清稀释度为1:10000(V:V)、HRP-兔抗大鼠稀释度为1:20000(V:V)。各步骤最佳反应时间为抗原孵育30 min、检测抗体孵育30 min、酶标二抗孵育45 min及四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)显色8 min。此方法的线性回归方程为Y=0.4504 ln(X)+2.1194,r^(2)=0.9934,定量限为10 ng/mL、检出限为0.1 ng/mL。该方法特异性强,仅与核桃产生轻微的交叉反应,在面包、酸奶和咖啡基质中的回收率在80%到120%之间,批内、批间变异系数均小于15%。结论本方法具有较高的灵敏度和特异性,适用于商业加工食品中榛子残留的快速、准确检测。

胰蛋白酶催化罗丹明110双酰胺衍生物荧光酶联免疫吸附方法检测桔青霉素

桔青霉素(citrinin,CIT)是一种广泛污染玉米、大米等农作物,且对人和动物具有肾毒性、致畸性等毒害的真菌毒素。目前的国家标准检测方法中,需要先用免疫亲和柱或固相萃取柱净化,再用配荧光检测器的高效液相色谱仪测定,需要专业的大型仪器和检测场所。因此,有必要开发一种更简便、灵敏的方法用于谷物中CIT的检测。该实验构建了一种胰蛋白酶催化的荧光酶联免疫吸附方法用于玉米中CIT的检测。该方法利用胰蛋白酶催化罗丹明110双酰胺荧光衍生物裂解产生荧光,以及CIT和胰蛋白酶-CIT与CIT抗体的竞争结合关系,通过记录竞争抑制率B_(0)与CIT浓度的变化关系,从而实现对玉米中CIT的定量检测,可用方程y=18.606 lnx-18.713(R^(2)=0.992),定量范围为12.5~400 ng/mL,通过检测4个不同CIT含量(0.22~3.5 mg/kg)的玉米样本,结果显示该方法的加标回收率为90.10%~110.58%,批内、批间的变异系数为3.65%~14.08%,该研究所构建的荧光酶联免疫吸附方法适用于玉米中不同浓度的CIT快速、灵敏定量检测。

动物源性食品安全快速检测与酶联免疫吸附方法的应用

本文介绍了动物源性食品安全的定义和存在的主要问题,重点阐述了酶联免疫吸附方法(ELISA)在兽药残留、农药残留、动物疫病、微生物、动物毒素快速检测中的应用。

爬壁机器人吸附方法研究综述

科技的快速发展与爬壁机器人技术的应用需求使得爬壁机器人获得广泛关注。吸附方法作为爬壁机器人稳定吸附、敏捷运动、提升载荷的关键技术模块,对于提升爬壁机器人的整体性能至关重要,同时吸附方法的改进与提升能够进一步促进爬壁机器人的小型化和轻量化。对爬壁机器人现有吸附方法进行了分析和总结,提出并分析了爬壁机器人吸附方式关键技术,包括吸附方式与运动方式的权衡、关键零部件定制化设计、理论分析及仿真分析支撑下的优化设计、新材料的研发与制备工艺流程简化,对爬壁机器人吸附方法小型化、轻量化、大载荷的发展趋势做出展望。

一种从盐湖氯化镁卤水中除硼的固定床吸附方法

本发明公开了一种从盐湖氯化镁卤水中除硼的固定床吸附方法，包括下述步骤：1）吸附：将含硼的盐湖氯化镁卤水通过树脂去除其中的硼离子；2）淋洗：将吸附硼的树脂通过淋洗剂去除残留在树脂中的卤水，将卤水返回到晒盐池：3）解吸：将淋洗之后的树脂通过解吸剂去除吸附在树脂上的硼，使树脂恢复吸附性能，能重新用于吸附过程。

金矿堆浸中的自流静态吸附方法

本发明公开了一种金矿堆浸自流静态吸附方法。采用敞口式非流态化固定床吸附槽，该槽设有用于串炭提炭作业的空气提升器和防止炭床板结的空气松炭器；通过选择矿山有利地形，将多个吸附槽串联呈阶梯式布置，从首槽到尾槽逐级降低500-1000mm，上级吸附槽出液管连接下级吸附槽进液管，下级吸附槽空气提升器接至上级吸附槽敞口。吸附槽内活性炭层高度首槽为700～900mm，其它槽按首尾顺序逐级提高0—300mm，根据不同的富液品位与流量，选择合适的炭层高度与吸附时间以获得理想的吸附率。

以赭曲霉毒素A单克隆抗体建立竞争酶联免疫吸附分析方法的研究

本研究通过活性酯法合成赭曲霉毒素A人工抗原,免疫小鼠制备单克隆抗体,在此基础上建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为200～6000pg/ml,检测下限为150pg/ml。单抗与赭曲霉毒素B的交叉反应率为35%,与桔霉素、黄曲霉毒素B1和展青霉素等毒素交叉反应低于0.01%。在小麦样品中的加标回收率为83%～116%,变异系数为9.4%～19.8%。测试23份样品,赭曲霉毒素A的含量在0.6～2.56μg/kg之间。

氯丙嗪抗体制备与酶联免疫吸附测定方法的建立

本研究针对动物性食品中违禁药物氯丙嗪残留问题,建立了针对氯丙嗪的酶联免疫吸附测定方法。首次通过以氯丙嗪为原料,先去甲基化合成N-甲基氯丙嗪,再与丙烯酸叔丁酯反应及水解等步骤成功合成了氯丙嗪半抗原(CPZ-H)。半抗原CPZ-H分别与OVA和BSA通过活泼酯法偶联合成包被原与免疫原,采用免疫原CPZ-H-BSA免疫新西兰大白兔成功制备了特异性的抗氯丙嗪的多克隆抗体。基于该抗体建立了快速测定氯丙嗪的间接竞争酶联免疫吸附测定方法(ic-ELISA)。通过优化ic-ELISA方法的最佳工作条件,确定包被原和抗体稀释倍数均为1:8000时效果最好,此时标准曲线的IC50为1.1 ng/mL,线性范围为:0.13 ng/mL^8.8 ng/mL。制备的抗氯丙嗪的多克隆抗体与其它氯丙嗪类似物无交叉反应,特异性好。本研究为今后高特异性氯丙嗪快速检测试剂盒的制备提供依据。

除臭纸对气体吸附的检测方法研究

研究了除臭纸对气体吸附的检测方法。设计了一种简单的密封装置,将除臭纸折叠成V型放置其中,并注入一定体积的臭气,通过测试装置中不同时间间隔残余臭气的浓度对除臭纸的除臭性能进行评价。整个测试过程测定值稳定,实验的重复性好。

β-Casomorphin-7的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法的建立

β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7)是一个有代表性的乳源外啡肽,有调节动物消化道运动和采食、内分泌、免疫等多种生物学功能。本研究以β-Casomorphin-7与人血清白蛋白(HSA)经戊二醛交联的复合物作为包被抗原;一抗为鸡抗β-Casomorphin-7与牛血清白蛋白(BSA)交联复合物的抗血清;酶标二抗为兔抗鸡IgG经戊二醛与辣根过氧化物酶(HRP)交联的复合物。包被抗原和一抗的稀释度经方阵稀释实验确定。本实验所建立的竞争ELISA方法的孔间差异为3.3%,板间差异为8.6%,检测灵敏度20ng/ml,检测范围20～320ng/ml,在实验浓度范围内。β-Casomor-phin-7的抗血清与β-内啡肽、脑啡肽、强啡肽、精氨酸降压素和神经降压素等活性肽未显示免疫交叉反应。表明所建立的方法有较高的特异性,可用于酪啡肽的体内功能研究。

实时定量方法与酶联免疫吸附试验方法对疱疹病毒的检验效果对比分析

目的探讨实时定量方法(PCR)与酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对疱疹病毒的检验效果,并做出对比分析。方法选取我院2008年6月至2011年3月来皮肤性病门诊确诊的患者190例,其中单纯疱疹病毒感染患者140例分为观察组,分别采用实时定量方法和酶联免疫吸附试验方法对患者的血液以及分泌物、疱液进行检测,得出两种方法的结果阳性检查率。结果 140例患者分泌物、疱液中检测出的阳性率实时定量方法为87.2%,ELISA为44.8%,在血液标本中检测出的阳性率PCR为30.4%,ELISA为59.5%。对照组为50例,属于非疱疹病毒感染患者。结论 PCR在分泌物中检测出的结果比ELISA的检测率更高,PCR更具临床使用价值,不仅节省了时间,为疱疹病毒的诊断赢得了治愈的良好时机,其特异性好、敏感性强的优势值得在临床上广泛使用。另外需要注意的是,PCR不适合在血液中检测。

离子吸附型稀土矿储量动态估算方法(RiRee)及其拓展运用

我国南方离子吸附型稀土矿勘查中一般采用传统的地质块段法估算资源储量,存在着探矿工程量大、投入高、效率低的缺点。而稀土资源包含17种不同的稀土元素,不同元素精矿的市场价格差别又很大,现有的基于稀土氧化物总量的工业指标难以快速对接实际矿山生产,造成表外矿实际在产、而表内矿不经济可采甚至可能无法利用的反常现象。本文基于离子吸附型稀土矿床的特点,借鉴土壤化探样品处理的克里格法,建立了离子吸附型稀土矿资源储量估算的三维模型及其相应评价方法,简称RiRee。该模型和方法不但可以对风化壳中的"样品点"进行体积和品位的估算,而且与市场价格直接关联、可根据每天市场价格的动态变化确定边界品位和工业品位,进行实现矿体的实时圈定、资源储量的日常更新与矿山经济效益的动态评价。运用该模型,作者在赣南、滇西、浙江等地不同离子吸附型稀土矿区开展了典型研究和试点示范,取得了初步成效。结果显示,利用克立格法计算的矿体体积与传统手工圈定的块段法相比较,前者计算的结果是合理的,且具有快速、准确、方便的特点。利用自主开发的以克里格法为基础的数字矿山经济评价系统(主要是其中的价格-边界品位敏感性分析模块),动态设置边界品位,灵活圈定不同稀土单元素价格下经济可采的矿体边界,一旦稀土精矿的市场价格发生变化,即可通过软件系统快速修正盈亏平衡点,并随时变更边界品位,动态确定经济可采的矿体的空间范围,为合理布置采矿工程提供科学依据,有助于促进离子吸附型稀土矿产资源(尤其是重稀土)的合理、高效的开发利用。

基于特异性对硫磷单克隆抗体的间接竞争酶联免疫吸附分析方法建立

【目的】制备特异性识别对硫磷(PA)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA),为实现对硫磷的农残快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酸酯基)苯甲酸为半抗原,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备人工抗原,免疫7周龄Balb/c雌性小鼠,取抗血清效价最高、特异性最优小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,采用间接酶联免疫方法(i-ELISA)及ic-ELISA分别评价融合细胞株的阳性和特异性,通过有限稀释法筛选稳定分泌对硫磷抗体的单克隆细胞株。再通过棋盘格试验筛选出抗原抗体最佳工作浓度组合建立对硫磷ic-ELISA标准曲线,并基于对硫磷单克隆抗体与各结构类似物的交叉反应率,评估ic-ELISA的特异性。采购西红柿样品进行对硫磷的添加回收试验,运用气相色谱法(GC)验证ic-ELISA的准确性。【结果】成功合成对硫磷人工抗原PA-BSA和PA-OVA,经5次免疫后融合小鼠的血清效价为8×103;通过有限稀释法筛选获得灵敏度高、特异性最强的对硫磷单克隆细胞株4F11A10。以2μg/mL包被抗原PA-OVA、0.25μg/mL细胞株4F11A10分泌抗体为最佳抗原抗体工作浓度组合,建立对硫磷ic-ELISA及其标准曲线,其半抑制浓度(IC50)为50 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为2.34~300 ng/mL;所建立的对硫磷ic-ELISA与5种有机磷农药(丙溴磷、杀扑磷、倍硫磷、水胺硫磷和甲拌磷)均无交叉反应。对比ic-ELISA和GC测定西红柿样品中对硫磷的添加回收试验结果,发现ic-ELISA的添加回收率为84.86%~100.27%,GC的添加回收率为97.60%~106.40%,两种方法的检测结果一致性较好。【结论】建立的ic-ELISA可用于快速检测蔬菜、水果等农产品中的对硫磷残留。

猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体间接酶联免疫吸附测定方法的建立与应用

【目的】建立一种检测猪圆环病毒3型抗体的血清学方法。【方法】以猪圆环病毒3型衣壳蛋白为包被抗原,通过筛选和优化反应条件建立一种检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,并进行特异性试验与重复性试验以及初步临床应用。【结果】确定检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法的各项最佳反应条件;仅有猪圆环病毒3型阳性血清的检测结果为阳性,显示出良好的特异性;批内变异系数和批间变异系数都小于5%,显示出良好的可重复性。在来源于北京地区与河北地区的318份猪的血清中检出猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体阳性率为32.70%,表明这两个地区存在较多的猪圆环病毒3型感染。【结论】建立了一种具有良好特异性和可重复性的检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,可用于猪圆环病毒3型抗体的检测。

环境因子对海藻吸附重金属的影响

探讨了环境因子pH、离子强度对两种常见大型海藻马尾藻(Sargassumfusiforme)和海带(Laminariajaponica)吸附重金属离子(Cu2+、Pb2+、Cd2+、Ni2+)的影响.结果表明,马尾藻对Cu2+、Pb2+、Cd2+的吸附的最佳pH范围为4～6;对Ni2+的最佳pH范围为5～6;海带对Cu2+、Pb2的吸附的最佳pH范围为4～6;对Cd2+、Ni2+的最佳pH范围为5～6;一定的条件下,藻粉对重金属离子的吸附率随离子强度的升高而降低,这主要是溶液中共存离子参与吸附位点的竞争或负离子的空间阻碍导致的.

土壤吸附汞测量方法在哈尔滨市活断层探测中的应用

应用土壤吸附汞测量技术在哈尔滨市部分地区进行活动断层探测,确定滨州断裂的(哈尔滨段)位置和走向与已有地质资料结果稍有偏离;松北断裂和现有结果基本一致;阿什河断裂(哈尔滨段)为两条近似平行隐伏断裂。