呋喃二烯抑制脑胶质瘤作用

目的观察呋喃二烯(furanodiene,FDE)纳米乳对颅内移植G422胶质母细胞瘤小鼠化疗后的生存期变化及病理改变,并初步探讨其作用机制,评估FDE纳米乳对胶质母细胞瘤的抑制作用。方法将G422胶质母细胞瘤细胞植入昆明小鼠脑白质中建模,考察FDE纳米乳及其与卡莫司汀联合组对荷瘤小鼠生存期的影响,观察各组瘤组织的病理结构变化。采用细胞增殖抑制法、Hoechst33258染色法和Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率等方法初步探索FDE对人胶质瘤U251细胞的作用机制。结果 FDE纳米乳(80 mg·kg^(-1))组治疗荷瘤小鼠生命延长率为28.1%,联合组生命延长率可达69.0%;组织病理学分析显示,FDE纳米乳组肿瘤细胞排列疏松,未见明显侵润;联合组肿瘤体积小,且与周围组织间边界清晰。细胞增殖抑制和Hoechst33258荧光染色实验均表明FDE对U251细胞增殖抑制具有浓度依赖性,流式细胞术结果分析当FDE浓度为18.5μmol·L^(-1)时,U251细胞早期凋亡率可达71.8%。结论 FDE通过调节胶质母细胞的增殖、早期凋亡等机制,有效抑制小鼠胶质瘤的生长。

呋喃二烯的体内外抗肿瘤作用研究

探讨了呋喃二烯的体内外抗肿瘤作用及作用机理.采用MTT法检测呋喃二烯对10种人肿瘤细胞的体外增殖抑制作用,研究发现呋喃二烯对体外培养的多种肿瘤细胞具有很强的抑制和杀伤效应,其IC50在0.98-4.81μg/mL.并对敏感的白血病细胞HL-60进行初步的作用机制研究,其形态学和流式细胞分析试验均表明它能有效诱导细胞调亡.整体动物试验结果可证实呋喃二烯乳注射液能明显延长荷腹水癌S180小鼠的生存期,生命延长率分别为80 mg/kg(91.2%),30 mg/kg(82.4%),10 mg/kg(70.59%).

呋喃二烯纳米结构脂质载体的制备及包封率的研究

选择固体脂质单硬脂酸甘油酯和液态油辛酸/癸酸三甘油酯,以制备一种新型固体脂质纳米粒——呋喃二烯纳米结构脂质载体(FN-NLC)传递系统,并考察其理化性质.采用热融-超声分散法制备FN-NLC.以包封率、平均粒径和Zeta电位为指标,考察了脂质的种类、固体和液态脂质的比例、乳化剂的种类和用量等影响因素.经单因素考察和正交试验设计优选,确定单硬脂酸甘油酯与辛酸/癸酸三甘油酯为脂质材料,所制备的FN-NLC的平均粒径为125.1 nm,Zeta电位30.19 mV,多分散系数0.201,载药量4.2%,包封率93.5%.于4℃放置6个月,平均粒径、Zeta电位、包封率无明显变化.本研究为NF-NLC的研究和开发奠定了基础.

复方莪术油栓中呋喃二烯及莪术醇的测定

目的:建立复方莪术油栓中呋喃二烯和莪术醇的含量测定方法。方法:采用《中国药典》2010年版复方莪术油栓〔含量测定〕项下色谱条件。结果:呋喃二烯在85.89～2579.4 ng范围内,莪术醇在16.272～488.16 ng范围内,线性关系良好,平均回收率分别为99%和97%,RSD分别为3.9%与4.0%(n=9)。结论:药典标准色谱条件可同时控制呋喃二烯和莪术醇的含量,为进一步完善复方莪术油栓质量标准提供了参考依据。

HPLC同时测定不同品系桂郁金中吉马酮和呋喃二烯含量

目的:建立不同品系桂郁金中吉马酮和呋喃二烯的含量测定方法,为桂郁金优良品种选育提供依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取不同品系桂郁金挥发油,并采用挥发油测定法测定含量;采用RP-HPLC法同时测定吉马酮和呋喃二烯含量,色谱柱为20RBXSB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为216 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,进样量为10μl。结果:吉马酮进样量在34~170μg时与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为99.18%,RSD为1.10%(n=6);呋喃二烯进样量在40~200μg时与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9991),平均回收率为99.08%,RSD为0.76%(n=6);不同品系桂郁金中吉马酮含量最高达到1.0556 mg/g,含量最低为0.3642 mg/g,平均值为(0.6342±0.2208)mg/g,RSD为23.61%;呋喃二烯含量最高达到1.1687 mg/g,含量最低为0.4173 mg/g,平均值为(0.7447±0.2584)mg/g,RSD为27.63%;吉马酮和呋喃二烯含量由高到低排序均为C84(兴业)>C16(钦州)>B97(灵山)>玉8/81(玉林)>玉3/B3(玉林)>玉11/28(玉林)>B72(玉林)>C105(钦州)。不同品系桂郁金挥发油含量为0.07%~0.21%。结论:同一品系桂郁金吉马酮含量较高者其呋喃二烯含量也较高,不同品系桂郁金挥发油及吉马酮、呋喃二烯含量差异较大。双优品系以C84(兴业)和C16(钦州)质量为优,可为桂郁金新品选育及建立桂郁金质量标准提供参考依据。

呋喃二烯对人胃腺癌MGC-803细胞凋亡的诱导作用

目的研究呋喃二烯（FDE）在体外对人胃腺癌MGC-803细胞凋亡的诱导作用。方法 FDE46.29-740.74μmol·L^-1MGC-803细胞孵育48 h,MTT法测定FDE对细胞存活的抑制率;FDE 92.58-370.32μmol·L^-1MGC-803细胞作用24 h,光镜下及Hoechst 33342荧光染色分别观察细胞形态和细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,罗丹明123染色和DCFH-DA荧光探针分别检测细胞线粒体膜电位的改变和活性氧的产生。结果 MTT结果表明,FDE 46.29-740.74μmol·L^-1MGC-803存活具有明显抑制作用,作用24,48和72 h时IC50分别为347.91,257.41和101.01μmol·L^-1流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC/PI双染结果显示,FDE在92.58-370.32μmol·L^-1用24 h,能显著促进MGC-803细胞凋亡（P〈0.05）。细胞周期检测结果表明,FDE可使MGC-803细胞周期阻滞于S期。罗丹明123和DCFH-DA染色结果显示,当药物浓度为370.37μmol·L^-1,FDE使细胞内线粒体膜电位降低（P〈0.05）,对应荧光强度的细胞比例与对照组的比值为0.85∶1,使细胞内活性氧水平增加,活性氧水平为对照组的1.30倍（P〈0.05）。结论 FDE可抑制人胃腺癌MGC-803细胞存活,并诱导其凋亡,其诱导凋亡的作用机制可能与激活线粒体凋亡通路、影响细胞周期和抑制DNA的生物合成相关。

呋喃二烯纳米脂质载体中主药含量及包封率的测定

目的建立呋喃二烯纳米脂质载体(FN-NLC)包封率和含量测定方法。方法采用微柱离心法分离FNNLC中游离药物,高效液相色谱法测定药物浓度并计算包封率。结果微柱离心法可以很好地将纳米脂质载体与游离药物分离,空白纳米脂质载体的回收率为98.6%~100.3%,游离药物的吸附率高于99%;纳米脂质载体的包封率约90%。结论葡聚糖凝胶微柱离心法快速便捷,准确性高,适于FN-NLC含量和包封率的测定。

呋喃二烯抗癌药效学评价及作用机制研究

目的使用斑马鱼模型体内评价呋喃二烯对乳腺癌和胰腺癌的抗肿瘤效果,研究呋喃二烯的可能抗癌机制.方法通过将人类乳腺癌细胞和胰腺癌细胞移植到斑马鱼体内建立斑马鱼肿瘤移植模型,评价呋喃二烯抗癌药效;呋喃二烯直接处理正常斑马鱼,观察对斑马鱼的凋亡作用和抑制血管作用,结果呋喃二烯（1.4、4.1和12.2μmol·L^-1对乳腺癌移植瘤和胰腺癌移植瘤的生长均有明显抑制作用.呋喃二烯（4.1、13.5和40.5μmol·L^-1）能显著诱发斑马鱼细胞凋亡.100μmol·L^-1呋喃二烯能明显抑制斑马鱼血管形成.结论：呋喃二烯抗乳腺癌和胰腺癌效果明显,抗癌机制可能为诱发细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成.

呋喃二烯纳米脂质载体的制备及其性质的考察

目的制备呋喃二烯纳米脂质载体,对其处方工艺进行优化,并考察其制剂的性质。方法以乳化超声法制备呋喃二烯纳米脂质载体,根据单因素考察的结果,通过正交设计实验,优选出最佳制备工艺处方。对粒子的形态、粒径和电位进行表征,微柱离心法测定包封率。结果最优处方中MCT占总脂质质量的30%,乳化剂用量为20 g·L-1。F68与磷脂的质量比为2∶1。该优化处方制备的纳米粒子呈类球型,粒径为94.64 nm,zeta电位为-19.4 m V,包封率为91.27%。结论本实验制备的呋喃二烯纳米脂质载体粒径小,稳定性较好且药物包封率高。

HPLC法同时测定灵泽片中牻牛儿酮和呋喃二烯

目的建立HPLC法同时定量测定灵泽片（乌灵菌粉、莪术、浙贝母、泽泻）中牻牛儿酮和呋喃二烯。方法Dionex Acclaim 120 C18色谱柱（4.6 mm×250 mm×5μm）,流动相为乙腈和水,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长216 nm;进样量5μL。结果牻牛儿酮在2.21-44.24μg/m L的质量浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率98.5%,RSD为1.6%;呋喃二烯在2.08-41.60μg/m L的质量浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率97.3%,RSD为1.6%。结论本方法操作简便,结果准确,可以替代GC法测定牻牛儿酮。

UPLC-MS-MS法测定血浆中呋喃二烯浓度及在Beagle犬体内的药代动力学研究

目的建立UPLC-MS-MS法测定血浆中呋喃二烯含量,研究呋喃二烯在Beagle犬体内的药代动力学,为临床用药提供参考。方法选取Beagle犬12只,随机分为阴性对照组和注射用呋喃二烯组,以静脉滴注方式给药,血浆样品采用UPLC-MS-MS测定呋喃二烯浓度,用DAS计算药代动力学参数。结果呋喃二烯血浓度线性范围为15.6~5000ng·mL^-1;批间和批内精密度均RSD<15%;准确度在85%~115%。呋喃二烯给药后血药浓度-时间曲线符合二室模型,消除半衰期为(40.86±24.64)min,峰浓度为(657.78±228.95)ng·mL^-1,药时曲线线下面积为(39075.00±15023.59)ng/(min·mL),分布容积为(5.88±2.56)L·kg^-1。结论本方法分离效率高、稳定、准确且重现性好,满足呋喃二烯的血浆药物浓度测定及药代动力学研究的需要;而呋喃二烯在Beagle犬体内消除很快,基本分布于体液,可减少非目标部位的损害。

呋喃二烯mPEG-PLGA纳米粒的制备及大鼠口服生物利用度

目的:制备载呋喃二烯的单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒(monomethoxy polyethylene glycol-poly-actic coglycolic acid-nanoparticles,m PEG-PLGA-NPs),并研究其理化性质及大鼠口服生物利用度。方法:采用乳化溶剂挥发法制备纳米粒,应用动态光散射法考察其粒径、Zeta电位及4℃贮存稳定性,以动态膜透析法测定其释放度,微柱离心-HPLC法测定其载药量和包封率。大鼠经灌胃(ig)给药,给药剂量50 mg·kg-1,HPLC法测定血药浓度并计算相对生物利用度。结果:m PEG-PLGA-NPs平均粒径为(147.7±1.7)nm,Zeta电位为-5.69±1.40 m V,粒度分布均匀,4℃贮存稳定性良好。载药量和包封率分别为(10.2±0.3)%和(84.5±3.7)%。与呋喃二烯混悬液相比,PLGA-NPs和m PEG-PLGA-NPs大鼠口服相对生物利用度分别为164.16%和260.90%。结论:m PEG-PLGA-NPs能够比PLGA-NPs更显著改善呋喃二烯大鼠口服生物利用度(P<0.01)。

RP-HPLC同时测定莪术中莪术二酮、莪术醇、吉马酮、莪术烯、呋喃二烯和β-榄香烯的含量

目的：用RP—HPLC同时测定莪术中莪术二酮、莪术醇、吉马酮、莪术烯、呋喃二烯和β-榄香烯的含量，对不同产地莪术的莪术二酮、莪术醇、吉马酮、莪术烯、呋喃二烯和卢．榄香烯成分进行研究。方法：采用依利特HypersilODS（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，流动相为乙腈（A）-0．1％磷酸水（B），梯度洗脱，检测波长215nm，流速1．0mL·min^-1，柱温25℃。结果：莪术二酮、莪术醇、吉马酮、莪术烯、呋喃二烯和卢一榄香烯分别在0．544～5．44μg（r=0．9996），0．414～4．14μg（r=0．9998），0．122～1．22μg（r=0．9995），1．78～17．8μg（r=0．9993），0．318～3．18μg（r=0．9994），0．506～5．06μg（r=0．9995）呈良线性关系，平均回收率分别为99．60％（RSD2．71％），101．48％（RSD1．37％），99．50％（RSD2．47％），100．29％fRSD2．52％），99．87％（RSD1．51％），100．58％（RSD1．33％）。结论：方法灵敏、准确，分离效果较好，无干扰，可为莪术质量标准评价提供依据，为临床合理用药提供科学依据。

PEG化呋喃二烯固体脂质纳米粒的制备及体外巨噬细胞摄取研究

目的:研究PEG化呋喃二烯固体脂质纳米粒(PEG-FDE-SLN)的制备方法,并考察其理化性质及细胞摄取性能。方法:实验采用乳化蒸发-低温固化法制备PEG-FDE-SLN,以粒径、Zeta电位、多分散系数、包封率为评价指标,通过单因素考察选择制备PEG-FDE-SLN的最佳处方。以小鼠腹腔巨噬细胞(MPM)为模型做体外细胞摄取实验。结果:制备PEG-FDE-SLN的最佳处方为固态脂质单硬脂酸甘油酯100 mg,液态脂质中碳链三酰甘油40 mg,乳化剂蛋黄卵磷脂13 mg,聚乙二醇硬脂酸酯150 mg,制备的样品粒径为(272.9±2.4)nm,多分散系数为(0.193±0.022),Zeta电位为(-19.82±0.52)mV。包封率为(90.0±1.0)%。体外细胞摄取实验证明,MPM对FDE-SLN的摄取随着聚乙二醇硬脂酸酯的加入以及PEG相对分子质量的增加而逐渐减小,以PEG5000-FDE-SLN摄取最少为(8.4±0.4)%。结论:本实验制备的PEG-FDE-SLN,能够改善巨噬细胞对FDE-SLN的摄取作用,PEG链长度影响MPM对FDE-SLN的摄取作用,PEG链越长MPM摄取越少。

呋喃二烯长循环脂质体的制备与表征

目的:制备呋喃二烯长循环脂质体并进行表征。方法:采用薄膜超声分散法制备呋喃二烯长循环脂质体,以包封率和粒径为评价指标,通过单因素-正交设计优化脂质体处方及工艺。结果:优化后的处方和制备工艺为:水化温度为55℃,磷脂浓度为3.5%,磷脂与胆固醇比例为12∶1,脂药比为15∶1,DSPEMPEG2000摩尔百分比为5%。此条件下制备的脂质体包封率为90.6%,平均粒径为113.4 nm,Zeta电位为-45.9 m V。结论:本实验所制备的呋喃二烯长循环脂质体包封率较高,粒度分布范围较窄,平均粒径较小,具有很好的应用前景。

呋喃二烯脂质体的制备及理化性质考察

目的:制备呋喃二烯脂质体,并考察其理化性质。方法:用乙醇注入法制备呋喃二烯脂质体,在单因素试验的基础上,以磷脂浓度、脂药比和磷脂/胆固醇的比例为自变量,以包封率、载药量、粒径为因变量,采用星点设计-效应面法优化处方,并预测较优处方且进行验证,按优化条件制备脂质体,考察其粒径、Zeta电位、体外释放等理化性质。结果:最佳制备条件:磷脂浓度为11.95 mg·m L-1,脂药比为9.77,磷脂/胆固醇为8.32,此条件下制备的脂质体包封率为81.35%,载药量为4.86%,粒径为114.5 nm。结论:乙醇注入法制备的脂质体粒度均匀、包封率高、稳定性好,并有一定的缓释作用。

呋喃二烯纳米脂质载体冻干制剂的研究

目的:制备呋喃二烯纳米脂质载体(furanodiene-loaded nanostructured lipid carriers,FN-NLC)的冻干制剂,并对其性质进行考察。方法:通过单因素实验优选冻干制剂的处方工艺,并评价其制剂学性质。结果:以5%海藻糖溶液作为冻干保护剂,确定最终的冻干工艺。冻干后制剂(粒径为105.57 nm,Zeta电位为-18.8 m V,包封率为88.83%),与冻干前(粒径为95.23 nm,Zeta电位为-19.6 mV,包封率为91.27%)相比,无明显变化。结论:在优选的冻干工艺条件下可制得稳定的呋喃二烯纳米结构脂质载体冻干制剂。

呋喃二烯对肝脏细胞色素P450酶不同亚型的影响

目的考察呋喃二烯(furanodiene,FDE)对肝脏微粒体主要的细胞色素P450(CYP)酶活性的影响。方法采用探针底物法,考察FDE在体外孵育体系中对大鼠和人肝微粒体CYP1A、CYP2A、CYP3A、CYP2C、CYP2D、CYP2E1的抑制作用,并计算相应的IC50值;采用微粒体体外"鸡尾酒"孵育法(cocktail法),考察大鼠经低、高剂量FDE(40 mg·kg?1和160 mg·kg?1)连续灌胃7 d,其肝微粒体主要CYP酶活性的变化。结果 FDE对大鼠肝微粒体CYP2D1和CYP2C6/7有较弱的抑制作用,其IC50分别为15.8和23.8μmol·L?1;对人肝微粒体CYP2C9也有较弱的抑制作用,IC50为26.1μmol·L?1。与对照组比较,大鼠灌胃40 mg·kg?1 FDE,肝微粒体主要CYP酶活性无显著变化;灌胃160 mg·kg?1后,肝微粒体CYP2E1活性为对照组的164%。结论 FDE对大鼠和人肝微粒体CYP主要亚型的抑制作用较弱;40 mg·kg?1 FDE对大鼠肝微粒体主要CYP酶未显示明显诱导作用,160 mg·kg?1 FDE对肝微粒体CYP2E1有一定的诱导作用。

呋喃二烯抗脑胶质瘤的研究

目的:本文从体内外多角度进行呋喃二烯抑制脑胶质瘤作用的研究及机制的初步探讨。方法:采用四甲基偶氮咗盐微量酶反应比色法(MTT法),研究呋喃二烯对体外培养的人脑胶质瘤U251细胞的增殖抑制作用。呋喃二烯脂质微球的体内抗肿瘤活性研究是通过建立小鼠脑胶质瘤G422整体动物模型,选用昆明种雄性小鼠,呋喃二烯脂质微球(80和40 mg·kg-1),用卡莫司汀(BCNU 20 mg·kg-1)作为阳性对照组,腹腔注射给药,qd,共9次,计算胸腺、脾脏指数及抑瘤率。结果:研究发现FDE浓度为20μg·m L-1作用于U251细胞48 h,对U251细胞抑制率为92.1%,形态学实验表明其能有效诱导细胞调亡。当对G422荷瘤小鼠腹腔给药剂量分别为FDE 80 mg·kg-1和FDE 40 mg·kg-1时,抑瘤率为46.19%和25.56%。结论:呋喃二烯对脑胶质瘤细胞具有很强的抑制和杀伤效应。

呋喃二烯纳米乳冻干工艺的研究

目的:研制呋喃二烯冻干纳米乳剂,提高呋喃二烯纳米乳的稳定性。方法:采用冷冻干燥法将呋喃二烯纳米乳冷冻,以冻干乳的外观、复溶情况和粒径等为考察指标优化呋喃二烯纳米乳冻干保护剂和冻干工艺。结果:采用10%的蔗糖作为冻干保护剂所研制的呋喃二烯冻干纳米乳冻干复溶后粒径为(166.3±7.9)nm,多分散系数(polydispersity index,PDI)为0.163;而呋喃二烯纳米乳冻干前平均粒径为(164.9±3.3)nm,多分散系数(PDI)为0.157。并且冻干乳外观雪白、平滑、饱满,复溶速度快,20℃放置粒径及主药含量稳定。结论:该工艺制备的呋喃二烯冻干纳米乳稳定性明显优于其乳剂。