知母中的两种新呋甾皂苷

目的研究知母根茎的化学成分。方法采用水煎提取、大孔吸附树脂SP825柱色谱、反相C18柱色谱等进行分离,并通过化学手段和光谱分析(FAB-MS,1HNMR,13CNMR,1H-1HCOSY)鉴定其化学结构。结果从知母根茎中分离得到6种甾体皂苷,分别鉴定为:(25S)-26-O-β-D-吡喃葡糖基-22-羟基-5β-呋甾-2β,3β,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(知母皂苷N,1),知母皂苷E1(2),(25S)-26-O-β-D-吡喃葡糖基-22-甲氧基-5β-呋甾-2β,3β,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(知母皂苷O,3),知母皂苷E2(4),(25R)-26-O-β-D-吡喃葡糖基-22-羟基-5α-呋甾-2α,3β,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡糖基-(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡糖基-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷(purpureagitosid,5),marcogenin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-galactopyranoside(6)。结论化合物1和3为新化合物,命名为知母皂苷N和知母皂苷O,化合物5为首次从知母中分离得到。

薤白中呋甾皂苷的含量测定

目的 :建立了测定薤白中呋甾皂苷含量的E试剂比色法。方法 :用对二甲氨基苯甲醛 HCl乙醇液的发色体系 ,测定波长 5 15nm ,利用均匀设计原理确定最佳实验条件。结果 :标准曲线在 0 .1975～ 0 .9880mg·ml-1线性关系良好 ,平均回收率为 97.7% (RSD =3.6 5 % )。结论 :此法可作为评价薤白的质量标准。

川麦冬中的新呋甾皂苷的分离与鉴定

Traditional Chinese Medicine "maidong"[Ophiopogon japonicus(Thunb.) Ker-Gawl] is the important medicine used to treat cardiovascular diseases.A new furosteroidal saponin,together with three known steroidal saponins,was isolated from the tuber of Ophiopogon japonicus(Thunb.) Ker-Gawl.The structure of the new furosteroidal saponin,named Ophiopogoside A,was elucidated as 26-O-β-D-glucopyranosyl-(25S)-1β,3β,22α,26-tetrahydroxyfurot-5-ene 3-O-[-α-L-arabinopyranosyl(1→3)]-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-β-D-fucopyranoside mainly by using 1D,2D NMR techniques,ESI-MS analysis as well as chemical methods.

滇黄精中两个呋甾皂苷的NMR研究(英文)

从滇黄精新鲜根茎中分离得到一对立体异构的呋甾皂苷,利用1D、2DNMR鉴定其结构为:26OβD吡喃葡萄糖基25(S)呋甾△5(6)烯3β,22,26三羟基12酮基3OβD吡喃葡萄糖基(1→4)βD吡喃呋糖苷(1,25SkingianosideD)和26OβD吡喃葡萄糖基25(R)呋甾△5(6)烯3β,22,26三羟基12酮基3OβD吡喃葡萄糖基(1→4)βD吡喃呋糖苷(2,kingianosideD).利用1D、2DNMR对两个呋甾皂苷25位的立体构型进行了确定,并对其碳、氢信号进行了全归属.

利用重组F26G酶实现呋甾皂苷向螺甾皂苷的体外生物转化

用BamHⅠ和XbaⅠ两种限制酶酶切质粒 pKG2 7,获得了编码F2 6G(F2 6G :furostanolgly coside 2 6 O β glucosidase)的cDNA ,然后将其重组到表达载体 pET 2 2b上而得到pET 2 2b CSF2 6G ,利用大肠杆菌E .coliBL2 1进行表达 ,用胞内可溶蛋白进行酶反应 ,通过TLC、HPLC分析证明重组菌表达出高活性的F2 6G酶 。

HPLC-ELSD法测定天冬总呋甾皂苷中AR-Ⅰ的含量

目的：测定天冬总呋甾皂苷中AR—Ⅰ的含量。方法：采用高效液相色谱法，色谱条件：Diamonsil C18（5mm×250mm，5μm）色谱柱；流动相：CH3CN—H2O（36：64）；流速：0．8ml·min^-1；进样量20μl；柱温：室温。以ELSD为检测器，气化温度40℃，气体（N2）压力2．0×10^5Pa。结果：AR—Ⅰ在0．094-0．9400g·L^-1。范围内呈良好线性关系（r=0．9992），检测具有较高的灵敏度和稳定性，平均回收率为101．3％（n=6），RSD=2．36％。结论：HPLC-ELSD为天冬呋甾皂苷的测定提供了简便实用的分析方法。

天冬中呋甾皂苷含量测定方法的建立

目的：采用E试剂比色法建立了天冬总皂苷含量测定方法。方法：用对二甲氨基苯甲醛-HCl乙醇液的发色体系，以天冬皂苷AC-9作为指标，在波长510nm测定天冬总皂苷含量。结果：标准曲线在0．08～0．40mg范围内线性关系良好，平均回收率为99．79％（RSD=1．05％）。结论：此法可作为评价天冬总皂苷的质量标准。

知母中三个新的呋甾皂苷

从中药知母（ＡｎｅｍａｒｒｈｅｎａａｓｐｈｏｄｅｌｏｉｄｅｓＢｇｅ．）中分离出三种新的呋甾皂苷，初步鉴定为（２５Ｓ）－２６－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖－５β－呋甾－２０（２２）－双键－３β，２６－二醇－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖基（１→２）〔β－Ｄ－葡萄糖基（１→３）〕－β－Ｄ－葡萄糖基（１→４）－β－Ｄ－半乳糖苷（１），（２５Ｓ）－２６－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖基－２２－羟基－５β－呋甾－３β，２６－二醇－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖基（１→２）〔β－Ｄ－葡萄糖基（１→３）〕－β－Ｄ－葡萄糖基（１→４）－β－Ｄ－半乳糖苷（２），（２５Ｓ）－２６－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖基－２２－甲氧基－５β－呋甾－３β，２６－二醇－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖基（１→２）〔β－Ｄ－葡萄糖基（１→３）〕－β－Ｄ－葡萄糖基（１→４）－β－Ｄ－半乳糖苷（３）．分别命名为ｔｉｍｏｓａｐｏｎｉｎ－ＢⅣ，ｔｉｍｏ－ｓａｐｏｎｉｎ－ＢⅤ，ｔｉｍｏｓａｐｏｎｉｎ－ＢⅥ．

HPLC测定薤白提取物中呋甾皂苷Ⅰ的含量

目的：建立薤白提取物中呋甾皂苷Ⅰ的高效液相含量测定法.方法：薤白提取物经过甲醇回流后,滤液浓缩,定容,以甲醇-水（69：31）为流动相,柱温30℃,以HPLC-RID检测其中呋甾皂苷Ⅰ的含量.结果：线性范围5～100μg,r=0.999 8,平均回收率101.1%,RSD 1.6%.结论：本法简单,快捷,重复性良好,可用于薤白提取物的质量控制.

大孔吸附树脂纯化蒺藜呋甾皂苷和总黄酮工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂纯化蒺藜呋甾皂苷、总黄酮的工艺条件。方法:以蒺藜呋甾皂苷、总黄酮含量及其转移率为指标,采用单因素试验法,优选树脂富集纯化蒺藜呋甾皂苷和总黄酮的最佳工艺。结果:纯化最优工艺条件:上样量为0.4g/mL,树脂径高比为1∶8,4BV水以2mL/min流速洗脱,分别用5BV50%乙醇、2BV/h 70%乙醇洗脱。D101树脂纯化后蒺藜呋甾皂苷纯度由22.59%提高到53.54%,增加了1.37倍;总黄酮的纯度由12.46%提高到32.11%,增加了1.58倍。结论:D101大孔吸附树脂可用于蒺藜呋甾皂苷和总黄酮的纯化。

蒺藜呋甾皂苷对犬缺血心肌膜电位及组织结构的影响

目的研究蒺藜呋甾皂苷对犬冠状动脉结扎致急性心肌缺血的心肌心外膜电位的影响以及相应的心肌组织结构的改变。方法采用结扎犬冠状动脉造成急性心肌缺血模型,观测给予蒺藜呋甾皂苷后心肌24点心外膜电位以及心肌病理的改变情况。结果蒺藜呋甾皂苷6,12 mg·kg^(-1)可明显减少心肌缺血的范围,改善心肌缺血的程度;病理切片显示蒺藜呋甾皂苷3,6,12 mg·kg^(-1)三个剂量组犬心肌变性、坏死程度较模型组有改善,其中以6,12 mg·kg^(-1)两个剂量组心肌细胞变性、坏死程度较轻,组织细胞结构基本完整。结论蒺藜呋甾皂苷对犬冠脉结扎引起的急性心肌缺血有明显的保护作用。

具有抗炎活性的双三糖链呋甾皂苷的合成

目的设计合成两个甲基原薯蓣皂苷的衍生物,分别为3,26-O-二{α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)]-3,6-O-二特戊酰基--βD-吡喃葡萄糖基}-22-甲氧基-25(R)-呋甾-5-烯-3β,26-二醇(1)和3,26-O-二{α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)]--βD-吡喃葡萄糖基}-22-甲氧基-25(R)-呋甾-5-烯-3β,26-二醇(2)。方法以薯蓣皂素为起始原料,采用逐步糖苷化策略,经10步反应制得目标化合物,总收率约为15%。结果与结论合成的两个双三糖链呋甾皂苷均为未见文献报道的新化合物,其结构经ESI-MS和13C-NMR确证,初步生物活性筛选结果表明化合物1具有一定的抗炎活性。

薯蓣呋甾皂苷对犬心肌缺血的保护作用

目的:研究薯蓣呋甾皂苷对犬实验性心肌缺血的保护作用。方法:结扎麻醉犬冠状动脉左前降支以造成急性心肌缺血模型,经十二指肠给予不同剂量的薯蓣呋甾皂苷(分别为0.1 g/kg、0.2 g/kg和0.4 g/kg),观察给药前后各时间段心肌缺血程度、血清肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)的影响。结果:薯蓣呋甾皂苷能明显改善麻醉犬急性心肌缺血的缺血症状和缺血程度,能明显抑制犬结扎后血清CK值和LDH值的升高(P<0.05)。结论:薯蓣呋甾皂苷具有明显改善犬急性心肌缺血的作用。

HPLC-CAD同时测定知母根茎与须根中5种呋甾皂苷的含量

目的建立高效液相色谱-电雾式检测器(HPLC-CAD)同时测定知母根茎与须根中5种呋甾皂苷含量的方法。方法采用Tech Mate C18-ST-Ⅱ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(22∶78,V/V);流速1.0 ml/min;柱温30℃;CAD检测器参数:采集频率10 Hz;雾化温度55℃;filter:5 s。结果知母中5种主要呋甾皂苷:知母皂苷N、知母皂苷L、知母皂苷BⅡ、25R-知母皂苷BⅡ和25S-officinalisnin-Ⅰ分别在一定范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9992~0.9998,检测限分别为0.28、0.92、0.92、0.92和0.92 ng,定量限分别为0.92、2.77、2.77、2.77和2.76 ng,精密度、重复性、48 h稳定性的RSD均<3.0%,平均加样回收率分别为98.17%、101.37%、98.53%、97.63%和98.17%。结论本研究建立的HPLC-CAD法重复性好,结果准确可靠,可作为中药知母多成分含量测定的方法。

HPLC法测定蒺藜粗皂苷中蒺藜呋甾皂苷甲的含量

目的:建立蒺藜粗皂苷中有效成分蒺藜呋甾皂苷甲的含量测定方法。方法:采用HPLC法。色谱柱:Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(29∶71),流速:0.7 ml.min-1,蒸发光散射检测器,漂移管温度:110℃,气体流速:2.0L.min-1。结果:进样量在1.376～8.256μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为100.24%,RSD=1.6%,样品含量80.8～107.6 mg.g-1。结论:该方法简便、结果准确可靠、重现性好,且灵敏度高,专属性强,可用于蒺藜呋甾皂苷甲的含量测定。

金线莲呋甾皂苷26-O-β-葡萄糖苷酶基因克隆与表达分析

【目的】克隆金线莲(Anoectochilus roxburhii)ArF26G基因的cDNA全长,分析该基因在金线莲茎、叶中的表达模式,以期为进一步了解金线莲甾体皂苷的生物合成代谢调控机制提供参考。【方法】利用RACE技术克隆金线莲ArF26G基因cDNA全长,以pET-28a(+)为载体构建原核表达载体并诱导表达,采用荧光定量PCR方法分析不同温度(5、15、25、35℃)和种植时间(1–6个月)ArF26G基因在茎和叶中的表达水平。【结果】ArF26G基因的cDNA全长1982 bp,含有1个1764 bp的ORF,编码587个氨基酸,编码蛋白具有Glycosyl hydrolase 1(GH1)superfamily蛋白保守区,定位于叶绿体,N端33个氨基酸残基为叶绿体转运肽,分子量为66.48 kD,理论等电点(pI)为5.31,不稳定系数为37.92,属稳定蛋白。构建了pET-28a-ArF26G原核表达载体,并在大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中成功诱导表达。荧光定量PCR分析结果显示,ArF26G基因在茎中的表达量极显著高于叶,25℃处理表达量最高。金线莲种植时间达4个月时,ArF26G基因在茎中的表达量是25℃处理组培苗茎的11.9倍,种植5个月达到23.3倍。【结论】本研究克隆了金线莲ArF26G基因cDNA全长,其表达量在25℃以及种植5个月时表达量最高。

鹿药新呋甾皂苷的分离鉴定及活性研究

目的:研究鹿药Smilacina japonica根茎及根的化学成分及活性。方法:采用超声提取,柱色谱分离与纯化,根据理化性质及红外、质谱、一维、二维核磁共振等波谱方法鉴定结构,进行了体外抗肿瘤活性测定。结果:分离得到1个化合物,鉴定为26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-呋甾-5-烯-3β,12,17α,22ξ,26-五醇-12-O-乙酰基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),该化合物具有抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞生长的活性。结论:化合物1为新化合物。

蒺藜果中蒺藜呋甾皂苷B的HPLC-ELSD法测定

目的建立反相高效液相色谱-蒸发光检测法(HPLC-ELSD)测定蒺藜呋甾皂苷B的方法。方法色谱柱Vp-ODSC18柱,柱温40℃,流动相:乙腈-水(26∶74)→(28∶72)→(31∶69)→(50∶50)梯度,体积流量1mL/min,温度:105℃,气体流量:3.0mL/min。结果该方法的线性范围为2.0～10.0μg,r=0.9973,平均回收率为96.68%。结论方法准确,灵敏度高,专属性强,重现性好,可用于蒺藜药材中该成分的定量测定。

紫外可见分光光度法测定蒺藜果中呋甾总皂苷含量

目的:建立蒺藜果中呋甾总皂苷含量的测定方法。方法:以蒺藜呋甾皂苷B为对照品,采用紫外可见分光光度法在518 nm处测定蒺藜果中呋甾总皂苷的含量。结果:测得蒺藜呋甾皂苷B的线性范围为326.2～471.1μg,r=0.9997(n=5),平均回收率为98.60,RSD为1.36%。结论:该方法准确,灵敏度高,专属性强,重现性好。可用于蒺藜药材和蒺藜总皂苷制剂中该成分的含量测定。

黄姜中呋甾总皂苷含量的测定

目的:建立黄姜中呋甾皂苷含量的测定方法。方法:采用E试剂比色法,以黄姜素A为对照品,用对二甲氨基苯甲醛-HCL乙醇液的发色体系,测定波长:518 nm。结果:标准曲线在0.100-0.518 mg范围内,线性关系良好,平均回收率为97.2%,RSD%为0.66%(n=6)。结论:此法操作简便快速、准确,可作为评价黄姜质量的方法。