基于FAERS数据库的周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂血液毒性真实世界研究

目的 基于美国美国食品药品管理局(FDA)的不良事件报告系统(FAERS)分析3种周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂上市后的不良事件(AEs)信号,为临床用药安全提供参考。方法 提取FAERS数据库2015年第一季度至2022年第一季度共29个季度AEs,利用报告比值比法(ROR)和比例报告比值法(PRR)对CDK4/6抑制剂AEs进行数据挖掘。结果 CDK4/6抑制剂相关性血液毒性报告共有7 872份,各抑制剂血液毒性AEs占总AEs比例依次为哌柏西利(80.31%)>瑞博西利(15.36%)>阿贝西利(4.33%)。血液毒性常见中性粒细胞减少和贫血。哌柏西利(2 982/6 322,47.17%)和瑞博西利(613/1 209,50.70%)致中性粒细胞减少的报告占比较阿贝西利(117/341,34.31%)更高,血液毒性主要发生在药物开始使用后60 d内(1 630,61.86%),哌柏西利中位时间最长,且用药90 d后仍有32.9%的患者存在血液毒性,不同CDK4/6抑制剂血液毒性临床表现及发生强度存在差异。结论 哌柏西利、阿贝西利、瑞博西利均会导致明显的血液毒性,其中阿贝西利致血液毒性报告最少,但要警惕阿贝西利致贫血后导致死亡的风险。用药后的2个月内密切监测全血细胞计数,关注中性粒细胞、血红蛋白等水平,警惕CDK4/6抑制剂相关血液AEs的发生。

周期素依赖激酶抑制剂对大鼠大脑中动脉缺血后海马迟发性神经元死亡的影响

目的探讨细胞周期素依赖激酶(CdK)抑制剂--olomoucine对大鼠局灶性脑缺血再灌流后海马迟发性神经元死亡的影响。方法 给予大脑中动脉阻塞再灌流大鼠腹腔注射olomoucine,观察再灌流后3,7 d皮层损伤侧海马半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达水平;同时,应用免疫组织化学方法测定再灌流后3,7 d皮层损伤侧海马CAl区神经元细胞核特异性抗原(NeuN)的表达。结果olomoucine能明显抑制大鼠局灶性脑缺血再灌流后海马PCNA蛋白的表达(P＜0.01),降低caspase-3水平(P＜0.01);同时显著减少了海马CAl区神经元的丢失(P＜0.01)。结论研究表明,olomoucine通过抑制细胞增殖活动、减少caspase-3生成,从而降低局灶性脑缺血再灌流后海马迟发性神经元死亡的发生。

小分子细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制剂flavopiridol联合泰素治疗卵巢癌的实验研究

目的:检测flavopiridol联合泰素对人卵巢癌细胞系SKOV3、裸鼠人卵巢癌皮下及腹腔移植瘤模型的治疗作用。方法:应用CCK-8法、流式细胞术和原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测flavopiridol和泰素作用后卵巢癌细胞系SKOV3的细胞存活率和凋亡率;应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测作用前后细胞中cyclinD1的表达:应用ELISA法检测细胞中活性caspase-3的表达。建立裸鼠人卵巢癌皮下及腹腔移植瘤模型,观测flavopiridol和泰素治疗前后裸鼠肿瘤体积的变化并计算抑瘤率,用TUNEL和免疫组化法分别检测作用前后肿瘤组织中的凋亡情况和微血管密度(MVD)值。结果:flavopiri-dol(300nmol/L)或泰素(1μmol/L)单独应用24h均能显著降低细胞存活率,增强caspase-3活性,诱导细胞凋亡,并下调细胞中cyclinD1的表达。Taxol先作用24h再用flavopiridol作用24h的联合用药对二者的上述作用产生显著的协同效应:联合用药后细胞存活率为(5.2±0.8)%,凋亡率为(51.10±2.52)%,caspase-3活性相对值为0.602±0.008,cy-clinD1相对表达水平为0.264±0.076。Flavopiridol和泰素单独应用均能显著抑制皮下移植瘤生长(抑瘤率分别为84.5%和85.7%),并降低肿瘤组织MVD值(分别为12.4±4.7vs 35.2±10.3和15.2±2.9 vs 35.2±10.3)。二者联合应用抑瘤作用稍差(抑瘤率68.9%),抑制MVD作用(23.0±5.1 vs 35.2±10.3)也不及单药治疗。结论:Flavopiridol和泰素均能通过致凋亡作用显著抑制卵巢癌细胞及移植瘤生长,二者联合应用对体外培养的卵巢癌细胞具有协同杀伤作用,但体内治疗中无协同抑瘤作用。

细胞周期素依赖激酶抑制剂研究进展

过去十年中,有关细胞增殖周期的研究进展十分迅速.细胞增殖周期受细胞周期素依赖激酶(cyclin depend kinase,CDKs)调节.CDKs与细胞周期素结合被活化,其中cyclin作为调节亚基、CDKs作为催化亚基、cyclin-CDKs复合物对细胞周期具有正调节的作用,促进细胞分裂.cyclin-CDKs复合物的抑制因子:细胞周期素依赖激酶抑制剂(cyclindepend kinase inhibitor,CKIs,CDKIs)对细胞周期具有负调节的作用.CKIs通过与cyclin-CDKs1复合物再形成稳定的复合物,抑制CDKs催化亚单位的活性而发挥负调节作用,从而阻止细胞分裂.

周期素依赖性激酶抑制剂p18^(INK4C)在急性肾损伤中的表达受血红素加氧酶1调控

目的初步探讨周期素依赖性激酶抑制剂p18INK4C(p18)在急性肾损伤(AKI)中的肾保护作用机制。方法利用血红素加氧酶(HO)-1的化学诱导剂(hemin)和抑制剂(锌原卟啉,ZnPP)观察在顺铂诱导的小鼠肾脏上皮细胞(TCMK-1)损伤中HO-1与p18之间的关系。利用p18基因敲除鼠,观察p18基因缺失对于顺铂诱导的HO-1表达的影响。结果在顺铂诱导的AKI小鼠肾组织及损伤的TCMK-1细胞中,p18、HO-1的mRNA和蛋白表达均明显上调(P值均<0.05),HO-1的诱导表达峰值先于p18上调峰值。在无血清培养的TCMK-1细胞中,HO-1诱导剂hemin与细胞共同孵育后明显上调TCMK-1细胞中HO-1和p18蛋白的表达(P值均<0.05)。相反,HO-1抑制剂ZnPP与顺铂共同孵育TCMK-1后的第8和16小时,ZnPP不仅抑制了顺铂诱导的HO-1蛋白表达的上调,而且使p18的表达受到明显抑制。p18-/-与p18+/+小鼠肾组织中HO-1蛋白表达基线值的差异无统计学意义(P>0.05),顺铂注射后第3天,p18-/-与p18+/+小鼠肾组织中HO-1蛋白的诱导表达量的差异亦无统计学意义(P>0.05)。顺铂注射后第3天,p18+/+(WT)小鼠肾组织中p18蛋白表达上调,而p18-/-小鼠肾脏中p18蛋白表达缺失。结论在顺铂诱导的AKI中,HO-1调控p18的表达,p18部分介导了HO-1在AKI中的保护作用。

细胞周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂治疗激素受体阳性、人表皮生长因子受体2阴性的晚期乳腺癌的研究进展

激素受体阳性(hormone receptor positive,HR+)、人表皮生长因子受体2阴性(human epidermal growth factor receptor 2 negative,HER2−)的乳腺癌是乳腺癌中最常见的分子亚型,预后情况常取决于患者对内分泌治疗的敏感性。HR+、HER2−晚期乳腺癌多已对内分泌治疗药物耐药,而此往往会致患者生存期缩短、生命质量下降等不良结局,故临床上亟需有新的治疗策略/药物。近年来,一些新型口服靶向药物细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)4/6抑制剂陆续获准上市,它们因能为HR^(+)、HER2^(−)晚期乳腺癌患者提供显著的生存益处且安全性良好,成为该类患者的重要有效治疗选择之一。本文就CDK4/6抑制剂的作用机制、有效性、安全性和药物经济学研究进展作一概要介绍和对比分析。

细胞周期素依赖性激酶活性中心残基与其抑制剂相互作用机制研究

以16个2-氨基噻唑衍生物抑制剂为研究对象,利用AutoDock4.2软件进行了分子对接,分析抑制剂分子和细胞周期素依赖性激酶(CDK2)的结合情况。研究结果显示,活性中心残基Leu83主干上的羰基和氨基分别与抑制剂分子C9原子上的氨基和噻唑环上的N原子形成氢键,Glu81主干上的羰基和抑制剂分子C8上的氨基形成氢键,Phe80侧链上苯基和抑制剂母体分子上的苯基形成了π-π堆积作用,CDK2通过与抑制剂分子之间形成的氢键网络和π-π堆积作用将小分子固定在CDK2的活性中心。

槲皮素降低肾小球周期素激酶抑制剂p27水平改善糖尿病肾病

目的 探讨槲皮素改善糖尿病肾病与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分为DM +Qu组 ( 6只 )及DM组 ( 6只 ) ,分别给予槲皮素 10 0mg·kg-1·d-1及同体积的生理盐水灌胃 8周 ;对照组 (正常大鼠 6只 )予等体积生理盐水灌胃 8周。采用蛋白印迹 (Western杂交 )方法测定肾小球裂解液 p2 7蛋白水平 ,采用ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白。结果 DM组大鼠肾小球 p2 7水平为 18.5± 4.3 ,尿白蛋白排泄为 ( 3 9.62± 3 .68) μg/ 2 4h ,肾重 /体重比例为 ( 14.87± 2 .0 2 )× 10 -3,均较其他 2组明显增加 ,ECM蛋白水平也较其他 2组明显增加。与DM组相比 ,DM +Qu组肾小球 p2 7水平 ( 10 .6± 3 .1)、ECM蛋白水平、尿白蛋白排泄 [( 17.62± 3 .0 2 ) μg/ 2 4h]及大鼠肾重 /体重比例 [( 11.3 5± 1.76)× 10 -3]均明显降低 (P <0 .0 1) ;DM +Qu组的血糖水平无明显改变。结论 槲皮素可能通过降低肾小球 p2

槲皮素对糖尿病肾病大鼠的肾小球周期素激酶抑制剂P27水平的影响

目的:探讨槲皮素对糖尿病肾病的影响及该影响与肾小球周期素激酶抑制剂P27的关系。方法:腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)模型,分别以生理盐水或槲皮素(100 mg·kg1·d-1)灌胃8周。蛋白印迹(Western杂交)法测定肾小球裂解液P27蛋白水平,ELISA法测定肾小球裂解液细胞外基质(ECM)蛋白(Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白)和尿白蛋白。结果:DM 8周大鼠肾小球P27水平增高,ECM蛋白水平增加,尿白蛋白排泄增多,肾质量/体质量比值增高。槲皮素灌胃8周显著降低DM大鼠。肾小球P27水平(10.6±3.1 vs 18.5±4.3,P<0.01)和ECM蛋白水平,减少尿白蛋白排泄[(17.62±3.02)vs(39.62±3.68)μg/24 h,P<0.01],降低DM大鼠肾质量/体质量比值(11.35±1.76 vs 14.87±2.02,P<0.01)。槲皮素不改变DM大鼠血糖水平。结论:槲皮素可能通过降低肾小球P27水平改善糖尿病肾病症状。

糖尿病大鼠肾小球周期素激酶抑制剂p27的变化及意义

目的 :探讨糖尿病肾小球周期素激酶抑制剂p2 7水平的变化及p2 7在糖尿病 (DM)肾小球细胞 (特别是系膜细胞MC)肥大中的作用。 方法 :蛋白印迹 (Western杂交 )方法测定肾小球裂解液p2 7蛋白水平 ,RT PCR方法测定肾小球p2 7mRNA ,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM)蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白。 结果 :随着DM病程的延长 ,DM大鼠肾小球p2 7水平和肾小球ECM蛋白水平逐渐增高 ,2 4h尿白蛋白排泄量逐渐增加 ,同时DM大鼠肾重 /体重呈增高趋势。DM(2 8天 )大鼠与正常大鼠间肾小球p2 7mRNA无差别。不同病程糖尿病大鼠间全血血糖浓度无明显差异。 结论 :DM大鼠肾小球p2 7水平增高 ,p2 7水平增高可能在DM大鼠肾小球细胞肥大 (特别是MC肥大 )中起重要作用。

大黄素抑制系膜细胞增生与周期素激酶抑制剂p27的关系

目的 :探讨周期素激酶抑制剂p2 7在大黄素抑制肾系膜细胞 (mesangialcell,MC)增生中的作用。方法 :蛋白印迹 (west ern杂交 )方法测定MC裂解液p2 7蛋白水平 ,[3H]胸腺嘧啶核苷 ([3H]TdR)测定MC增生的情况 ,观察不同浓度大黄素 (50mg/L、10 0mg/L )对肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)刺激的MC中p2 7水平及增生程度的影响。结果 :TNF α (2 0万U/L)使无血清培养 2 4h的MC中p2 7水平降低 ,同时使 [3H]TdR掺入增加 ;大黄素提高TNF α刺激的MC中p2 7水平 ,同时使 [3H]TdR掺入减少。大黄素的上述作用随剂量的增大而增强。结论 :大黄素可能通过提高p2 7水平抑制TNF α诱导的MC增生。

高糖培养的系膜细胞肥大与周期素激酶抑制剂p27的关系

目的 研究周期素激酶抑制剂ｐ２７在高糖培养系膜细胞（ＭＣ）肥大中的作用。方法 蛋白印迹（ｗｅｓｔｅｒｎ杂交）方法测定ＭＣ裂解液ｐ２７ 蛋白水平，［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（３Ｈ］ＴｄＲ）及［３Ｈ］亮氨酸（［３Ｈ］ｌｅｕ）掺入方法测定ＭＣ细胞的肥大情况，观察ｐ２７反义寡核苷酸（ＯＤＮ）转染对高糖培养ＭＣ肥大的影响。结果 高糖（４５０ｍｇ／ｄｌ）无血清培养的ＭＣ同正常糖（１００ ｍｇ／ｄｌ）无血清培养的 ＭＣ相比，ｐ２７水平增高，［３Ｈ］ ｌｅｕ掺入增加，［３Ｈ］ ＴｄＲ掺入减少；ｐ２７反义 ＯＤＮ转染后高糖无血清培养 ＭＣ［３Ｈ］ ｌｅｎ掺入减少，［３Ｈ］ ＴｄＲ掺入增加；用甘露醇提高正常糖培养液渗透压并不增加 ＭＣ中Ｐ２７水平。结论 高糖培养的ＭＣ中ｐ２７水平明显增高，增高的ｐ２７在高糖培养ＭＣ细胞肥大中起重要作用。

氨基胍通过降低周期素激酶抑制剂P27水平减轻高糖培养系膜细胞肥大程度

目的 :研究氨基胍 (AG)减轻高糖培养系膜细胞 (MC)肥大程度与周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :Western印迹方法测定 MC裂解液 P2 7水平 ,[3H]胸腺嘧啶核苷 ([3H]Td R)及 [3H]亮氨酸 ([3H ]L eu)掺入方法测定 MC肥大情况。 结果 :同正常糖 (10 0 mg/ dl)培养相比 ,高糖 (45 0 mg/ dl)培养 MC中 P2 7水平增高 (P<0 .0 1) ,MC肥大 ;[3H ]L eu掺入增加及[3H]Td R掺入降低 (P<0 .0 1) ;AG(0 .2 5 mm ol/ L )降低高糖培养 MC中 P2 7水平 [(2 .5± 0 .6 ) vs (4.0± 0 .8) ,P<0 .0 5 ],使MC肥大程度减轻 ;[3H]leu掺入降低 ,[(342 6± 5 32 ) vs (46 5 2± 30 9) cpm/孔 ,P<0 .0 1],[3H ]Td R掺入增加 [(12 33± 6 9)vs (5 4 3± 2 7) cpm/孔 ,P<0 .0 1]。 结论 :AG可能通过降低高糖培养 MC中 P2 7水平减轻

抗肿瘤细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的研究进展

细胞周期是细胞生命活动的基本特征。一个完整的细胞周期受多种蛋白酶的调控,调控失调会导致细胞过度增殖,从而引发肿瘤。以细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)为靶点的药物可以阻断细胞周期,控制细胞增殖,从而达到抗肿瘤的目的。现简单介绍细胞周期依赖性蛋白激酶、细胞周期蛋白、细胞周期调控机制及其与肿瘤的关系,对近年来不同结构类型的细胞周期蛋白激酶抑制剂进行综述,并初步分析其发展趋势。

细胞周期蛋白依赖性激酶及其抑制剂构效关系研究进展

细胞周期是维持细胞正常生命活动的基本特征。一个完整的细胞周期受到多种蛋白酶的调控。研究表明,几乎所有肿瘤的发生都与细胞周期调控机制紊乱所导致的细胞生长分化受阻及凋亡异常有关。细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)是细胞周期调控的核心,CDK与相应的细胞周期蛋白结合形复合物,并通过细胞周期蛋白的周期性表达和降解,推动细胞周期各时相的有序进行。因此,以CDK为靶点的药物可以阻断细胞周期,控制细胞增长,从而达到抗肿瘤的目的。本文就CDK的结构和功能,及其抑制剂的化学结构类型及构效关系进行综述。

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂与肿瘤相关性的研究进展

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂相关基因的突变和表达失调可直接或间接影响细胞的周期、增殖以及凋亡等功能,与肿瘤的发生发展密切相关。p16能够抑制CDK4/CDK6介导的Rb蛋白产物的磷酸化,其CpG岛异常甲基化参与宫颈癌的发生发展;p21作为p53的下游调节因子,与肿瘤血管的生成、淋巴转移及预后相关;p27作用机制复杂,与乳腺癌预后关系密切,并可恢复耐药乳腺癌细胞对他莫昔芬的敏感性;p57在细胞周期G1到S期的转变中至关重要,其表达程度与部分肿瘤的恶性程度相关,它还参与了肿瘤细胞的凋亡过程。了解这些基因的结构和作用机制,探究其在肿瘤发生、发展中所产生的作用,进而寻找有效治疗靶点,已成为肿瘤分子生物学关注的热点。

TSA抑制NB4细胞去乙酰化酶活性并促进细胞周期素激酶抑制剂表达

目的 研究曲古菌素A(Trichostatin A，TSA)对NB4细胞组蛋白去乙酰化酶HDAC1的作用及细胞周期依赖激酶抑制剂P21WAF1/CIP1的表达，探讨TSA抗自血病的作用机制。方法 培养人的急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4，应用TSA在不同浓度和不同时间点处理细胞，提取细胞的总蛋白和mRNA，用Western blot蛋白质印迹技术检测HDAC1和P21WAF1/CIP1蛋白表达，并用RT-PCR技术同时俭测P21WAF1/CIP1 mRNA的表达水平、结果 ①TSA明显抑制HDAC1的活性和表达，在IC90浓度时作用4h HDAC1已经降低，持续48h；在较低浓度(37.5nmol·L^-1)时就对HDAC1有明显的抑制作用，但在75～300nmol·L^-1时HDAC1降低水平未见明显区别；②TSA明显促进P21WAF1/CIP1蛋白和mRNA的表达，在8h时mRNA已增高，12h后可处到蛋白增加，在浓度大于150nmol·L^-1时呈明显时间和剂量依赖性。结论 TSA明显抑制HDAC1活性和表达，促进细胞周期依赖性激酶抑制剂P21 WAF1／CIP1蛋白和mRNA水平升高，有明显的抗白血病作用。抑制HDAcl活性和促进P21^WAF1/CIP1。增加可能是TSA抗白血病的机制之一。

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1在翼状胬肉中的表达

目的 探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p2 7kip1在翼状胬肉中的表达及其在翼状胬肉发病机制中的作用。方法 采用免疫组化法对手术切除的翼状胬肉标本和正常结膜组织进行增殖性核抗原及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p2 7kip1蛋白检测。结果 正常结膜组织中和翼状胬肉中增殖性核杭原表达分别为 0 .2 6 8± 0 .0 2 1和 0 .4 75± 0 0 4 6 (P<0 .0 5 ) ,p2 7kip1分别为 0 .4 2 3± 0 .0 31和 0 .2 4 2± 0 0 17(P <0 .0 5 )。结论 结膜中细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p2 7kip1的低表达可能与翼状胬肉的发生、发展有关。

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂

目的 系统介绍细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK)抑制剂的抗肿瘤作用。方法 对近几年国外有关CDK抑制剂的发现、构效研究及临床试验等文献进行检索和综述。结果 olomoucine,roscovitine等三取代嘌呤类化合物 ,flavopiridol及butyrolac tone三类化合物具有明显的CDK抑制活性 ,对多种人类肿瘤均有疗效 ,且不良反应小。结论 细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)