槲皮素降低肾小球周期素激酶抑制剂p27水平改善糖尿病肾病

目的 探讨槲皮素改善糖尿病肾病与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分为DM +Qu组 ( 6只 )及DM组 ( 6只 ) ,分别给予槲皮素 10 0mg·kg-1·d-1及同体积的生理盐水灌胃 8周 ;对照组 (正常大鼠 6只 )予等体积生理盐水灌胃 8周。采用蛋白印迹 (Western杂交 )方法测定肾小球裂解液 p2 7蛋白水平 ,采用ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白。结果 DM组大鼠肾小球 p2 7水平为 18.5± 4.3 ,尿白蛋白排泄为 ( 3 9.62± 3 .68) μg/ 2 4h ,肾重 /体重比例为 ( 14.87± 2 .0 2 )× 10 -3,均较其他 2组明显增加 ,ECM蛋白水平也较其他 2组明显增加。与DM组相比 ,DM +Qu组肾小球 p2 7水平 ( 10 .6± 3 .1)、ECM蛋白水平、尿白蛋白排泄 [( 17.62± 3 .0 2 ) μg/ 2 4h]及大鼠肾重 /体重比例 [( 11.3 5± 1.76)× 10 -3]均明显降低 (P <0 .0 1) ;DM +Qu组的血糖水平无明显改变。结论 槲皮素可能通过降低肾小球 p2

大黄素抑制系膜细胞增生与周期素激酶抑制剂p27的关系

目的 :探讨周期素激酶抑制剂p2 7在大黄素抑制肾系膜细胞 (mesangialcell,MC)增生中的作用。方法 :蛋白印迹 (west ern杂交 )方法测定MC裂解液p2 7蛋白水平 ,[3H]胸腺嘧啶核苷 ([3H]TdR)测定MC增生的情况 ,观察不同浓度大黄素 (50mg/L、10 0mg/L )对肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)刺激的MC中p2 7水平及增生程度的影响。结果 :TNF α (2 0万U/L)使无血清培养 2 4h的MC中p2 7水平降低 ,同时使 [3H]TdR掺入增加 ;大黄素提高TNF α刺激的MC中p2 7水平 ,同时使 [3H]TdR掺入减少。大黄素的上述作用随剂量的增大而增强。结论 :大黄素可能通过提高p2 7水平抑制TNF α诱导的MC增生。

高糖培养的系膜细胞肥大与周期素激酶抑制剂p27的关系

目的 研究周期素激酶抑制剂ｐ２７在高糖培养系膜细胞（ＭＣ）肥大中的作用。方法 蛋白印迹（ｗｅｓｔｅｒｎ杂交）方法测定ＭＣ裂解液ｐ２７ 蛋白水平，［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（３Ｈ］ＴｄＲ）及［３Ｈ］亮氨酸（［３Ｈ］ｌｅｕ）掺入方法测定ＭＣ细胞的肥大情况，观察ｐ２７反义寡核苷酸（ＯＤＮ）转染对高糖培养ＭＣ肥大的影响。结果 高糖（４５０ｍｇ／ｄｌ）无血清培养的ＭＣ同正常糖（１００ ｍｇ／ｄｌ）无血清培养的 ＭＣ相比，ｐ２７水平增高，［３Ｈ］ ｌｅｕ掺入增加，［３Ｈ］ ＴｄＲ掺入减少；ｐ２７反义 ＯＤＮ转染后高糖无血清培养 ＭＣ［３Ｈ］ ｌｅｎ掺入减少，［３Ｈ］ ＴｄＲ掺入增加；用甘露醇提高正常糖培养液渗透压并不增加 ＭＣ中Ｐ２７水平。结论 高糖培养的ＭＣ中ｐ２７水平明显增高，增高的ｐ２７在高糖培养ＭＣ细胞肥大中起重要作用。

氨基胍通过降低周期素激酶抑制剂P27水平减轻高糖培养系膜细胞肥大程度

目的 :研究氨基胍 (AG)减轻高糖培养系膜细胞 (MC)肥大程度与周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :Western印迹方法测定 MC裂解液 P2 7水平 ,[3H]胸腺嘧啶核苷 ([3H]Td R)及 [3H]亮氨酸 ([3H ]L eu)掺入方法测定 MC肥大情况。 结果 :同正常糖 (10 0 mg/ dl)培养相比 ,高糖 (45 0 mg/ dl)培养 MC中 P2 7水平增高 (P<0 .0 1) ,MC肥大 ;[3H ]L eu掺入增加及[3H]Td R掺入降低 (P<0 .0 1) ;AG(0 .2 5 mm ol/ L )降低高糖培养 MC中 P2 7水平 [(2 .5± 0 .6 ) vs (4.0± 0 .8) ,P<0 .0 5 ],使MC肥大程度减轻 ;[3H]leu掺入降低 ,[(342 6± 5 32 ) vs (46 5 2± 30 9) cpm/孔 ,P<0 .0 1],[3H ]Td R掺入增加 [(12 33± 6 9)vs (5 4 3± 2 7) cpm/孔 ,P<0 .0 1]。 结论 :AG可能通过降低高糖培养 MC中 P2 7水平减轻

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1在翼状胬肉中的表达

目的 探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p2 7kip1在翼状胬肉中的表达及其在翼状胬肉发病机制中的作用。方法 采用免疫组化法对手术切除的翼状胬肉标本和正常结膜组织进行增殖性核抗原及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p2 7kip1蛋白检测。结果 正常结膜组织中和翼状胬肉中增殖性核杭原表达分别为 0 .2 6 8± 0 .0 2 1和 0 .4 75± 0 0 4 6 (P<0 .0 5 ) ,p2 7kip1分别为 0 .4 2 3± 0 .0 31和 0 .2 4 2± 0 0 17(P <0 .0 5 )。结论 结膜中细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p2 7kip1的低表达可能与翼状胬肉的发生、发展有关。

依那普利及氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏周期素激酶抑制剂p27^(kip1)蛋白表达的影响

目的 研究应用依那普利和氯沙坦治疗后糖尿病大鼠肾脏 p2 7kip1蛋白表达的变化 ,探讨糖尿病肾病的发病机制。方法 实验大鼠分 4组 :正常对照组 (A组 )、糖尿病大鼠组 (B组 )、糖尿病大鼠应用依那普利治疗组 (C组 )和氯沙坦治疗组 (D组 )、B、C和D组腹腔一次性注射链脲佐菌素复制糖尿病模型 ,于 4周内留取血液和肾脏标本 ,应用免疫组织化学方法检测肾脏组织中p2 7kip1蛋白的表达 ,放射免疫方法检测肾脏和血浆中血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )的水平。结果 B组大鼠肾小球固有细胞 p2 7kip1水平在第 1周升高 (P <0 .0 5 ) ,至 4周时仍维持较高水平 ,肾小管细胞中 p2 7kip1表达无显著差异 ;肾重 /体重比值和肾小球面积在该组大鼠第 1周起即明显上升 ;肾脏AngⅡ水平亦呈显著性增加。依那普利和氯沙坦治疗组上述指标明显下降。结论 周期素激酶抑制剂p2 7kip1可能参与糖尿病肾病肥大的病理过程 ,它与内源性AngⅡ水平密切相关 ,提示降低 p2

周期素激酶抑制剂P27与心血管疾病

P2 7蛋白是一种细胞周期激酶抑制剂 ,通过抑制cyclin CDK复合物活性使细胞停滞于G1期。P2 7蛋白能显著抑制血管平滑肌细胞等增殖 。

周期素激酶抑制剂p27和糖尿病肾病

周期素及周期素依赖性激酶、周期素激酶抑制剂控制细胞周期的运转，从而决定细胞的增生肥大等。周期素激酶抑制剂ｐ２７ 是一种十分重要的细胞周期负调节蛋白，抑制细胞的增生。随着肾脏上皮细胞的逐渐成熟，ｐ２７ 表达明显增加，从而限制了成熟上皮细胞的增生能力；高糖培养的系膜细胞及糖尿病小鼠肾脏表达ｐ２７ 增多，提示ｐ２７ 与糖尿病肾病时肾细胞肥大有关，说明ｐ２７ 在肾脏发育过程中及糖尿病肾病时发挥重要作用。

系膜增生性肾炎大鼠肾小球周期素激酶抑制剂P27的变化及意义

目的 :探讨周期素激酶抑制剂 P2 7在系膜增生性肾炎模型 Thy1肾炎大鼠系膜细胞 (MC)增生中的作用。 方法 :利用抗胸腺细胞抗体制成 Thy1肾炎模型 ,Western印迹法测定肾小球裂解液 P2 7蛋白水平 ,RT- PCR方法测定肾小球 P2 7m RNA,EL ISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM)蛋白 (纤维连接蛋白及 型胶原 )。 结果 :Thy1肾炎第 1天 P2 7水平即有明显下降 ,第 3天 (MC增生最为明显 ) P2 7水平最低 ,第 5天 (MC增生开始消散 ) P2 7水平有所回升 ,提示 P2 7水平与MC增生程度有关 ;Thy1肾炎第 3天肾小球 P2 7m RNA与正常对照组比较无明显差别 ;而 Thy1肾炎大鼠肾小球纤维连接蛋白和 型胶原均升高 (P<0 .0 1) ,在第 3天达峰值 ,第 5天略有回降 ,但仍显著高于正常对照组 (P<0 .0 1)。结论 :P2 7水平下降可能在 Thy1肾炎 MC增生中起重要作用。

周期素激酶抑制剂P^(27)和肾脏疾病

细胞周期素及周期素激酶、周期素激酶抑制剂控制细胞周期的运转 ,从而决定细胞的增生肥大等。周期素激酶抑制剂P2 7是一种十分重要的负细胞周期调节蛋白 ,抑制细胞的增生。本文综述P2 7在生理情况下、糖尿病肾病、系膜增生性肾炎、膜性肾病。

洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏肥大及肾小球周期素激酶抑制剂P27的影响

目的 探讨洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂P2 7水平的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型并分别给予生理盐水、洛沙坦1mg·kg-1·d-1或 2mg·kg-1·d-1灌胃 8周。Western杂交方法测定肾小球裂解液P2 7蛋白水平 ,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白 ,采用图象分析系统测定肾小球面积。 结果 DM 8周大鼠肾重 /体重比例增高 ,肾小球面积增大 ,肾小球ECM蛋白水平增加 ,2 4h尿白蛋白排泄增多 ,同时肾小球P2 7水平增高。洛沙坦降低DM大鼠肾重 /体重比例、肾小球面积及肾小球ECM蛋白水平 ,减少 2 4h尿白蛋白排泄 ,降低肾小球P2 7水平。洛沙坦的上述作用随剂量的增加而增强。洛沙坦不改变DM大鼠血糖水平。 结论 洛沙坦可减轻DM大鼠肾小球肥大程度 ,此作用可能与洛沙坦降低DM大鼠肾小球P2

细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂——p27kip1研究进展

p2 7kip1是一个广谱的周期蛋白依赖激酶抑制剂 ,在细胞周期的调控中起重要的作用 ,本文综述 p2 7kip1的发现 ,p2 7kip1的功能、作用机制以及 p2

细胞周期依赖性激酶抑制剂P27、P21在人角膜上皮的表达研究

目的 探讨细胞周期依赖性激酶抑制剂 (CKI) P2 7、P2 1在角膜上皮细胞的表达情况。方法 应用 SP免疫组化法 ,检测 P2 7、P2 1等细胞周期依赖性激酶抑制剂和增殖细胞核抗原 (PCNA)在角膜上皮不同部位的表达情况。结果 角膜缘上皮区 PCNA呈阳性表达 ,主要位于基底细胞层 ,中央区角膜上皮内未见阳性表达 ,差异有显著意义 (P <0 .0 1) ;P2 7、P2 1在中央区角膜上皮内呈阳性表达 ,角膜缘上皮内未见阳性表达 ,差异均有显著意义(P <0 .0 1)。结论 细胞周期依赖性激酶抑制剂 P2 7、P2 1和 PCAN在角膜上皮不同部位的表达差异 ,提示在角膜缘上皮基底层内存在着一群有较高的增殖能力、处于 G1 期的细胞群 。

周期素激酶抑制剂p21和糖尿病肾病

肾脏肥大是糖尿病肾病(D iabetic nephropathy,DN)早期的主要表现之一,包括肾小球和肾小管的肥大,其调控最终发生在细胞周期水平上。p21是已知的具有最广泛激酶抑制活性的细胞周期负调控蛋白,与早期DN肾脏肥大密切相关,直接影响DN的发生、发展。对此深入研究为DN的防治提供新的启示。

周期素依赖性激酶抑制剂p18^(INK4C)在急性肾损伤中的表达受血红素加氧酶1调控

目的初步探讨周期素依赖性激酶抑制剂p18INK4C(p18)在急性肾损伤(AKI)中的肾保护作用机制。方法利用血红素加氧酶(HO)-1的化学诱导剂(hemin)和抑制剂(锌原卟啉,ZnPP)观察在顺铂诱导的小鼠肾脏上皮细胞(TCMK-1)损伤中HO-1与p18之间的关系。利用p18基因敲除鼠,观察p18基因缺失对于顺铂诱导的HO-1表达的影响。结果在顺铂诱导的AKI小鼠肾组织及损伤的TCMK-1细胞中,p18、HO-1的mRNA和蛋白表达均明显上调(P值均<0.05),HO-1的诱导表达峰值先于p18上调峰值。在无血清培养的TCMK-1细胞中,HO-1诱导剂hemin与细胞共同孵育后明显上调TCMK-1细胞中HO-1和p18蛋白的表达(P值均<0.05)。相反,HO-1抑制剂ZnPP与顺铂共同孵育TCMK-1后的第8和16小时,ZnPP不仅抑制了顺铂诱导的HO-1蛋白表达的上调,而且使p18的表达受到明显抑制。p18-/-与p18+/+小鼠肾组织中HO-1蛋白表达基线值的差异无统计学意义(P>0.05),顺铂注射后第3天,p18-/-与p18+/+小鼠肾组织中HO-1蛋白的诱导表达量的差异亦无统计学意义(P>0.05)。顺铂注射后第3天,p18+/+(WT)小鼠肾组织中p18蛋白表达上调,而p18-/-小鼠肾脏中p18蛋白表达缺失。结论在顺铂诱导的AKI中,HO-1调控p18的表达,p18部分介导了HO-1在AKI中的保护作用。

外源性p27^(Kip1)对兔眼滤过术后结膜瘢痕的抑制作用

目的观察外源性p27Kip1作用于兔眼滤过术后的效果,研究其对术后结膜瘢痕形成的抑制作用。方法根据GenBank人p27基因序列设计引物,制备腺病毒介导Ad-p27并验证其正确性。兔眼滤过术中结膜下注射Ad-p27、丝裂霉素C(MMC)和PBS,术后28d内测定眼压、观察眼前节的动态变化及并发症,依照Krofeld评分法进行滤过泡评分。结果 Ad-p27作用后28d内维持低眼压的状态,术后3d眼压下降达峰值7.68mmHg。Ad-p27降眼压程度与MMC相似,与PBS比较术后7d(P<0.05)、14d(P<0.01)、21d(P<0.01)和28d(P<0.05)眼压存在显著性差异。Ad-p27作用后14d内滤过泡弥漫性隆起,28d有囊性泡形成。Ad-p27组与PBS组比较,滤过泡评分在7d(P<0.01)、14d(P<0.01)和21d(P<0.05)有显著性差异。Ad-p27组术后21d前房恢复正常,而PBS组术后14d恢复正常。Ad-p27作用偶有前房渗出、前房出血等并发症。结论 Ad-p27通过抑制手术区瘢痕形成保持滤过道通畅,降低眼压。

叉头框蛋白O亚型3a和p27激酶蛋白抑制剂1在电针促进面神经再生中的作用研究

目的通过观察叉头框蛋白O亚型3a(Foxo3a)和p27激酶蛋白抑制剂1(p27 kip1)在电针治疗面神经压榨性损伤过程中的表达变化,探讨电针促进面神经再生可能的作用机制。方法将42只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为3组。正常组6只,不做任何处理;模型组18只,建立右侧面神经上颊支压榨损伤模型;电针组18只,建立右侧面神经上颊支压榨损伤模型后予穴位电针治疗。模型组、电针组均于术后4、14、28 d分别随机抽取6只大鼠取材。采用苏木素-伊红染色观察面神经元的形态变化,蛋白免疫印迹法及免疫组化法检测面神经元中Foxo3a及p27 kip1的表达,进行统计分析。结果与模型组比较,电针组面神经元在术后各时间点细胞团更聚集,边界更清晰,细胞数目、神经元突起增多。术后模型组及电针组Foxo3a、p27 kip1蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数均呈现出先下降后上升的趋势。术后4、14 d与正常组比较,模型组和电针组Foxo3a、p27 kip1蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数均低于正常组(P<0.05),且电针组低于模型组同期(P<0.05)。术后第28 d,模型组、电针组Foxo3a蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05);术后28 d,电针组p27 kip1蛋白表达低于正常组(P<0.05),p27 kip1免疫组化阳性细胞数低于模型组同期(P<0.05)。结论电针能加快面神经压榨性损伤的修复,其机制可能与促进面神经核团中Foxo3a、p27 kip1的表达量下降、缩短细胞周期有关。

CDK2、p21和p27在生长激素腺瘤中的表达及CDK2抑制剂的体外应用

目的分析细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期调节因子p21和p27在生长激素腺瘤中的表达水平,观察CDK2抑制剂环O6-己基甲基鸟嘌呤(O6)对GH3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法构建包含3例垂体和46例腺瘤标本的组织芯片,按Knosp分级将肿瘤分为侵袭组(n=15)和非侵袭组(n=31),免疫组织化学技术分析CDK2、p21和p27的蛋白水平,结合随访信息分析其与临床特性的关系。GH3细胞分为O6组(0.4μmol/L和4μmol/L)和二甲基亚砜组(DMSO),细胞增殖实验MTS法检测细胞活力;Annexin V实验检测细胞凋亡;Brdu实验检测细胞周期,Western blotting实验检测CDK2、p21和p27变化。结果腺瘤标本中CDK2、p21和p27的H-score评分分别为(104.8±28.3)分、(195±39.2)分、(158.8±32.3)分,CDK2在侵袭组表达较非侵袭组明显增高[(140±31.7)分vs.(87.8±26.7)分],p21[(152.3.1±35.2)分vs.(215.7±41.2)分]和p27[(118.1±28.4)分vs.(173.7±34.3)分]则明显降低(P<0.05)。O6处理GH3细胞后,细胞活力与DMSO组相比,不同剂量O6处理组细胞活力分别为DMSO组的(84.5±7.6)%和(76.2±7.1)%(24 h)、(75.7±7.3)%和(69.6±6.2)%(48 h)、(70.2±6.4)%和(61.3±5.5)%(72 h)。处理24 h后,O6组Annexin V阳性细胞分别为(8.86±1.78)%(P<0.05)和(19.36±4.20)%(P<0.01),而DMSO组为(3.35±0.73)%,PI阳性则分别为(3.82±0.53)%(P<0.05)、(10.14±2.65)%(P<0.01)和(1.34±0.33)%。Brdu实验显示,O6将GH3细胞阻滞在G1期,分别为(50.4±4.1)%和(59.4±4.7)%(P<0.05),DMSO组为(45.7±3.7)%。同时,蛋白印迹实验显示,O6处理后p21和p27呈现升高趋势(P<0.05)。结论CDK2、p21和p27表达与生长激素腺瘤侵袭密切相关,其抑制剂O6-己基甲基鸟嘌呤诱导GH3细胞凋亡,抑制细胞增殖。