多沙普仑对新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电的调节作用

目的观察多沙普仑对新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电(RRDA)的调节作用。方法制作主要包含延髓面神经后核内侧区(mNRF)的大鼠离体脑片标本,并保留舌下神经根的完整。将36只新生SD大鼠随机分为Ⅰ～Ⅵ组(n=6)。Ⅰ组为对照组;Ⅱ～Ⅳ组为多沙普仑组(浓度分别为2、5、10μmol/L),Ⅴ组给予丙泊酚(20μmol/L),Ⅵ组给予丙泊酚(20μmol/L)+多沙普仑(5μmol/L),观察给药后l、3、5、l0、l5、30min时舌下神经根呼吸节律性放电的变化,并分析吸气时程(TI)、呼气时程(TE)、呼吸周期(RC)、放电积分幅度(IA)的改变。结果Ⅱ组在给药前后脑片RRDA并无明显改变;Ⅲ、Ⅳ组在给药后1min开始,吸气时程明显延长,放电积分幅度增加;呼气时程于第5min时开始缩短(P<0.05),但呼吸周期仅于第10min时缩短,其余时间点无明显改变;Ⅴ组在第3min时开始出现吸气时程缩短、放电积分幅度下降,并伴有呼气时程及呼吸周期延长(P<0.05),第10min时达最大变化值;Ⅵ组RRDA各时间点均无明显改变(P>0.05)。结论5μmol/L多沙普仑可直接兴奋延髓脑片的RRDA,且可完全拮抗丙泊酚对脑片RRDA的抑制作用,此作用主要通过兴奋吸气中枢实现。

活性氧族对延髓面神经后核内侧区呼吸节律的调控作用

目的:探讨活性氧族(reactive oxygen species,ROS)在延髓面神经后核内侧区(the medial area of nucleus retrofacia-lis,mNRF)对呼吸节律调控的作用。方法:仿Suzue方法制作新生大鼠含有舌下神经根及mNRF的离体延髓脑片标本,以吸附电极记录舌下神经根呼吸节律性放电活动(respiratory rhythmic activity,RRA)作为呼吸活动的指标,采用全细胞膜片钳记录模式在mNRF同步记录呼吸神经元。分别观察特丁基氢过氧化物(t-butyl hydroperoxide,tBHP)、α-硫辛酸(-αlipoic acid,α-LA)对mNRF呼吸起步神经元及RRA的影响。结果:tBHP可显著使呼吸周期缩短、幅度增加,-αLA使呼吸周期延长、幅度降低;同时α-LA可使Cd2+非敏感性呼吸起步神经元动作电位周期显著延长,幅度降低,对Cd2+敏感性呼吸起步神经元无显著影响;voltage steps和ramps表明α-LA可抑制Cd2+非敏感性起步神经元的短暂性和持久性的钠电流。结论:ROS对RRA、Cd2+非敏感性起步神经元具有兴奋性作用,是通过调节钠电流而起作用的。

家兔面神经后核内侧区在呼吸节律起源中的作用

从腹侧面暴露家兔延髓,脑内微量注射1%普鲁卡因阻滞面神经后核内侧区(mNRF),全部动物(n=20)一次注射(0.3—1.0μl)后即能可逆地消除呼吸节律。区域对照显示此区非常局限,范围约1.0×1.0×1.0mm。组织学检查表明为面神经后核内侧区。本文分析了 mNRF的呼吸相关神经元(RRNs)的放电形式。在 mNRF 有较多的呼气(E)神经元和呼气-吸气跨时相(E-IPS)神经元。在阻滞 mNRF 引起呼吸停止期间,观察到低位延髓背侧呼吸群(DRG)和腹侧呼吸群(VRG)尾端区 RRNs 放电的节律性消失,表现连续放电或停止放电。电刺激DRG,VRG 尾端区,只能诱发短串的膈神经放电,而不能产生节律性发放。说明这些区域的RRNs 无自动节律性活动的能力。结果表明,面神经后核内侧区与呼吸节律发生有关,它可能是呼吸节律发生器的一个重要的所在部位。

新生大鼠离体延髓-脊髓标本的呼吸节律性放电及微切割延髓对其放电的影响

在新生大鼠高体延髓－脊髓标本上，用吸附电极记录膈神经根－颈4、颈5腹根（C4v、C5v）和舌下神经根（Ⅶ）节律性放电活动（Rhythmicaldischargeactivity，RDA），并观察在对延髓微切割后的RDA变化。结果（1）新生大鼠离体延髓－脊髓标本在正常灌流条件下，可存活6～8h，持续4h可稳定记录到C4v、C5v和舌下神经根的RDA，且两者完全同步，为呼吸节律性放电（RespiratoryRDA，RRDA）。（2）从头端问尾端切割延髓（每次100μm），切至闩前500μm水平时，RRDA不变，进一步切割，至闩水平，RRDA消失；从尾端问头端切割，切至舌下神经根下缘水平，RRDA不变；从延髓背侧向腹侧水平切割，切割至背→腹一半水平时，RRDA不变，进一步向腹侧切割，RRDA逐渐消失，说明从闩水平至闩前500μm的延髓腹侧半结构在呼吸节律发生中作用重要。组织学检查证实，从闩水平至闩前500μm的腹侧半结构含面神经后核内侧区（mNRF）；结果进一步提示，mNRF是呼吸节律起源的部位。

胶质细胞代谢对新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电的影响

目的探讨胶质细胞代谢在延髓基本节律性呼吸放电的作用。方法制备12只新生SD大鼠(0～3d)离体延髓脑片标本,以改良的Kreb's液(MKS)恒温灌流,稳定记录到与之相连的舌下神经的呼吸节律性放电活动(RRDA)后,第一组在灌流液中分别单独给予胶质细胞代谢激动剂L-谷氨酰胺(L-GLN)和拮抗剂L-硫酸蛋氨酸(L-MSO),第二组先后给予L-MSO和L-MSO+L-GLN,观察舌下神经根RRDA变化。结果给予L-MSO后,呼吸周期(RC)和呼气时程(TE)显著延长,吸气时程(TI)和放电积分幅度(IA)降低;给予L-GLN后RC、TE明显缩短,TI、IA无明显变化,且L-MSO的呼吸抑制作用可被L-GLN逆转。结论胶质细胞代谢在哺乳动物基本节律性呼吸的调节中起着重要的作用。

损毁面神经后核内侧区神经元胞体对呼吸节律的影响

1％ procaine阻滞和电损毁面神经后核内侧区(mNRF)可消除动物节律性呼吸。红藻氨酸(Kainicacid)化学损毁mNRF,也引起动物不可逆性呼吸停止。结果提示,阻滞和电损毁面神经后核内侧区引起的呼吸停止是由于破坏了该区的神经元胞体所致。这些被破坏的神经元和呼吸节律的起源有关。

前包钦格复合体:产生呼吸节律的关键部位

呼吸节律的产生部位和原理一直是神经生物学研究领域中的热门课题。近年来的研究表明 ,延髓中一个被称为前包钦格复合体 (pre Botzingercomplex ,PBC)的区域在哺乳动物呼吸节律的产生中起着关键作用。本文主要介绍PBC的定位 ;PBC内呼吸神经元的类型及轴突投射 ;调节PBC呼吸神经元活动的神经递质 ;

Ⅱ组代谢性谷氨酸受体参与新生鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电的调节

目的探讨Ⅱ组代谢性谷氨酸受体在延髓离体脑片基本节律性呼吸放电调节中的作用。方法以改良Kreb＇s液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠（03d）离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动（RRDA）后,第一组分别给予不同浓度Ⅱ组代谢性谷氨酸受体的特异性激动剂2R,4R-4-aminopyrrolidine-2,4-dicarboxylate（APDC）（10、20、50μmol/L）,观察各浓度舌下神经根RRDA的变化;第二组给予特异性拮抗剂（2S）-α-ethylglutamicacid（EGLU）（300μmol/L）,观察舌下神经根RRDA的变化;第三组先给予50μmol/LAPDC持续灌流10min后再给予50μmol/LAPDC＋300μmol/LEGLU灌流10min,观察各时间点舌下神经根RRDA的变化。结果单独给予APDC后,呼吸周期和呼气时程延长、吸气时程缩短、吸气放电积分幅度降低,且有浓度依赖性;单独给予EGLU后,呼吸周期及呼气时程缩短,对吸气时程和放电积分幅度没有影响,且APDC的作用可以被EGLU部分逆转。结论Ⅱ组代谢性谷氨酸受体参与了哺乳动物基本呼吸节律的调节。

甘氨酸对新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电活动的调制

目的探讨甘氨酸(Gly)在延髓基本节律性呼吸放电发生和调节中的作用。方法以改良Kreb's液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动(RRDA)后,第1、2组在灌流液中分别单独给予Gly受体的特异性激动剂Gly和特异性拮抗剂士的宁(STR);第3组分别先后给予Gly和Gly+STR,观察舌下神经根RRDA的变化,探讨Gly对其调节作用。结果给予Gly后,吸气时程和放电的积分幅度显著缩短,呼气时程和呼吸周期无明显变化;给予STR后,呼气时程和呼吸周期缩短,吸气时程和放电的积分幅度无明显变化,且Gly的作用可部分被STR逆转。结论Gly参与了哺乳动物基本呼吸节律的调节。

切割延髓、酸碱度及温度对新生大鼠离体延髓——脊髓标本呼吸节律性放电的影响

目的和方法 :在新生大鼠离体延髓———脊髓标本上 ,用吸附电极记录膈神经根 颈4 、颈5腹根 (C4v,C5v)和舌下神经根 (Ⅻ )节律性放电活动 (rhythmicaldischargeactivity ,RDA) ,并观察其在对延髓微切割、改变灌流液 pH值及温度后RDA的变化。结果 :①新生鼠离体延髓一脊髓标本在正常灌流条件下 ,可存活 6～ 8h ,持续 4h可稳定记录到C4v、C5v和Ⅻ的RDA ,且两者完全同步 ,为呼吸节律性放电 (respiratoryRDA ,RRDA) ;②从延髓头端向尾端切割 (每次 10 0 μm) ,切至闩前 5 0 0 μm水平时 ,RRDA不变 ,进一步切割 ,至闩水平 ,RRDA消失 ;③从尾端向头端切割 ,切至舌下神经根下缘水平 ,RRDA不变 ,进一步向头端切割 ,RRDA逐渐消失 ;④从延髓背侧向腹侧水平切割 ,切割至背→腹一半水平时 ,RRDA不变 ,进一步向腹侧切割 ,RRDA逐渐消失 ;⑤灌流液的 pH值从 7.35降至 6 .85 ,RRDA逐渐增强 ,而从 6 .85降至 4.5时 ,逐渐减弱至消失。pH值从 7.45上升到 7.85 ,呼吸频率逐渐减漫 ,放电幅度增强 ;⑥温度由 2 7℃上升到 37℃ ,RRDA逐渐增强 ;由 38℃上升到 41℃ ,RRDA逐渐减弱 ;温度由 2 7℃降 2 3℃ ,RRDA逐渐减弱。温度为 42℃或 2 2℃时 ,RRDA消失。结论 :面神经后核内侧区可能是呼吸节律起源的部位 。

哺乳类呼吸节律产生部位的研究进展

一、前言 呼吸运动是一种节律性的活动,起始并受控于呼吸中枢。许多研究业已表明,哺乳类自主呼吸节律产生于延髓,但延髓中产生呼吸节律的确切部位至今仍未彻底解决。本文就延髓中呼吸节律起源部位的研究历史、现状及发展趋势作一简要介绍。 二。

刺激家兔舌下神经核中段腹侧区对呼吸节律的影响

本工作在２５只氨基甲酸乙酯麻醉、断双侧迷走神经的家兔上，以膈肌肌电活动作为检测指标，观察了电及化学刺激舌下神经核中段腹侧区（ＶＭＮＨ）对呼吸节律的影响。结果如下：长串电脉冲刺激ＶＭＮＨ时，膈肌肌电活动被完全抑制，而颏舌肌活动明显易化；在吸气相的中期或后期短串电脉冲刺激ＶＭＮＨ可使吸气切断；微量注射谷氨酸钠于此区，膈肌活动也受到抑制。上述观察表明ＶＭＮＨ对呼吸节律具有调制作用，这种调制作用可能参与吞咽反射的中枢环节。

阻滞面神经后核内侧区对呼吸节律的影响

实验在麻醉和切断双侧颈迷走神经的家兔上进行。以1％普鲁卡因对称地阻滞延髓闩前2.0—3.0mm、中线旁开2.2—2.5mm、背侧表面下3.5—4.5mm的区域能可逆地消除呼吸运动和膈神经节律性放电。对称地损毁该区则产生不可逆的呼吸停止。组织学检查证实,此区相当于Meessen图谱的面神经后核内侧区(mN-RF),包括面神经后核(N.rVII)内侧部、网状小细胞核(R.pc)腹侧部、网状巨细胞核(R.gc)的外侧部、外侧网状核(R.1)的内侧部。阻滞延髓的其他区域,除腹侧群呼吸神经元(VRG)的头端部分(该部分与mNRF有重叠)外,对呼吸节律无明显影响。在阻滞mNRF引起呼吸停止期间.延髓背侧群(DRG)与腹侧群尾端的呼吸性神经元放电的节律性消失,刺激DRG与VRG尾端区域,只能诱发短串的膈神经放电,而不能产生节律性的发放,说明该部呼吸性神经元本身无自动节律活动能力。结果提示面神经后核内侧区在发生和维持基本呼吸节律中起重要作用。

延髓嘴端包氏复合体与中枢呼吸节律形成

包氏复合体是一群位于延髓嘴端面神经后核腹内侧的呼气神经元。该群神经元为抑制性 ,轴突广泛投射到脑干呼吸相关结构及膈神经运动神经元群。本研究室运用微电刺激、逆行兴奋、WGA HRP标记、微量注射等技术研究了该结构在呼吸时相转换及呼吸节律形成中的作用。结果显示 :包氏复合体与脑干呼吸神经元群之间存在双向纤维联系 ,该结构参与吸气向呼气以及呼气向吸气的时相转换 ,且在呼气相形成中起重要作用。

延髓腹外侧 Botzinger 复合体在呼吸节律发起及调节中作用研究

系统研究了Ｂｏｔｚｉｎｇｅｒ复合体（Ｂｏｔ．Ｃ）在呼吸节律调控中的作用。发现：（１）微电刺激Ｂｏｔ．Ｃ导致双相吸气抑制，潜伏期分析表明分别由单突触和多突触联系中介。（２）脊髓膈神经核局部微量注射ＧＡＢＡ受体阻断剂印防己毒素可以部分阻断Ｂｏｔ．Ｃ吸气抑制作用，提示ＧＡＢＡ参与中介Ｂｏｔ．Ｃ的吸气抑制作用。（３）双侧Ｂｏｔ．Ｃ微量注射ＧＡＢＡ导致呼吸节律消失，膈神经呈低幅度紧张放电，表明Ｂｏｔ．Ｃ在呼气相形成中起关键性作用。（４）ＨＲＰ逆行标记及逆行兴奋研究证明，Ｂｏｔ．Ｃ广泛接受脑干呼吸相关结构传入投射。结果表明Ｂｏｔ．Ｃ参与吸气时程和幅度的控制并在呼气相形成中起关键作用。

面神经核对呼吸节律的影响

实验选用健康成年SD大鼠,观察大鼠面神经核内的非运动神经元的放电样式以及电刺激面神经核对呼吸节律的影响,以探讨面神经核是否参与呼吸调节.在面运动神经元逆行溃变的面神经核内可记录到呼吸相关神经元(RRNs),单脉冲刺激面神经核可引起膈肌肌电的瞬时抑制,在吸气早、中期短串刺激面神经核可延长吸气时程,吸气后期刺激引起吸气终止,呼气相刺激可延长呼气时程,连续刺激面神经核可抑制吸气.

8-OH-DPAT对新生鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电的影响

目的探讨激活5-HT1A受体对延髓基本节律性呼吸放电的影响。方法制备20只新生SD大鼠(0～3d)离体延髓脑片标本,以改良的Kreb's液恒温灌流,稳定记录到与之相连的舌下神经的呼吸节律性放电活动(RRDA)后,随机分成Ⅰ～Ⅳ组(每组n=5)。Ⅰ～Ⅳ组给予5-HT1A受体的特异性激动剂(+/-)-8-hydroxy-2-(di-N-propylamino)tetralin hydrobromide(8-OH-DPAT),浓度分别为1、5、10、20μmol/L持续灌流10min,观察给药后1、3、5min时舌下神经的呼吸节律性放电活动的变化。结果给药前后不同时间点之间呼吸周期(RC)有显著性差异(F=181.219,P<0.001),各浓度在给药前RC最小,给药后逐渐延长,5min时达到最大。各浓度之间有显著性差异(P<0.001),给药后各时间点1μmol/L的RC最小,给药浓度增大,RC延长,20μmol/L时RC最大。给药前后和不同浓度之间存在交互效应(P<0.001)。给药前后不同时间点之间积分幅度(IA)有显著性差异(P<0.001),在10μmol/L和20μmol/L浓度组中给药前后不同时间点之间有显著性差异(P=0.017和0.001)。各浓度之间有显著性差异(P<0.001),给药后各时间点1μmol/L的IA最大,给药浓度增大IA减小,20μmol/L的IA最小。给药前后和不同浓度之间存在交互效应(P=0.002)。结论(1)8-OH-DPAT长效抑制吸气活动,对新生大鼠离体延髓脑片标本呼吸周期具有剂量依赖性延长作用,对频率和积分幅度具有剂量依赖性抑制作用。(2)5-HT1A受体参与了哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节。

5-HT_(1A)受体对新生大鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电的调制

本研究探讨5-HT1A受体在延髓基本节律性呼吸放电发生和调节中的作用。以改良Kreb’s液恒温灌流新生Sprague-Dawley大鼠离体延髓脑片标本,稳定记录与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动(respiratory rhythmical discharge activity,RRDA)后,第一组在灌流液中分别单独给予5-HT1A受体的特异性激动剂8-羟四氢萘[(+/-)-8-hydroxy-2-(di-N-propylamino)tetralin hydrobromide,8-OHDPAT]和特异性拮抗剂多次甲基多苯基多异氰酸酯[4-iodo-N-[2-[4-methoxyphenyl]-1-piperazinyl]ethyl]-N-2-pyridynyl-benzamide hydrochloride,PMPPI];第二组分别先后给予8-OHDPAT和8-OHDPAT+PMPPI,观察舌下神经根RRDA的变化,探讨5-HT1A受体对其调节作用。结果显示,给予8-OHDPAT后,呼吸周期(respiratory cycle,RC)和呼气时程(expiratory time,TE)显著延长,放电的积分幅度(integral amplitude,IA)持续降低,吸气时程(inspiratory time,TI)无明显变化;给予PMPPI后RC、TI和TE明显缩短,舌下神经根IA无明显变化,且8-OHDPAT的作用可部分被PMPPI逆转。结果提示,5-HT1A受体参与了哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节。

NMDA与非NMDA受体激动剂对新生大鼠延髓脑片呼吸节律性放电的作用

目的 :探讨N 甲基 D 天门冬氨酸 (NMDA)和非NMDA类受体在基本呼吸节律发生和调节中的可能作用。方法 :以改良的Kreb’s液灌流新生SD大鼠离体延髓脑片 ,记录与之相连的舌下神经的呼吸节律性放电活动 (respi ratoryrhythmicaldischargeactivity ,RRDA) ,在灌流中给予兴奋性氨基酸类递质及相应的拮抗剂 ,观察其对RRDA的影响。结果 :使用非NMDA受体激动剂海人酸 (KA)后 ,可见呼吸周期及呼气时间有所延长 ,NMDA受体激动剂NMDA对呼吸活动则没有明显影响 ;相应的拮抗剂 6 氰基 7 硝基喹恶啉土卫四 (DNQX)和 2 氨基磷酸戊酸 (AP5 )均可使放电频率和积分幅值明显降低 ,吸气时间显著缩短 ,但DNQX同时可致呼吸周期和呼气时间明显缩短。结论 :在哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节中 ,NMDA类受体主要对呼吸活动的强度产生调节作用 ;而非NMDA类受体不仅可以影响呼吸的强度 。

A68930对新生鼠离体延髓脑片呼吸节律性放电的影响

目的探讨激活多巴胺D1受体对延髓脑片基本节律性呼吸放电的影响。方法用SPF级新生SD大鼠(0～3d)制备离体延髓脑片标本,随机分成Ⅰ～Ⅳ组(每组n=5),以改良的Kreb's液恒温灌流,稳定记录到与之相连的舌下神经根的呼吸节律性放电活动(RRDA)。Ⅰ组为对照组,只用Kreb's液灌注;Ⅱ～Ⅳ为实验组,分别给予1、2、5μmol/L的多巴胺D1受体特异性激动剂cis-(±)-1-(aminomethyl)-3,4-dihydro-3-phenyl-1H-2-benzopyran-5,6-diolhydrochlo-ride(A68930)持续灌流10min;观察各组改灌前以及改灌后1、3、5min时舌下神经的呼吸节律性放电活动的变化。结果(1)给药后RRDA的呼吸周期(RC)和呼气时间(TE)随时间延长逐渐缩短,放电积分幅度(IA)逐渐增大,5min时RC、TE和IA的变化最明显;在2、5μmol/L组与用药前比较三项指标有统计学差异(2μmol/L组1min时的IA与用药前相比较没有统计学差异);(2)随用药浓度增大RC、TE逐渐减小,而IA逐渐增大,5μmol/L时RC、TE、IA变化最明显;用2、5μmol/L的A68930灌流后,三项指标与对照组比较有统计学差异。结论多巴胺D1受体参与节律性呼吸的调节;多巴胺D1受体可能主要是通过缩短呼气时程增加呼吸的频率,通过增强吸气放电幅度来参与呼吸运动强度的调节。