针药并用治疗儿童过敏性鼻炎-哮喘综合征的疗效观察及对FeNO、FEV_(1)%、PEF的影响

目的观察针药并用治疗儿童过敏性鼻炎-哮喘综合征(combined allergic rhinitis and asthma syndrome,CARAS)的临床疗效及对呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)、1秒率[第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in the first second,FEV_(1))/用力肺活量(forced vital capacity,FVC)]、呼气峰流速(peak expiratory flow,PEF)的影响。方法将90例CARAS患者随机分3组,每组30例。对照1组采用沙美特罗替卡松气雾剂联合孟鲁司特钠治疗,对照2组采用针刺治疗,治疗组采用针刺联合沙美特罗替卡松气雾剂及孟鲁司特钠治疗。观察3组治疗前后中医证候积分、FeNO、FEV_(1)/FVC和PEF的变化,并比较3组临床疗效。结果治疗组临床疗效明显优于对照1组和对照2组(P<0.05)。治疗后,3组中医证候积分低于治疗前(P<0.05),治疗组中医证候积分治疗前后差值明显高于对照1组和对照2组(P<0.05);3组FeNO水平均降低(P<0.05),且治疗组低于对照1组和对照2组(P<0.05);3组FEV_(1)%及PEF水平均升高(P<0.05),且治疗组高于对照1组和对照2组(P<0.05)。结论针药并用可有效改善CARAS患者的气道炎症与肺功能,缓解症状与体征,临床疗效良好。

呼吸道变应性炎性反应小鼠模型的建立

目的探讨建立呼吸道变应性炎性反应小鼠模型的方法。方法采用卵清白蛋白（ovalbumin，OVA）作为变应原，对模型组（5只）BALB／c小鼠腹腔注射OVA与免疫佐剂（氢氧化铝）致敏，空气雾化吸入联合鼻腔滴注OVA试剂激发的方法构建模型。另设对照组（5只），用磷酸盐缓冲液（PBS）替代OVA进行致敏和激发。末次激发后对小鼠鼻部症状进行评分，评估小鼠鼻黏膜嗜酸粒细胞浸润、肺组织支气管周围炎性反应细胞浸润和支气管上皮杯状细胞增生等病理学改变情况，检测小鼠血浆OVA特异性IgE抗体浓度，检测小鼠肺泡灌洗液中自细胞介素（interleukin，IL）4和IL-5细胞因子水平。结果模型组小鼠能够成功模拟出打喷嚏、鼻痒挠鼻等症状，并且成功诱导出鼻中隔黏膜下嗜酸粒细胞及其他炎性反应细胞的浸润，肺部小支气管和小血管周围炎性反应细胞的浸润，以及支气管上皮杯状细胞的增生等病理生理学改变。模型组、对照组小鼠血浆OVA特异性IgE抗体质量浓度分别为（1237．00±153．20）、（191．904-43．20）og／ml；模型组、对照组小鼠肺泡灌洗液中IL-4分别为（46．50±10．15）、（7．96±1．80）pg／ml，IL-5分别为（50．81±11．41）、（7．53±2．23）pg／ml，两组差异均有统计学意义（t值分别为6．569、3．738、3．724，P值均〈0．05）。结论采用OVA致敏和激发的造模方案，建立一种同时了解上下呼吸道的变应性炎性反应的小鼠模型，为研究发病机制和药效评估提供了一种可行的研究方法。

MicroRNA在过敏性疾病中的研究进展

MicroRNA(miRNA)是一类长度约为19～25个核苷酸的内源性小分子单链RNA。成熟的miRNA分子结合RNA诱导沉默复合体后通过识别并诱导靶位mRNA降解或mRNA抑制作用,在转录水平及转录后水平上发挥其生物调节功能。作为近年才发现的基因调节家族,miRNA已在许多疾病的研究有所发现。在过敏性疾病中,miRNA的研究也取得了许多成果,本文试从miRNA的角度对过敏性疾病的遗传学研究做一综述。

过敏性哮喘诱导痰中高迁移率族蛋白B1、晚期糖基化终产物受体表达与血清总免疫球蛋白E水平的相关性

目的检测过敏性哮喘病儿诱导痰中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达及血清中免疫球蛋白E(IgE)水平,并探讨过敏性哮喘病儿诱导痰中HMGB1、RAGE表达与血清总IgE水平的相关性。方法选取2015年4月至2018年9月因过敏性哮喘于聊城市第二人民医院免疫专科门诊及病房接受治疗的148例病儿(哮喘组);同期选取136例健康体检儿童作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组诱导痰中HMGB1、RAGE表达及血清总IgE水平;检测两组肺功能指标、粒细胞水平;分析哮喘组HMGB1、RAGE、IgE与肺功能指标、粒细胞水平相关性;分析哮喘组诱导痰中HMGB1、RAGE表达与血清总IgE水平相关性;分析影响过敏性哮喘的因素。结果哮喘组诱导痰中HMGB1(273.23±86.39)ng/L、RAGE表达(469.54±121.35)ng/L、血清总IgE水平(557.73±156.87)IU/mL、中性粒细胞(33.46±8.73)%、嗜酸粒细胞(7.48±2.64)%均显著高于对照组[(164.83±49.36)ng/L、(309.43±93.68)ng/L、(271.70±89.43)IU/mL、(25.47±6.14)%、(3.46±1.05)%](P<0.05),第一秒用力呼气量(FEV1)(63.19±8.27)%、用力肺活量(FVC)(65.42±6.93)%、最大呼气峰流速(PEF)(63.54±8.42)%水平均显著低于对照组[(89.38±13.21)%、(94.86±13.47)%、(103.24±14.17)%](P<0.05);过敏性哮喘病儿HMGB1、RAGE、IgE与FEV1、FVC、PEF水平均呈现负相关,与中性粒细胞、嗜酸粒细胞水平均呈现正相关(P<0.05);过敏性哮喘病儿诱导痰中HMGB1、RAGE表达与血清总IgE水平均呈现正相关(r=0.454、0.522,均P<0.05);HMGB1、RAGE、IgE、嗜酸性粒细胞是影响过敏性哮喘发生的危险因素。结论过敏性哮喘病儿诱导痰中HMGB1、RAGE表达与血清总IgE水平均呈现正相关,三者与过敏性哮喘病情密切相关。HMGB1、RAGE、IgE结合肺功能指标、粒细胞水平对评价过敏性哮喘的早期危险性有重要意义。

祛风抗敏止咳汤治疗儿童咳嗽变异性哮喘36例

咳嗽变异性哮喘是支气管哮喘的一种特殊类型。近几年,儿童咳嗽变异性哮喘发病率逐渐升高,该病临床表现不典型,多无哮喘发作,以晨起或夜间阵发性痉挛性干咳为主症,因此是儿科误诊率较高的疾病。儿童咳嗽变异性哮喘病程较长,抗生素治疗效果不显著,且严重影响患儿的生长发育和学习,给家庭带来一定的经济负担。

变应性气道反应与抗生素诱导的肠道菌群失调关系研究

目的建立抗生素所致肠道菌群失调小鼠模型,在此模型上用烟曲霉菌变应原滴鼻激发,探讨变应性气道反应和肠道菌群失调的关系。方法 60只雌性 BALB/c 小鼠分为6组,每组10只。①抗生素1组:口服头孢哌酮7 d,第7天给予50μl白色念珠菌1次;②对照1组:1～7 d 给予等量生理盐水代替头孢哌酮和白色念珠菌(①和②组于第8天断颈后取盲肠内容物做细菌和真菌培养计数);③抗生素加激发组:前7天处理同抗生素1组,9、16 d 经鼻给予烟曲霉菌变应原50μl;④抗生素2组:前7天处理同抗生素1组,9、16 d 经鼻给予50μl生理盐水;⑤激发组:前7天处理同对照1组,9、16 d 经鼻给予烟曲霉菌变应原50μl;⑥对照2组:前7天处理同对照1组,9、16 d 经鼻给予50μl生理盐水(③～⑥组于第19天检测肺部气道变应性)。结果①抗生素1组小鼠肠道内肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌减少,白色念珠菌增加,伴体重减少,粪便含水量增加,表明肠道菌群失调。②抗生素加激发组和激发组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞增加,尤以抗生素加激发组小鼠更为明显。③抗生素加激发组的 BALF 中 IL-4(45.35±2.36)pg/ml 较对照2组(35.32±2.53)pg/ml 增加,GATA-3转录因子 mRNA 表达水平(0.569±0.023)比对照2组(0.410±0.020)高,T-bet/GATA-3比值(0.578±0.021)较对照2组(0.804±0.035)降低。结论抗生素致肠道菌群失调小鼠经过烟曲霉菌变应原气道激发,可致 Th2优势反应的气道变应性,提示抗生素致肠道菌群失调是诱发哮喘等变应性疾病发生的危险因素。

吸烟和哮喘

吸烟严重危害人类健康,吸烟相关的气道损伤与呼吸系统慢性炎症密切相关。哮喘是一种异质性疾病,其核心特征是气道炎症。烟草暴露是哮喘发病的危险因素。本文从吸烟对哮喘气道炎症、气道高反应性、气道重塑,以及吸入型糖皮质激素治疗等方面影响的角度,探讨吸烟与哮喘的关系。

母代产前环境暴露对子代呼吸道变应性疾病的影响

变应性鼻炎（AR）、哮喘等呼吸道变应性疾病是儿童的好发疾病,其发病率呈上升趋势。1996-2003年,全球37个国家的66个地区中,有44个地区6~7岁儿童AR发病率明显上升;2009年武汉地区3~6岁儿童AR患病率达10.8%。

小鼠气道高敏感反应模型的建立及检测

目的:制作小鼠气道高敏感反应模型,以气道高敏的特异性病理生理改变为指标对其进行间接检测。方法:以卵清蛋白为变应原小鼠腹腔注射致敏,再经气道给予相同变应原诱导激发气道高敏感反应。检测免疫学、组织学、病理学等指标。结果:气道高感组血清卵清蛋白特异性IgE水平明显升高;支气管黏膜下及肺泡间隔嗜酸性粒细胞大量浸润。支气管内径缩小,部分呈菊花样改变;平滑肌层增厚;杯状细胞增生。结论:各项改变均符合气道高敏感反应病理生理特点,可间接证实气道高敏感反应发生。

异丙酚对哮喘小鼠气道高反应性和气道炎症的调节作用

目的评价腹腔注射不同剂量异丙酚对哮喘小鼠气道高反应性、肺部炎症以及Th1／Th2平衡的调节作用。方法健康雌性BALB／c小鼠100只，6～8周龄，体重18～20g，采用随机数字表法，将小鼠分为5组（n=20）：对照组（C组）、哮喘组（A组）、低剂量异丙酚组（50mg／kgi．P．，LP组）、中等剂量异丙酚组（100mg／kgi．p．，MP组）和高剂量异丙酚组（150mg／kgi．P．，HP组）。使用卵清蛋白（OVA）构建过敏性哮喘模型小鼠，腹腔注射＋诱导过敏性哮喘模型。各组随机取10只于模型构建成功后24h即高剂量麻醉处死，行心脏取血及支气管肺泡灌洗，以ELISA法检测血清OVA特异性IgE和支气管肺泡灌洗液中特征性细胞因子IL-4、IL-5、IFN-γ浓度，并行细胞计数／分类计数。各组剩余的10只于模型构建成功后24h行肺功能检测和取肺进行HE染色，比较各组小鼠气道反应性和肺组织的病理组织学评分。结果腹腔注射异丙酚（LP组和MP组）可明显地抑制哮喘小鼠的气道高反应性。不同剂量异丙酚干预组（LP组、MP组和HP组）均可明显抑制哮喘小鼠肺组织中嗜酸性粒细胞浸润，降低IL-4、IL-5和血清OVA特异性IgE水平，上调IFN-γ／IL-4比值。结论异丙酚能够有效抑制哮喘小鼠肺部炎症，上调Th1／Th2比值，改善肺功能，发挥气道保护作用。

环境污染物与呼吸道过敏性疾病

近半个世纪,过敏性疾病的发病率逐年增长.已经成为全球性疾病。研究认为环境污染物与过敏性疾病的发生发展有着密切的关系,特别是过敏性鼻炎和哮喘,本文对近年关于室内外环境污染物造成呼吸道过敏反应的流行病学和发病机制研究进行综述.

北京、重庆、广州三城市中心城区0～14岁儿童过敏性疾病问卷调查

目的描述并分析北京、重庆、广州三城市儿童哮喘、过敏性鼻炎及湿疹等过敏性疾病的流行状况。方法2008年10月-2009年3月，采用多阶抽样的方法，从北京、重庆、广州的中心城区分别抽取0～14岁儿童10372名、9874名及4072名，通过儿童哮喘问卷对儿童哮喘、过敏性鼻炎及湿疹既往患病情况进行调查。结果北京、重庆、广州三城市既往哮喘的报告率分别为3．15％、7．45％、2．09％，既往过敏性鼻炎的报告率分别为14．46％、20．42％、7．83％，既往湿疹的报告率分别为20．64％、10．02％、7．22％；三城市哮喘及过敏性鼻炎报告率均为男性高于女性，而湿疹报告率则无性别差异；哮喘及过敏性鼻炎1岁以下及10岁以上报告率均较低，湿疹报告率则随年龄增加呈逐渐下降趋势。结论北京、重庆、广州三城市儿童哮喘、过敏性鼻炎及湿疹等过敏性疾病患病水平逐渐升高，_二城市中重庆儿童过敏性疾病患病水平最高。

婴儿期食物过敏的预后研究

目的了解婴儿期食物过敏(FA)的预后及影响因素。方法对119例患儿进行回顾性研究,采用Kaplan-Meier法计算食物耐受的累积概率,非条件Logistic回归模型分析食物耐受形成的预测因素和其他过敏性疾病发生的影响因素。结果鸡蛋、牛奶耐受的累计概率在诊断后1年分别为31%、42%;2年为62%、63%;3年为80%、77%;4年后均可达100%。牛奶、鸡蛋过敏患儿的皮肤点刺试验阳性强度是持续牛奶、鸡蛋敏感的预测因素(OR=2.535,95%CI:1.159~5.543;OR=2.654,95%CI:1.302~5.410,P均<0.05)。本组13例患儿发生其他FA,危险因素是持续鸡蛋敏感(OR=6.109,95%CI:1.818~20.527,P<0.05);4例发生变态反应性鼻炎,15例发生支气管哮喘,危险因素是持续鸡蛋敏感和呼吸道过敏症状(OR=3.596,95%CI:1.429~9.045;OR=4.235,95%CI:1.152~15.563,P均<0.05)。结论至少75%的鸡蛋或牛奶过敏患儿在诊断后3年内可获耐受。10.9%、12.6%和3.4%的FA儿童发生其他FA、支气管哮喘和变态反应性鼻炎。加强持续FA高危儿的筛查和管理,可能有助于改善FA的预后。

双重氧化酶1引起变应性疾病发生机制的初步研究

目的 探讨双重氧化酶-1 （dual oxidase-1,DUOX-1）在人气道上皮细胞（human bronchial epithelial cell）中导致气道高反应性的机制.方法 选择正常培养的人气道上皮细胞分为健康对照组、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）刺激组、甲基-β-环糊精（methyl-β-cyclodextrin,M-β-CD）＋ TNF-α处理组、地昔帕明（desipramine,DES）＋TNF-α处理组、二亚苯基碘（diphenylene iodonium,DPI）＋TNF-α组、夹竹桃麻素（apocynin,APO）＋TNF-α组.利用TNF-α作为刺激因素,采用蔗糖梯度离心的方法提取脂筏并应用免疫蛋白印记方法分析各组细胞膜上DUOX-1的含量；利用激光共聚焦显微镜观察细胞膜上DUOX-1的表达,同时观察其与脂筏标记蛋白霍乱毒素B亚单位（cholera toxin B subunit,CTXB）和神经酰胺（ceramide）的共定位现象；用活性氧试剂盒检测细胞内活性氧的生成.采用Sigmastat 3.02软件进行统计学处理.结果 ①活性氧的生成,对照组：l.00±0.00;TNF-α组：1.95±0.16;M-β-CD＋TNF-α组：0.91±0.16; DES＋ TNF-0组：1.49 ±0.20;DPI＋TNF-α组：1.03±0.16；APO＋ TNF-α组：1.47±0.26；六组差异有统计学意义（F=3.83,P＜0.05）.②DUOX-1蛋白的含量,对照组：0.21 ±0.02;TNF-α组：0.49±0.04;M-β-CD＋TNF-α组：0.08±0.02；DES＋TNF-α组：0.09±0.03；差异有统计学意义（F=3.96,P＜0.05）.③DUOX-1蛋白荧光值,对照组：1.72±0.21；TNF-α组：8.11±1.23；M-β-CD＋ TNF-α组：1.51±0.32,DES＋TNF-α组：1.43±0.11；差异有统计学意义（F =4.87,P＜0.05）.④DUOX-1蛋白基因检测,对照组：1.00±0.00；小胞浆RNA（small cytosol RNA,ScrRNA）＋TNF-α组：1.75±0.04;DUOX-1ScrRNA＋TNF-α组：1.15±0.02;差异有统计学意义（F=4.19,P＜0.05）.结论 TNF-α可以引起气道上皮细胞内DUOX-1在脂筏中的含量增加,并导致该酶的激活,从而致气道上皮细胞活性氧产生增加,引起气道高反应性,可能导致变应性疾病的发生；酸性鞘磷脂酶抑制剂DES可以抑制上述过程,说明这一过程可能依赖于脂筏来源的神经酰胺.

支气管哮喘持续状态下豚鼠气道感觉神经生长相关蛋白43的表达

目的研究支气管哮喘(简称哮喘)过敏性刺激诱发气道感觉神经敏化机制。方法成年雄性豚鼠39只,按随机数字表法分为生理盐水致敏/激发对照组(A组,9只)、卵白蛋白(OVA)致敏/生理盐水激发对照组(B组,9只)、OVA致敏/激发实验组(C组,21只)。A组以生理盐水(0.5ml/只)致敏,B、C组以10%OVA(0.5ml/只)致敏,第10天开始雾化吸入生理盐水(A、B组)或1%OVA(C组)进行激发,每天1次,每次30min,根据实验需要又将C组21只豚鼠分为激发1d组(C1组,6只)、连续激发3d组(C2组,6只)、连续激发5d组(C3组,9只)。利用免疫荧光双标技术结合激光共聚焦扫描显微观察与Westernblot技术,研究生长相关蛋白43(GAP43)在气道神经以及结状神经节、颈静脉神经节内分布与水平及与P物质(SP)和胶质源神经生长因子(GDNF)受体c RET表达神经元关系。结果免疫荧光结果显示,C3组豚鼠气道内GAP43免疫反应阳性神经呈网状分布于大、中支气管内,以黏膜下层为主,部分GAP43阳性神经纤维向黏膜层内延伸;在结状神经节和颈静脉神经节内有大量GAP43免疫阳性神经胞体,在结状神经节内主要与SP免疫阳性胞体共存,在颈静脉神经节内主要与c RET免疫阳性胞体共存。Westernblot结果显示,A、B、C1、C2、C3组GAP43蛋白表达水平吸光度(A)值分别为0.38±0.04、0.41±0.03、0.49±0.05、0.79±0.08、0.76±0.04。C1、C2、C3组分别与A、B组比较差异均有统计学意义(P均0.05);C2组GAP43蛋白表达与C1组比较差异有统计学意义(P<0.01),但与C3组GAP43蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论哮喘过敏性刺激能诱发气道感觉神经———SP肽能神经、GDNF敏感性神经纤维与胞体表达GAP43蛋白。