外源性IP-10对流感病毒及呼吸道合胞病毒感染小鼠肺病理学影响

目的研究γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)对感染流感病毒或呼吸道合胞病毒(RSV)小鼠的肺部病理学变化的影响。方法对单纯感染流感病毒或RSV以及注射重组小鼠IP-10后再感染流感病毒或RSV小鼠的肺病理学变化进行比较,同时设正常对照组和仅注射IP-10对照组。结果注射IP-10后,感染流感病毒或RSV组小鼠出现严重肺部炎症,而单纯感染病毒组小鼠虽然也呈间质性肺炎表现,但病变程度远较前2组轻,差异具有高度显著性(t值分别为-12.56、-5.60,均P<0.01)。注射IP-10后,感染流感病毒组小鼠肺炎重于RSV感染组,两组间质性肺炎病理评分比较,差异具有高度显著性(t=7.73,P<0.01)。结论 IP-10对病毒所致小鼠肺部炎性病变,特别是对流感病毒性肺炎严重程度具有重要影响。

抗呼吸道合胞体病毒感染用药现况、研发进展和市场趋势

1呼吸道合胞体病毒感染 尽管随着预防性抗体的开发和获准上市，呼吸道合胞体病毒（RSV）相关死亡率已明显下降，但此病毒感染至今仍是婴儿因病毒性疾病死亡的首要原因。RSV也会在中、老年人群中引起细支气管炎、肺炎及使慢性阻塞性肺病恶化，进而显著提高住院率和死亡率。

呼吸道合胞体病毒感染的免疫治疗和免疫预防

呼吸道合胞体病毒感染一直是婴、幼儿肺病的主要原因和老年人、免疫缺陷患者重型肺炎的机会性病因。最近来自于实验性动物和人的研究报告表明呼吸道合胞体病毒性肺炎可以采取中和性抗体治疗,目前正在扩大有关的临床试验。

呼吸道合胞病毒感染相关受体的研究进展

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是导致儿童和老年人下呼吸道感染的常见病原体之一。目前还没有疫苗可预防RSV感染,预防性和治疗性的RSV特异性抗体,由于其昂贵的价格和不确定的临床价值,主要在高危人群中使用。受体是病毒感染细胞一个决定性因素,它参与了病毒的入胞、致病等过程。因此,识别与RSV相互作用的受体,并研究其在RSV感染过程中的作用,对于深入了解RSV的致病过程并寻找治疗靶点有着非常重要的意义。笔者主要对已知的RSV感染所需受体及其致病机制进行综述,为未来RSV致病机制研究及潜在药物靶点和疫苗开发提供相关的信息。

1978～1996年广州地区呼吸道合胞病毒感染分析

为了解广州地区儿童呼吸道合胞病毒（RSV）感染的情况，采用病毒分离等方法，对广州地区1978～1996年连续18年的儿童支气管炎和支气管肺炎进行了RSV病原学检测。共检测患儿5273例，分离出RSV的患儿513例。病毒分离总阳性年9．7％。18年中以1985年、1986年和1992年RSV分离车最高；一年中RSV分离车从3月份开始增高，4月份达高峰，持续至5～8月，9月份开始下降。结论：18年来广州地区有过3次RSV感染流行高峰（1985年、1986年、1992年）；广州地区RSV感染的流行季节主要发生在每年的春夏季。

小儿呼吸道合胞病毒感染性肺炎防治进展

呼吸道合胞病毒（RSV）是严重危害婴幼儿和小儿健康最常见的下呼吸道感染病原体。有报道表明,RSV所引起的小儿急性下呼吸道感染的病例占所有小儿下呼吸道感染病例的70%[1]。其高危人群是有早产史的婴儿、支气管肺发育不良、先天性心脏病及免疫抑制患者等。到目前为止,对RSV感染的治疗仍无最直接、有效的药物,但相关研究已取得一定进展。

利巴韦林雾化联合免疫球蛋白治疗年龄小于3个月婴儿呼吸道合胞病毒感染疗效观察

【目的】评价利巴韦林雾化联合免疫球蛋白治疗年龄小于3个月婴儿呼吸道合胞病毒（RSV）感染疗效。【方法】将入住本院治疗的年龄小于3个月婴儿呼吸道合胞病毒感染患儿100例按不同治疗方法分为联合治疗组和常规治疗组两组各50例，所有患儿均给予保持呼吸道通畅、止咳化痰、预防感染、维持内环境稳定等对症支持治疗，在此基础上联合治疗组给予利巴韦林雾化及免疫球蛋白（IVIG）静脉注射，常规组单用利巴韦林雾化，观察比较两组患儿的临床疗效。【结果】联合治疗组喘憋、呼吸急促持续时间显著短于常规组（P〈0．05）；肺部哆音消失时间明显早于常规组（P〈0．05）；总有效率（96．0％）显著高于常规组（82％）。【结论】利巴韦林雾化联合免疫球蛋白治疗年龄小于3个月婴儿婴儿呼吸道合胞病毒感染可明显提高临床疗效。

毛支饮体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

随着抗生素的广泛应用，细菌感染性疾病明显减少，但病毒感染性疾病日益增多。近年来，毛细支气管炎（以下简称毛支）的发病率呈逐年上升的趋势，毛支多发生在婴幼儿，主要由呼吸道合胞病毒（RSV）引起。RSV感染可引起患儿反复喘息，

肺力咳合剂对呼吸道合胞病毒所致下呼吸道感染疗效观察

目的:探讨肺力咳在呼吸道合胞病毒所致下呼吸道感染的疗效,以期对临床疾病的中医药诊断和治疗起到一定的指导作用。方法:将2021年6月至2022年6月来自江西省儿童医院呼吸科住院的1月至5岁呼吸道病毒感染引起的下呼吸道感染儿童作为研究对象,将52例入组儿童随机分为组(观察组27例,对照组25例)进行研究。对照组患者给予常规治疗,观察组患者在对照组的基础上加用肺力咳合剂进行治疗,对两组有效率,住院时间,入院第3天、第5天咳嗽评分以及不良反应发生情况进行研究。结果:治疗后,观察组有效率92.59%(25/27)与对照组有效率88.00%(22/25)比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组住院时间(6.33±1.75)d与对照组住院时间(6.54±1.82)d比较,差异无统计学意义(P>0.05);入院第3天观察组日间咳嗽评分(2.04±0.34)分、夜间咳嗽评分(2.07±0.67)分与对照组日间咳嗽评分(2.04±0.54)分、夜间咳嗽评分(2.16±0.69)分比较,两组差异无统计学意义(P>0.05);入院第5天观察组日间咳嗽评分(1.55±0.50)分、夜间咳嗽评分(1.00±0.48)分低于对照组日间咳嗽评分(1.84±0.37)分、夜间咳嗽评分(1.32±0.63)分,两组差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肺力咳合剂可有效治疗呼吸道合胞病毒所致的下呼吸道感染。

呼吸道合胞病毒诱导COX-2的表达

目的研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染Balb/c鼠及A549细胞(人肺腺癌上皮细胞)COX-2表达的变化,初步探讨COX-2在RSV感染所致炎性反应中的作用。方法以1×106PFU/mlRSV感染体外培养的A549细胞,在感染后8、16和24h,采用免疫细胞化学法检测COX-2蛋白表达;以1×106PFU/mlRSV滴鼻感染Balb/c鼠,在感染后24、48和96h,用免疫组化法检测肺组织COX-2蛋白表达,并对肺组织切片行HE染色;以未感染病毒的Balb/c鼠及A549细胞作正常对照。采用生物图像分析系统对免疫组化和免疫细胞化学结果进行COX-2定量检测。用TRIzol提取肺组织和A549细胞总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2 mRNA表达的变化。结果正常细胞对照组中,A549细胞COX-2 mRNA和蛋白有微弱表达,经由RSV感染后,A549细胞COX-2 mRNA和蛋白有高水平表达,差异有显著性(P<0.05),且随着感染时间的延长,其表达量逐渐增加。正常鼠肺组织中COX-2 mRNA和蛋白仅有微弱表达,RSV感染后,COX-2 mRNA和蛋白表达水平随感染时间延长而增加,差异具有显著性(P<0.05);HE染色显示肺组织炎症随感染时间延长而加重,且COX-2的表达水平与肺组织炎症严重程度相一致。结论RSV感染可诱导肺组织及A549细胞高水平表达COX-2 mRNA和蛋白,并可能参与RSV感染引起的肺组织炎性反应。

呼吸道合胞病毒下呼吸道感染病儿外周血微小RNA-145表达与T淋巴细胞亚群的关系

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)下呼吸道感染肺炎病儿外周血血浆中微小RNA-145(mir-145)表达与外周血单个核细胞(PBMC)中T淋巴细胞亚群的关系。方法选取2017年1月至2018年12月海南现代妇女儿童医院收治的RSV下呼吸道感染肺炎病儿126例作为RSV肺炎组,同期在本院进行体检的健康儿童130例作为健康对照组。RSV肺炎组根据病情严重程度分为轻度组(n=54)、重度组(n=72),并依据重度组是否给予机械通气分为非机械通气组(n=38)、机械通气组(n=34)。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外周血血浆中mir-145表达水平,使用流式细胞仪及配套试剂盒检测PBMC中T淋巴细胞亚群CD3^+、CD4^+、CD8^+水平,并用MRFlow流式细胞分析软件自动行CD3^+、CD4^+、CD8^+绝对计数,同时计算CD4^+/CD8^+值。结果RSV肺炎组病儿血浆mir-145表达[(1.74±0.48)比(0.99±0.26)]及PBMC中CD8^+水平[(30.75±8.39)%比(21.64±5.92)%]均显著高于健康对照组(P<0.05),PBMC中CD3^+[(59.04±16.12)%比(68.77±18.35)%]、CD4^+水平[(31.27±8.01)%比(46.90±12.84)%]及CD4^+/CD8^+值[(1.02±0.28)比(2.17±0.63)]均明显低于健康对照组(P<0.05)。重度组病儿血浆mir-145表达[(1.87±0.55)比(1.52±0.40)]及PBMC中CD8^+水平[(33.96±9.10)%比(25.34±7.02)%]均明显高于轻度组病儿(P<0.05),PBMC中CD3^+[(57.05±15.83)%比(63.28±17.21)%]、CD4^+水平[(23.78±6.62)%比(38.09±10.14)%]及CD4^+/CD8^+值[(0.70±0.21)比(1.50±0.39)]均显著低于轻度组病儿(P<0.05)。重度RSV肺炎机械通气组病儿血浆mir-145表达[(1.95±0.58)比(1.68±0.45)]及PBMC中CD8^+水平[(34.92±9.18)%比(28.17±7.49)%]均显著高于非机械通气组病儿(P<0.05),PBMC中CD3^+[(54.72±13.53)%比(61.83±16.04)%]、CD4^+水平[(20.45±5.79)%比(34.03±8.85)%]及CD4^+/CD8^+值[(0.59±0.17)比(1.21±0.36)]均明显低于非机械通气组病儿(P<0.05)。RSV肺炎病儿血浆mir-145表达与PBMC中CD3^+水平呈负相关(P<0.05),与PBMC中CD4^+水平呈负相关(P<0.05),与PBMC中CD8^+水平呈正相关(P<0.05),与CD4^+/CD8^+值呈负相关(P<0.05)。结论RSV下呼吸道感染肺炎病儿外周血血浆中mir-145表达水平升高,其高表达可能与T淋巴细胞亚群异常有关。

天津地区儿童急性呼吸道感染病毒病原检测分析

目的:了解天津地区儿童急性呼吸道感染病毒的病原学情况。方法:采用直接免疫荧光法对2010年1月—2011年6月天津市儿童医院收治的5954例7h～12岁因急性呼吸道感染住院儿童鼻咽分泌物标本进行呼吸道7种病毒检测。结果:本组检测出7项病毒阳性626例(10.51%),男性多于女性,其中呼吸道合胞病毒(RSV)376例(60.06%),副流感病毒3(PIV3)211例(33.71%),腺病毒(ADV)20例(3.19%),流感病毒A(IFVA)6例(0.96%),副流感病毒1(PIV1)5例(0.80%),流感病毒B(IFVB)3例(0.48%),副流感病毒2(PIV2)2例(0.32%)和混合感染3例(0.48%)。RSV在各年龄组患儿中检出率均为最高,其余几种病毒感染以2岁以内婴幼儿多见。RSV季节性较明显,主要集中在冬春季,PIV3在夏季有一个小高峰。结论:RSV、PIV3为本地区儿童急性呼吸道病毒感染主要致病原,不同季节有一定的流行规律。

小儿呼吸道合胞病毒肺炎的中医药研究进展

呼吸道合胞病毒肺炎是由呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）所致,多见于〈2岁小儿,尤其是2～6个月的婴儿。其主要病变在毛细支气管,亦可累及支气管及肺泡;主要表现除发热、咳嗽和呼吸困难外,喘憋为其突出表现。呼吸道合胞病毒肺炎是婴幼儿最常见的急性下呼吸道病毒感染性疾病,发病率较高,病情较重,严重威胁儿童的健康，RSV感染与儿童反复喘息和气道高反应性密切相关，给儿童的生活质量带来影响。现就近年来中医药治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎的研究进展综述如下。

雾化吸入4%高渗盐水硫酸镁治疗呼吸道合胞病毒肺炎的临床疗效观察

目的探讨采用雾化吸入4%高渗盐水硫酸镁治疗呼吸道合胞病毒肺炎的有效性和安全性。方法选取2012年5月至2014年5月该院儿科收治的呼吸道合胞病毒肺炎患儿98例,采用随机数表法分为研究组50例和对照组48例。对照组患儿给予抗病毒、化痰、止咳、平喘、氧气吸入及静脉补液常规系统治疗,研究组在对照组基础上使用4%高渗盐水3 m L溶入25%硫酸镁(按照每千克体质量30 mg的原则)雾化吸入,7 d为1个疗程,治疗后比较两组患儿咳嗽持续时间、肺部啰音消失时间及住院时间。结果治疗后,研究组咳嗽持续时间为(4.2±1.7)d、肺部啰音消失时间为(5.7±2.1)d、住院时间为(8.3±3.3)d,与对照组[(5.1±2.2)、(7.3±3.4)、(10.8±4.8)d]比较均明显缩短,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患儿未出现雾化吸入后呛咳等不良反应,对照组有2例患儿有呛咳现象,两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论雾化吸入4%高渗盐水硫酸镁治疗呼吸道合胞病毒肺炎可缩短症状持续时间,减少住院时间,疗效确切,无明显不良反应发生,值得在临床推广应用。

外泌体在病毒诱导哮喘中的作用及中医药干预机制研究进展

病毒诱发哮喘发病机制尚未完全阐明,其发病机制复杂,涉及多种细胞及免疫环节。外泌体分布广泛,具有细胞通讯作用,与哮喘气道炎症、气道重塑、气道高反应性关系密切。哮喘炎症细胞和肺结构细胞及干细胞等不同细胞通过外泌体及其微小RNA(miRNA)介导细胞通讯在病毒诱导哮喘关键环节如气道炎症、气道黏液高分泌、气道重塑及气道高反应性等方面具有较大影响作用。中医药防治病毒相关性哮喘具有多靶点、多环节等作用,中医经典方剂及其衍生经验方等中药复方、制剂及单体物质则从细胞分子、动物实验不同层次对呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)诱发哮喘进行干预,且其对于RSV诱发哮喘临床疗效确切。因此综述了不同细胞来源外泌体及miRNA在病毒诱导哮喘细胞免疫紊乱及气道炎症、气道重塑、气道高反应性等关键病理环节的作用机制以及目前中医药防治病毒相关性哮喘的相关研究进行系统总结、梳理,进一步明确病毒诱发哮喘的相关发病机制,为早期防治病毒诱发哮喘及中医药调控机制研究提供新的视角。

大黄对呼吸道合胞病毒抑制作用的研究

目的探究在A549细胞中大黄对呼吸道合胞病毒复制的影响及在感染后调节自噬的作用。方法本研究为实验研究,采用呼吸道合胞病毒Long株感染人非小细胞肺癌系A549细胞,构建呼吸道合胞病毒感染细胞模型。使用A549细胞设置感染对照组、利巴韦林组、大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组,在感染呼吸道合胞病毒和大黄处理24 h后,使用免疫印迹法检测细胞内病毒荧光蛋白(RSV-GFP)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)蛋白表达的相对水平,定量聚合酶链反应检测细胞内病毒基因(RSV-N)基因的相对量的表达。在感染呼吸道合胞病毒和大黄处理72 h后,使用CCK8法测定细胞活性,病毒空斑实验法测定上清病毒滴度。设置入胞感染对照组、入胞大黄组;吸附感染对照组、吸附大黄组;灭活感染对照组、灭活大黄组,在感染呼吸道合胞病毒和大黄处理24 h后,使用定量聚合酶链反应检测细胞内病毒基因(RSV-N)基因的相对量的表达,在感染呼吸道合胞病毒和大黄处理72 h后,使用CCK8法测定细胞活性。结果(1)不同浓度的大黄培养A549细胞72 h后存活率比较有统计学意义(P<0.001),与5 mg/L比较,500、1000 mg/L均有统计学意义(均P<0.05),10、25、50、100 mg/L均无统计学意义(均P>0.05),不同浓度利巴韦林培养A549细胞72 h后存活率比较无统计学意义(F=1.02,P=0.442);结果显示对于A549细胞100 mg/L大黄为最高安全剂量,本实验选取25、50、100 mg/L分别作为大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组处理浓度,利巴韦林处理浓度为500μmol/L。(2)大黄低剂量组细胞存活率较感染对照组[(81.43±1.51)%比(37.07±1.59)%]升高、大黄中剂量组细胞存活率较大黄低剂量组[(89.06±1.23)%比(81.43±1.51)%]升高、大黄高剂量组细胞存活率(99.84±1.45)%、利巴韦林组(97.41±1.60)%较大黄中剂量组(89.06±1.23)%升高(均P<0.05)。(3)5组细胞RSV-N基因表达量及上清中的病毒滴度比较差异均有统计学意义(F值分别为41.04、123.50,均P<0.001);利巴韦林组(0.66±0.03)、大黄高剂量组(0.60±0.02)、大黄中剂量组(0.74±0.01)较感染对照组(1.00±0.00)细胞中RSV-N基因表达量下降(均P<0.05),利巴韦林组(0.23±0.10)、大黄高剂量组(0.25±0.10)、大黄中剂量组(0.60±0.14)、大黄低剂量组(0.80±0.14)较感染对照组(1.03±0.16)细胞上清中的病毒滴度下降(均P<0.05),且利巴韦林组病毒滴度与大黄高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(4)5组细胞中RSV-GFP、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的表达水平比较均有统计学意义(F值分别为42.29、48.72,均P<0.001),大黄低剂量组细胞RSV-GFP较感染对照组降低、大黄中剂量组RSV-GFP较大黄低剂量组降低、大黄高剂量组RSV-GFP较大黄中剂量组降低(均P<0.05),利巴韦林组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(3.34±0.29)、大黄高剂量组(2.81±0.35)、大黄中剂量组(2.93±0.15)、大黄低剂量组(2.73±0.14)较感染对照组(1.00±0.00)升高(均P<0.05),且利巴韦林组RSV-GFP、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ与大黄高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(5)在RSV完成入胞后加入大黄通过CCK8检测细胞存活率,qPCR检测RSV-N基因的表达量。入胞大黄组细胞存活率较入胞感染对照组[(94.79±3.55)%比(39.66±2.25)%]升高、入胞大黄组细胞RSV-N基因较入胞感染对照组[(0.04±0.01)比(1.00±0.00)]降低(t值分别为26.24、166.30,均P<0.001),吸附大黄组细胞存活率较吸附感染对照组[(65.31±2.06)%比(38.62±0.96)%]升高、吸附大黄组细胞RSV-N基因较吸附感染对照组[(0.40±0.07)比(1.00±0.00)]降低(t值分别为20.35、14.85,均P<0.001),灭活大黄组细胞存活率较灭活感染对照组[(54.10±2.49)%比(33.10±1.18)%]升高、灭活大黄组细胞RSV-N基因较灭活感染对照组[(0.11±0.02)%比(1.00±0.00)%]降低(t值分别为13.20、74.33,均P<0.001)。结论大黄可降低呼吸道合胞病毒N基因在A549细胞中的表达,同时上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ抑制RSV-GFP蛋白在细胞内的表达。

基于液相芯片技术的呼吸道病原体多重检测技术的建立

呼吸道感染是临床最常见的疾病之一，可由多种病原体引起，包括细菌、病毒、支原体、衣原体等，其临床表现与治疗因病原体不同而存在较大差异（1-4）。研究表明95%的急性上呼吸道疾病和大部分的下呼吸道疾病均由细菌外的病原感染引起，其中以呼吸道病毒最为常见，包括呼吸道合胞体病毒（respiratory syncytial virus, RSV）、腺病毒（adenovirus, ADV）、流感病毒A型（Influenza virus A, INFA）、流感病毒B型（Influenza virus B, INFB）、副流感病毒（parainfluenza virus, PIV）等（5,6）。大部分呼吸道病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点，并且新致病性病毒还在不断被发现。据统计，呼吸道和胞病毒、甲型流感、乙型流感和副流感病毒是呼吸道病毒感染中最常见的病原体，占病毒感染种类的90%，致死率8%左右，严重危害到公众的健康和安全（7）。因此，建立一种快速准确的诊断方法，不仅有利于病因确诊，也有利于临床采取针对性治疗，同时在病毒的流行病学调查以及阻止病毒的传播与扩散中具有重要的作用。