呼吸道平滑肌细胞的分泌功能

支气管哮喘的重要特征是呼吸道慢性炎症和呼吸道重构,而两者与支气管平滑肌的功能密切相关。呼吸道平滑肌细胞(ASMCs)除了收缩、增殖和迁移特性外,还具有重要的分泌调节功能。ASMCs能发生表型转化,转变成合成型,合成型ASMCs能以自分泌、旁分泌的方式产生多种细胞因子、趋化因子、生长因子、细胞黏附分子及大量细胞外基质,在启动和维持哮喘呼吸道炎症和呼吸道重构方面起着重要作用。

FAK在COPD呼吸道平滑肌细胞增殖中作用机制的研究进展

黏着斑激酶(FAK)是一种进化上高度保守的蛋白质,在体内分布广泛,它参与了多条细胞信号通路的转导,是胞内外信号转导的中枢。FAK影响细胞生长的多个环节,如细胞迁移、增殖、黏附、凋亡等。随着FAK在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者呼吸道平滑肌细胞增殖作用机制的进一步研究,将为预防和更进一步治疗COPD带来新方案,进而减少COPD的病死率及经济负担。

辛伐他汀对体外培养大鼠呼吸道平滑肌细胞凋亡的作用

气道重建可导致不可逆的气道阻塞和持续性的气道高反应性,是哮喘发病机制中的重要因素。呼吸道平滑肌增厚是影响气道重建的主要原因。他汀类药物可以影响呼吸道平滑肌细胞（airway smooth muscle cell,ASMC）增殖[1]。本实验初步探讨他汀类药物是否影响ASMC凋亡。

转化生长因子-β1对人呼吸道平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的探究转化生长因子-β1(TGF-β1)对人呼吸道平滑肌(HASM)细胞增殖、迁移的影响。方法采集于空军军医大学第一附属医院行肺叶切除术的2例哮喘患者的肺叶标本并获取HASM细胞。将处于对数生长期的HASM细胞随机分为空白组、低剂量TGF-β1组、中剂量TGF-β1组和高剂量TGF-β1组,低剂量TGF-β1组、中剂量TGF-β1组和高剂量TGF-β1组细胞分别应用终质量浓度为0.1、1.0、10.0μg·L-1 TGF-β1进行处理,空白组细胞应用等量磷酸盐缓冲液处理。另将HASM细胞随机分为对照组、阴性对照组、微RNA-21(miR-21)inhibitor组和TGF-β1+miR-21 inhibitor组。对照组细胞不作任何处理,阴性对照组细胞转染阴性对照载体,miR-21 inhibitor组细胞转染miR-21 inhibitor,TGF-β1+miR-21 inhibitor组细胞转染miR-21 inhibitor后以10μg·L-1 TGF-β1处理48 h。应用细胞计数试剂盒-8和划痕实验分别检测各组细胞增殖和迁移情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测空白组、低剂量TGF-β1组、中剂量TGF-β1组、高剂量TGF-β1组细胞miR-21相对表达量,采用蛋白免疫印迹法检测对照组、高剂量TGF-β1组、miR-21 inhibitor组、TGF-β1+miR-21 inhibitor组细胞第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源等位基因(PTEN)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白相对表达量。结果各组细胞铺板培养至12、24、48 h时,低剂量TGF-β1组、中剂量TGF-β1组、高剂量TGF-β1组细胞增殖能力显著高于空白组(P<0.05),中剂量TGF-β1组、高剂量TGF-β1组细胞增殖能力显著高于低剂量TGF-β1组(P<0.05),高剂量TGF-β1组细胞增殖能力显著高于中剂量TGF-β1组(P<0.05);miR-21 inhibitor组细胞增殖能力显著低于阴性对照组和对照组(P<0.05),TGF-β1+miR-21 inhibitor组细胞增殖能力显著高于miR-21 inhibitor组(P<0.05)。细胞划痕培养48 h后,低剂量TGF-β1组、中剂量TGF-β1组、高剂量TGF-β1组细胞划痕愈合率显著高于空白组(P<0.05),中剂量TGF-β1组、高剂量TGF-β1组细胞划痕愈合率显著高于低剂量TGF-β1组(P<0.05),高剂量TGF-β1组细胞划痕愈合率显著高于中剂量TGF-β1组(P<0.05);miR-21 inhibitor组细胞划痕愈合率显著低于对照组和阴性对照组(P<0.05),TGF-β1+miR-21 inhibitor组细胞划痕愈合率显著高于miR-21 inhibitor组(P<0.05)。低剂量TGF-β1组、中剂量TGF-β1组、高剂量TGF-β1组细胞中miR-21相对表达量显著高于空白组(P<0.05);中剂量TGF-β1组、高剂量TGF-β1组细胞中miR-21相对表达量显著高于低剂量TGF-β1组(P<0.05);高剂量TGF-β1组细胞中miR-21相对相对表达量显著高于中剂量TGF-β1组(P<0.05)。与对照组比较,高剂量TGF-β1组细胞PTEN相对表达量降低,p-Akt/Akt水平提高(P<0.05)。与对照组比较,miR-21 inhibitor组细胞PTEN相对表达量升高,p-Akt/Akt水平下降(P<0.05)。与miR-21 inhibitor组比较,TGF-β1+miR-21 inhibitor组PTEN相对表达量降低,p-Akt/Akt水平升高(P<0.05)。结论TGF-β1可促进HASM细胞的增殖和迁移,且呈剂量依赖性,其作用机制可能与上调miR-21表达及激活PTEN/Akt信号通路有关。

基于苦味受体表达的多组织细胞传感器及其应用

非口腔组织中的苦味受体(TAS2Rs)可能成为相关疾病治疗的新靶点。该研究将表达有TAS2Rs的细胞作为敏感元件,根据其生理特性与不同的传感器耦合,探究了味觉受体异位表达及其在个性化药物筛选中的应用,构建了针对不同疾病模型的个性化药物筛选平台。首先,基于细胞阻抗传感器以及内源性表达TAS2R38受体的结肠癌细胞,开发了异硫氰酸酯类物质特异性药物筛选平台,求得苯硫脲的EC50为157.6μM;其次,结合微电极阵列检测系统,探究了TAS2Rs激动剂地芬尼多(5~160μM)和水杨苷(0.001~100μM)对心肌细胞收缩的抑制作用;此外,基于3D呼吸道平滑肌细胞(ASMCs)阵列,结合凝胶成像系统,探究了TAS2Rs激动剂桔皮素(20μM)对呼吸道平滑肌细胞的舒张作用。