益气健脾方对脾气虚证模型大鼠心肌细胞线粒体呼吸链酶复合物活性的影响

目的探究益气健脾方对脾气虚证模型大鼠心肌细胞线粒体呼吸链酶复合物活性的影响。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组,每组10只,对3组大鼠进行分笼饲养。模型组和治疗组大鼠采取饮食干预联合极限游泳法进行脾气虚造模,于实验第15天对3组大鼠的体质量、肛温、食量、饮水量及脾气虚症状积分进行测评。造模成功后,正常组和模型组采用常规饲养方式联合生理盐水灌胃,治疗组采用常规饲养方式联合益气健脾中药汤剂灌胃,时间为8周。之后分别取3组大鼠的心肌线粒体,测定心肌组织线粒体呼吸链酶复合物活性。结果模型组大鼠的线粒体呼吸链酶复合物Ⅱ和复合物Ⅳ活性明显低于正常组(P<0.05);治疗组大鼠的线粒体呼吸链酶复合物Ⅱ和复合物Ⅳ活性与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论脾气虚能够造成心肌细胞线粒体发生突变和缺失,导致呼吸链酶复合物活性下降,益气健脾中药能够调节心肌组织线粒体呼吸链酶复合物Ⅱ和复合物Ⅳ活性。

五子衍宗丸对男性老年肾虚者外周血白细胞线粒体DNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的影响

目的 :研究五子衍宗丸对男性老年肾虚者外周血白细胞线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体活力的影响。方法 :38例男性老年肾虚者采用单盲法 ,随机分为五子衍宗丸治疗组和安慰剂对照组 ,服药 3个月。分别用聚合酶链反应 (PCR)和酶动力学方法检测治疗前后外周血白细胞线粒体DNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体的活力。结果 :五子衍宗丸可提高男性老年肾虚者外周血白细胞线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活力 ,减少线粒体DNA缺失 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论

淫羊藿、枸杞子对老年大鼠线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体和ATP合成的影响

目的 :研究淫羊藿、枸杞子对老年大鼠线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体及ATP合成的影响。方法 :Wistar系雄性大鼠 ,幼年大鼠 (1月龄 )、青年大鼠 (4月龄 )每组均为 1 2只 ;老年大鼠 (2 2月龄 ,31只 ) ,随机分为对照组 (1 0只 )、淫羊藿组 (1 0只 )和枸杞子组 (1 1只 )。用聚合酶链反应 (PCR)、酶动力学和生物发光技术进行检测。结果 :淫羊藿、枸杞子可减少老年大鼠心、脑、骨骼肌组织线粒体DNA缺失 ,提高心、脑线粒体三磷酸腺苷(ATP)的合成和心、骨骼肌线粒体呼吸链复合酶Ⅳ活力及脑线粒体呼吸链复合酶Ⅰ活力 ;淫羊藿还可提高脑线粒体呼吸链复合酶Ⅳ活力和骨骼肌线粒体ATP的合成。结论 :淫羊藿。

菟丝子水提物对衰老模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

目的探讨菟丝子水提物对大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响。方法将Wistar大鼠30只,随机分为青年对照组,衰老模型组,模型给药组,制作D-半乳糖衰老模型,模型给药组同时灌服菟丝子水提物。观察各组大鼠心肌线粒体丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性的变化。结果菟丝子水提物可提高心肌线粒体SOD的活性、降低MDA的含量;并且使呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性明显升高。结论菟丝子水提物能提高心肌线粒体抗氧化能力,改善线粒体能量代谢障碍,维护线粒体功能。

乌梅总黄酮对帕金森病大鼠脑线粒体呼吸链酶复合物影响

目的探讨乌梅总黄酮(FMF)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病大鼠脑线粒体呼吸链酶复合物的活性及相关线粒体ND1、ND4基因及蛋白表达的影响。方法采用6-OHDA左侧纹状体注射建立帕金森病大鼠模型。大鼠随机分成假手术组,模型组,FMF高、中、低剂量治疗组,每组各10例。FMF高、中、低剂量组予以FMF灌胃给药,剂量分别为160、80、40 mg·kg^-1,假手术组及模型组大鼠接受等容积生理盐水干预。每日1次,连续给药4周。采用比色法检测各组大鼠脑线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的活性,采用RT-PCR检测编码线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ的ND1、ND4 mRNA,采用Western Blot法检测ND1、ND4蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性明显降低(P<0.05);与模型组比较,FMF高剂量组大鼠脑线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ~Ⅳ活性明显改善,FMF中剂量组线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ的活性也有不同程度的提高(P<0.05),FMF低剂量组线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ~Ⅳ活性无明显改变(P>0.05)。与假手术组比较,模型组ND1、ND4 mRNA及其蛋白的表达均显著下降(P<0.05);与模型组比较,FMF中、高剂量组均可提高ND1、ND4 mRNA及其蛋白的表达(P<0.05),其中以FMF高剂量组效果最为显著,而FMF低剂量组仅可提高ND4 mRNA的表达(P<0.05)。结论 FMF可能是通过影响线粒体呼吸链酶复合物的活性,提高线粒体ND1、ND4基因和蛋白的表达,防治帕金森病。

玛咖对老年大鼠脑组织线粒体呼吸链酶活性及抗衰老能力的影响

目的观察玛咖对老年大鼠脑组织线粒体呼吸链酶(RCC)Ⅰ~Ⅳ活性及抗衰老能力的影响。方法健康雄性老年Wistar大鼠48只随机分为对照组、玛咖组、运动组和玛咖+运动组。玛咖组和玛咖+运动组每日灌胃1次玛咖粉剂(5 g/kg),运动组和玛咖+运动组进行递增负荷跑台运动训练,共6 w。训练结束后,各组均进行力竭运动(35 m/min)后即刻取大脑,差速离心提取线粒体,分光光度计测定RCCⅠ~Ⅳ活性。结果与对照组比,玛咖组RCCⅠ、RCCⅢ、RCCⅣ活性分别提高47.40%、50.88%和55.72%,差异显著(P<0.01);运动组RCCⅠ、RCCⅣ活性提高54.12%和61.26%,差异显著(P<0.01);玛咖+运动组RCCⅠ、RCCⅢ、RCCⅣ活性分别提高68.67%、53.55%和72.39%,差异显著(P<0.01),RCCⅡ提高35.32%,差异显著(P<0.05)。与玛咖组比,玛咖+运动组RCCⅠ、RCCⅣ活性提高40.44%和37.64%,差异显著(P<0.05)。与运动组比,玛咖+运动组RCCⅠ活性提高31.71%,差异显著(P<0.05)。与对照组比,玛咖组、玛咖+运动组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性分别提高42.64%、48.27%和68.92%,差异显著(P<0.05或P<0.01);超氧化物歧化酶(SOD)活性分别提高53.36%、58.19%和74.09%,差异显著(P<0.05或P<0.01);玛咖组、玛咖+运动组丙二醛(MDA)含量分别提高了33.21%和32.21%,差异显著(P<0.05)。与玛咖组比,玛咖+运动组GSH-Px、SOD活性提高了45.82%、44.44%,差异显著(P<0.05)。与运动组相比,玛咖+运动组GSH-Px、SOD活性提高39.93%和38.03%,差异显著(P<0.05)。结论补充玛咖结合递增负荷跑台运动训练均可提高力竭运动后老年大鼠脑组织线粒呼吸功能,延缓脑组织衰老,且补充玛咖与运动训练双重效果显著。

电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

目的观察电针对SAMP8小鼠海马线粒体呼吸链酶复合体活性的影响,从线粒体角度探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法选取8月龄SAMP8小鼠16只,随机分为模型组8只,电针组8只,另选取8只8月龄的SAMR1小鼠为对照组,疗程结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,分光光度法检测海马线粒体呼吸链酶复合体的活性。结果模型组与对照组相比,模型组鼠平均逃避潜伏期明显延长,原平台象限停留时间缩短,海马线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性降低(P<0.01,P<0.05);电针组与模型组比较,电针组平均逃避潜伏期缩短,原平台象限停留时间延长,海马线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ活性明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论电针治疗AD的可能机制是提高海马线粒体呼吸链酶复合体活性,改善线粒体功能。

妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘线粒体呼吸链酶活性和端粒酶反转录酶改变的研究

目的研究胎盘滋养细胞线粒体呼吸链酶活性及端粒酶反转录酶(hTERT)的表达与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)的关系。方法选取27例ICP患者(ICP组)及18例正常孕妇(对照组),采用酶组织化学法分析各组胎盘滋养细胞中线粒体呼吸链酶活性,采用免疫组织化学方法检测各组胎盘滋养细胞中hTERT的表达情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应定量检测各组胎盘中hTERTmRNA的表达情况。结果细胞色素c氧化酶、三磷酸腺苷酶和琥珀酸脱氢酶在ICP组(包括ICP轻度亚组及ICP重度亚组)和对照组胎盘滋养细胞中的表达均呈阳性,ICP组上述酶活性均显著低于对照组(P值分别<0.05、0.01)。hTERT在ICP组(112.67±41.40)、ICP轻度亚组(109.56±42.66)及ICP重度亚组(118.89±40.46)胎盘滋养细胞中的表达水平均显著高于对照组(29.06±14.30,P值均<0.05)。ICP轻度亚组与ICP重度亚组间的线粒体呼吸链酶活性和hTERT表达水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。ICP组、ICP轻度亚组、ICP重度亚组及对照组hTERTmRNA的表达水平分别为3.10±0.12、3.32±0.13、2.66±0.22、2.76±0.08,18srRNA的表达水平分别为0.09±0.11、0.13±0.14、0.23±0.24、0.10±0.11,各组间hTERTmRNA和18srRNA表达水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论 ICP患者胎盘绒毛受损,滋养细胞线粒体呼吸链酶活性下降,hTERT蛋白表达的增加无法弥补增多的细胞凋亡,机体失代偿,导致胎盘功能下降,这可能是ICP胎儿宫内缺氧的一种发生机制。

胎盘超微结构和呼吸链酶活性与子痫前期关系的研究

目的:研究胎盘组织超微结构的病理变化、呼吸链酶复合体活性变化与子痫前期的关系。方法:选择轻度子痫前期孕妇30例(轻度子痫前期组)、重度子痫前期孕妇15例(重度子痫前期组)和正常孕妇20例(正常妊娠组)行胎盘透射电镜观察,比较两组超微结构,同时采用紫外分光光度计法测定胎盘组织线粒体中两种呼吸链酶复合体(线粒体酶复合体Ⅰ、Ⅳ)的活性进行分析。结果:轻度子痫前期组与正常妊娠组胎盘超微结构比较,差异无统计学意义(P>0.05),重度子痫前期组与正常妊娠组和轻度子痫前期组胎盘超微结构比较,差异有统计学意义(P<0.05);重度子痫前期组胎盘组织中线粒体酶复合体Ⅳ的活性比正常妊娠组、轻度子痫前期组低,差异有高度统计学意义(P<0.01),轻度子痫前期组线粒体酶复合体Ⅳ的活性与正常妊娠组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。线粒体酶复合体Ⅰ在3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:子痫前期患者胎盘超微结构的变化、线粒体酶复合体Ⅳ活性降低,提示子痫前期发病机制中有能量代谢传递障碍,线粒体能量产生异常参与子痫前期的发病过程。

呼吸链酶复合体Ⅰ研究进展

上世纪80年代,首次报道线粒体肌病和Leber视神经病患者线粒体DNA有突变,提示此疾病患者线粒体呼吸链有缺失,拉开了线粒体呼吸链缺失与疾病关系研究的序幕。现已发现100多种疾病（包括成人和儿童）与线粒体呼吸链缺失有密切关系。

呼吸链酶活性与子痫前期的关系

目的 探讨呼吸链酶活性改变与子痫前期的关系。方法 采用酶组织化学方法对 11例轻度子痫前期患者 ,8例重度子痫前期患者及 9例正常妊娠孕妇的胎盘绒毛组织中呼吸链酶活性进行测定。结果 重度子痫前期患者胎盘绒毛组织中细胞色素 C氧化酶及腺苷三磷酸酶的活性比正常妊娠孕妇低 (P<0 .0 5 ) ,辅酶 黄递酶、葡萄糖 6磷酸酶、碱性磷酸酶的活性在三组间差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。

老年黄斑变性患者呼吸链酶复合物活性测定

老年黄斑变性( age-related macular degenera-tion, AMD )发病机制不清.新近研究表明老年变性疾病的发生与机体氧化磷酸化功能衰退有关,表现为呼吸链酶复合物活性降低,组织能量代谢异常.我们通过测定AMD患者部分呼吸链酶复合物活性,对AMD患者机体氧化磷酸化功能进行分析,探讨AMD发病机制.

骨髓增生异常综合征线粒体呼吸链酶复合体的变化

目的:研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞线粒体呼吸链的功能变化并分析其与MDS的关系。方法:测定26例MDS患者与10例骨髓象正常者的单个核细胞线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ的活性。结果:MDS患者呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ的活性明显低于对照组(P<0.05);线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅲ的活性在RAEB-Ⅰ、RAEB-Ⅱ组与RA、RARS组的差异无统计学意义(均P>0.05),而酶复合体Ⅳ的活性在RAEB-Ⅰ、RAEB-Ⅱ组较RA、RARS组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:线粒体呼吸链酶复合体的活性在MDS患者中降低,可能与MDS的病态造血及无效造血有关。

益心康含药血清对氧应激致大鼠心肌线粒体呼吸链酶损伤的保护作用

目的研究氧应激对大鼠心肌线粒体呼吸链酶活性的影响及中药复方益心康胶囊(H303)含药血清对损伤的保护作用。方法 利用氧应激损伤体系(Fe2+/VitC)与大鼠心肌线粒体共同孵育30min,观察对线粒体呼吸链酶-琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CCO)的影响。结果 大鼠心肌线粒体氧应激后,可致SDH及CCO活性明显降低。H303含药血清可使损伤明显减轻,表现为明显增强上述两种酶的活性。结论 H303含药血清对氧应激造成的线粒体呼吸链关键酶活性的降低具有保护作用。

呼吸链酶系结构与功能

简单综述了近年来对呼吸链酶系的研究。介绍了筛选的泛醌反应抑制剂的性质及其在醌催化机制研究中的应用，以及酶与酶之间和脂与酶之间的相互关系，及其在电子传递功能中的作用。

线粒体肌病患者呼吸链酶复合体的测定

在诊断为线粒体肌病的２１例患者，１０例呼吸链酶复合体活力异常。９例患者的平均线粒体第三状态呼吸速度为６１±４６ｎ ｍｏｌ／Ｌ氧·ｍｉｎ＾－１／ｍｇ蛋白。平均呼吸控制率（ＲＣＲ）为１．４±１．０，内有２例患者的呼吸控制率为１。正常对照的第三状态呼吸速度平均值为９３±２２ｎ ｍｏｌ／Ｌ氧。ｍｉｎ＾－１／ｍｇ蛋白，ＰＣＲ平均值为２．１±０．７５。由于本方法并不复杂，每次所需肌肉０．５ｇ。

苯并噻唑醌类化合物对呼吸链酶系的抑制作用

合成了２－氯－５－正十二硫烷基－６－甲基－４，７－苯并噻唑醌（２－Ｃｌ－ＤＭＭＤＢＴ）和２－氯－５－正丁烷氨基－６－甲基－４，７－苯并噻唑醌（２－Ｃｌ－ＢＡＭＤＢＴ）两种化合物，研究了它们对线粒体呼吸链酶系的抑制作用．结果表明：２－Ｃｌ－ＤＭＭＤＢＴ和２－Ｃ１－ＢＡＭＤＢＴ对琥珀酸氧化酶及泛醌氧化酶的电子传递活性均表现一定的抑制作用，而对细胞色素氧化酶无作用，说明二者的抑制作用发生在泛醌反应区．二者对ＮＡＤＨ氧化酶的抑制行为略有不同，２－Ｃｌ－ＤＭＭＤＢＴ是一个逐渐加强的过程，最终可致酶活性完全抑制，而２－Ｃｌ－ＢＡＭＤＢＴ则表现为瞬间抑制．比较了２－Ｃｌ－ＤＭＭＤＢＴ和２－Ｃｌ－ＢＡＭＤＢＴ对琥珀酸氧化酶的抑制能力，长侧链的２－Ｃｌ－ＤＭＭＤＢＴ比短侧链的２－Ｃｌ－ＢＡＭＤＢＴ抑制能力强很多．

心室重塑中心肌呼吸链酶活性改变及乳清酸的保护作用

在大鼠急性心肌梗塞(AMI)后心室重塑中3、7、14d测定了非梗塞区心肌两条呼吸链酶活性。结果表明:在AMI乳清酸治疗组(AMIOA)心肌呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性高于AMI盐水治疗组(AMINS)(P<0.05～0.01),与假手术组(SONS)相近(P>0.05)。上述结果提示:在AMI后心室重塑早期阶段,心肌呼吸链明显损害,而乳清酸对心室重塑心肌具有有益作用,其可能机理是乳清酸增加线粒体磷脂的合成,保护或修复线粒体膜。

补充辅酶Q_(10)与递增负荷运动训练对大鼠肝脏线粒体呼吸链酶复合物活性的影响

目的:探讨补充辅酶Q10与递增负荷运动训练对力竭运动大鼠肝脏线粒体呼吸链酶活性的影响。方法:Wister雄性大鼠36只,随机分为:对照组(NC)、CoQ10补充组(QC)、训练组(NE)、训练+CoQ10补充组(QE);QC组和QE组大鼠每天灌胃CoQ10一次,并进行7周递增负荷跑台运动;实验结束时所有大鼠进行一次力竭性跑台运动即刻处死;分光光度计法测定大鼠肝脏线粒体呼吸链酶复合物活性。结果:(1)QC、NE及QE组CⅠ活性均显著高于NC组(P<0.01或P<0.001),QE组CⅠ活性显著高于NE组(P<0.05);(2)NE组、QE组CⅡ活性均明显高于NC组(P<0.01或P<0.001),且QE组高于NE组(P<0.05);(3)NE组、QE组CⅢ活性均明显高于NC组(P<0.001);NE、QE组无明显差异(P>0.05);(4)NE组、QE组CⅥ活性明显均高于NC组(P<0.001),NE、QE组无显著性差异(P>0.05)。结论:(1)递增负荷运动训练及运动训练结合CoQ10补充均可提高大鼠力竭运动后即刻肝脏线粒体呼吸链酶复合物活性,改善线粒体完整功能。(2)递增负荷运动训练与补充CoQ10在改善力竭运动后即刻大鼠肝脏线粒体完整功能方面无协同作用。

线粒体内膜的呼吸链酶系与F1-F0偶联因子及其功能的偶联

在真核细胞中,氧化磷酸化主要是在线粒体的内膜上进行的,由4种复合物:NADH脱氢酶;琥珀酸-辅酶 Q-还原酶;辅酶 Q-细胞色素c还原酶和细胞色素c氧化酶构成的呼吸链酶系,起着质子泵的作用。它可把基质中的3对质子(H+)抽提到嵴内空间中,使内膜外侧H+浓度高于内膜内侧。外室中高浓度的H+有返回内腔的趋势,H+通过F1-F0偶联因子进入内室时,F1因子中的ATP酶利用这种势能,催化ADP同Pi化合,形成ATP。