中药复方呼宁散安全性毒理学评价

【目的】明确呼宁散的毒理作用,评价其安全性,为其用于临床治疗鸡呼吸道疾病综合征提供科学依据。【方法】急性毒性预试验中,将24只小鼠随机均分为对照组和呼宁散低、中、高剂量组,呼宁散低、中、高剂量组小鼠分别灌胃2.5、5、10 g/kg BW呼宁散1次,0.2 mL/10 g BW,对照组灌胃等体积灭菌蒸馏水,连续观察7 d,记录小鼠中毒和死亡情况。最大给药量试验中,将20只小鼠随机均分为对照组和试验组,试验组小鼠在24 h内分4次灌胃呼宁散10 g/kg BW,0.2 mL/10 g BW,对照组灌胃等体积灭菌蒸馏水,于试验第15天记录小鼠体重并剖检,观察小鼠主要脏器病理变化。亚急性毒性试验中,将40只小鼠随机均分为对照组和呼宁散低、中、高剂量组(2.5、5和10 g/kg BW),连续给药28 d,于末次给药12 h后对小鼠称重、采血,剖检并采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏,计算小鼠体重变化、脏器系数,检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)和IL-6含量,并对心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏进行组织病理学检查。在骨髓微核试验中,将50只小鼠随机均分为对照组、阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg BW)和呼宁散低、中、高剂量组(2.5、5和10 g/kg BW),各组小鼠灌胃给药2次(间隔24 h),末次给药6 h后处死小鼠并制作骨髓涂片,计算微核率及嗜多染红细胞(PCE)/成熟红细胞(NCE)值。在精子畸形试验中,将25只雄性小鼠随机均分为对照组、阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg)和呼宁散低、中、高剂量组(2.5、5和10 g/kg BW),每天灌胃给药1次,连续给药5 d,于首次灌胃后35 d处死小鼠并制作精子涂片,计算精子畸形率。【结果】急性毒性试验中,各组小鼠全部存活,均未见中毒症状,无法测出呼宁散的半数致死量(LD 50),测得小鼠对呼宁散的最大耐受量>40 g/kg BW,说明呼宁散对小鼠无急性毒性。亚急性毒性试验中,与对照组雄性小鼠相比,给药第7天,呼宁散低剂量组小鼠体重显著增加(P<0.05);给药第28天,呼宁散中剂量组小鼠体重极显著增加(P<0.01);呼宁散对各组小鼠主要脏器系数、细胞因子含量均无显著影响(P>0.05),剖检和病理学检查未见明显异常变化,说明呼宁散无亚急性毒性。骨髓细胞微核试验和精子畸形试验中,各剂量呼宁散对小鼠骨髓微核率及精子畸形率无显著影响(P>0.05),且PCE/NCE值均在正常范围内,说明呼宁散无遗传毒性。【结论】10 g/kg BW及以下剂量呼宁散无毒性作用,安全性好。