和缓艾美球虫与早熟艾美球虫的分离与鉴定

采用单卵囊分离技术,获得了2株纯种球虫,鉴定为和缓艾美球虫与早熟艾美球虫。主要鉴定指标:和缓艾美球虫:卵囊呈球形或亚球型,囊壁光滑无色,卵囊内有1极体,无内、外残余体;测100个卵囊的平均大小为(14.96±1.38μm×(13.65±1.20)μm,测100个孢子囊的平均大小为(9.23±1.20)μm×(5.29±0.53)μm;潜在期96h,最短孢子化时间15.5h;虫体主要寄生于小肠下段。早熟艾美球虫:卵囊呈椭圆形或卵圆形,有极体,无内、外残余体;测100个卵囊的平均大小为(19.21±2.10)μm×(16.40±1.75)μm,测100个孢子囊的平均大小为(10.62±0.90)μm×(6.85±0.75)μm;潜在期84h,最短孢子化时间20h;虫体主要寄生于鸡十二指肠与空肠前段。分别用此2株纯种球虫的孢子化卵囊20×104、60×104个感染30日龄黄羽肉鸡各10只,另设1个不感染对照组,结果感染2株纯种球虫的鸡均未发生死亡,但平均增重与不感染对照组差异显著(P<0.05),感染和缓艾美球虫的2组鸡肠道均出现可见病变,感染早熟艾美球虫的2组鸡肠道病变计分为零。

和缓艾美耳球虫致病性研究

对新分离的和缓艾美耳球虫进行了致病性研究。结果表明,21日龄雏鸡感染1 000个和5 000个孢子化卵囊未见异常表现,肠道未发现肉眼可见的病理变化。20 000个卵囊感染可引起轻微病变,100 000个和500 000个卵囊感染能产生较明显的致病作用,与对照组相比增重分别为70.3%和56.8%。根据肠道病变记分标准,肠道有明显可见的病变,所有试验鸡均未出现死亡。

一株和缓艾美耳球虫的致病性和免疫原性

笔者对新分离到的和缓艾美耳球虫进行了致病性和免疫原性的研究。结果表明雏鸡感染1 000和5 000孢子化卵囊表现正常,肠道没有肉眼可见的病理变化。20 000个卵囊感染引起轻微病变。100 000个卵囊和500 000 个卵囊感染则产生较为明显的致病作用,与不感染对照组相比增重分别为70．3％和56．8％,肠道外观也产生明显可见的病变,根据0-4分肠道计分标准,分别为1．43和2．37。所有实验鸡都没有出现死亡。该虫株免疫原性较强,一次免疫5 000个卵囊/只,就能够对200 000个卵囊/只感染产生坚强的保护作用。

和缓艾美耳球虫激发宿主免疫应答的初步研究

和缓艾美耳球虫Eimeriamitis是7种鸡球虫中致病力弱的虫种，对于其免疫原性的认识至今仍有争论。本研究以和缓艾美耳球虫涿州株为研究对象，以初次免疫及二次免疫后鸡的卵囊排出量为标准评估了其免疫原性。同时利用ELISA检测了免疫后鸡群血清中球虫特异性IgY抗体的水平，并通过ELISPOT技术分析了二免后鸡群外周血单核淋巴细胞（PBMC）中分泌IFN-γ的特异性淋巴细胞的数量。结果显示，二次免疫后，鸡的卵囊排出量显著低于初次免疫，免疫组的血清特异性IgY抗体水平较低，而分泌IFN-γ的特异性淋巴细胞的数量较高。这些结果表明和缓艾美耳球虫涿州株具备良好免疫原性，且其激发宿主产生的保护性免疫以细胞免疫应答为主，有作为疫苗株的潜力。

和缓艾美球虫石河子株药物敏感性试验

选用市场上常见的6种抗球虫药物,以POAA和ROP为判定指标,采用饮水或拌料方式对和缓艾美耳球虫石河子株进行了药物敏感性研究。结果表明:该株球虫对6种药物的敏感性顺序为克球粉>地克珠利>莫能霉素、球威-25>氨丙啉和麦杜拉霉素。本结果可有效指导临床用药。

表达H9N2禽流感病毒HA1蛋白的转基因和缓艾美耳球虫的构建

H9N2亚型禽流感病毒已经被证实可以传播到人类，对它存在的潜在危害已受到越来越多的关注。因此，研究安全而有效的H9N2禽流感病毒疫苗已迫在眉睫。为研究和缓艾美耳球虫作为活载体表达及运输禽流感病毒抗原的潜能，本研究构建了可稳定表达H9N2禽流感病毒HA1蛋白的转基因和缓艾美耳球虫。利用黄色荧光蛋白（YFP）及融合的乙胺嘧啶抗性基因（DHFR-TSm2m3）作为报告基因及筛选基因，我们将表达H9N2禽流感病毒HA1抗原的质粒载体核转球虫子孢子，接种鸡后在乙胺嘧啶药物的选择压力下进行筛选并连续传代获得转基因和缓艾美耳球虫系。利用染色体步移和免疫印迹证实了HA1基因的成功插入和表达；利用间接免疫荧光证实HA1蛋白定位于球虫子孢子细胞膜表面和头部。研究进一步发现，转基因球虫的繁殖力与野生球虫相当，感染后亦于第6d达到排卵囊高峰。该转基因和缓艾美耳球虫株具有作为疫苗活载体的潜能。

鸡和缓艾美耳球虫早熟虫株选育及其生物学特性研究

按照Jeffers1975年建立的艾美耳属球虫早熟虫株选育方法,对鸡和缓艾美耳球虫巴彦淖尔株(SY-MB株)进行了单卵囊分离、扩增和早熟虫株的选育。经SPF鸡15代传代之后,分离株的潜隐期由96 h缩短至77 h,缩短了19 h。按索勋等1998年建立的方法对选育出的和缓艾美耳球虫巴彦淖尔早熟株(SY-mb77株)进行10代非选择性传代,证明该早熟虫株的潜隐期、卵囊产量、免疫原性和致病性均具备早熟虫株特性,并能有效抵抗强毒虫株的攻击。

鸡球虫病的诊断与防控技术

鸡球虫病是指由艾美耳属球虫引起的一种损伤肠道的寄生虫病。此病呈世界范围内流行,我国各地也均有流行,是养鸡业最常见且危害最大的一类寄生虫病,我国将鸡球虫病划分为三类动物疫病。目前世界公认的鸡球虫有7种,分别为柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)、堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)、毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)、巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)、和缓艾美耳球虫(Eimeria mitis)、布氏艾美耳球虫(Eimeria brunetti)、早熟艾美耳球虫(Eimeria praecox)。

中草药添加剂防治鸡球虫病研究总结

随着养鸡业的发展,迫切需要寻找临床效果好、经济效益高、安全可靠、药源丰富、价格低廉。既能抑制球虫的发育,又能杀灭、抑制肠道致病菌感染,防治鸡球虫病的药物。这就是本试验研究的宗旨。通过3000多只雏鸡进行筛选方药,药物毒副反应及中西药对比控制试验和扩大试验的研究,研制出“抗球虫一号药”。经2563只雏鸡投药饲喂35天的扩大试验结果:雏鸡成活率达88.52%,球虫卵囊转阴率达89.28%.平均增重达286.4克。虽减虫速度不及氯苯胍。但成活率及增重率比氯苯胍高,防治药费也低2—3倍。“抗球虫一号药”不仅经济效益高,而且还具有较好的社会效益,无化学药物残毒之弊,能减少或代替含有机氯。有机磷制剂药物的使用,防治对鸡和人体之毒害,是当前值得推广的良药。开发利用中草药防治鸡球虫病,不仅促进养鸡业的发展,同时也促进中草药的生产,这是适应目前农村两个转化,对我省“富民”“升位”起着一定的贡献。

中草药添加剂防治鸡球虫病——中西药对比控制试验

为了促进养鸡业的发展,有效地控制严重危害雏鸡生长发育的鸡球虫病,寻找临床效果好、经济效益高、廉价便宜,安全可靠的中草药作为添加剂是很有必要的。在1983年由董华富、兰庭界二同志报导《中草药防治鸡球虫病药物筛选与中西药对比控制试验》已筛选出的苦地组及苦仙组两个中草药方,通过近两年临床应用.观察与分析的基础上,进一步组方出“抗球虫一号药”。为确证此药的临床效果,于1984年5月18日至6月21日,将“抗球虫一号药”与西药氯苯胍作防治鸡球虫病疗效对比控制试验。试验情况介绍于后。

和缓艾美耳球虫石河子株的致病性及免疫原性试验

为了解和缓艾美耳球虫石河子株(E.mitis-SHZ)的致病性及免疫原性,模拟实际生产条件,小剂量(100个卵囊/只)感染试验组内部分3日龄雏鸡,并于感染后OPG几乎为零时对试验组和对照组所有鸡进行攻虫试验(2×105个卵囊/只)。结果显示:100个卵囊/只的初始感染剂量对鸡的增重有一定影响;试验组感染后,OPG只出现一个峰值,能对2×105个卵囊/只的攻虫产生很好的免疫力,表明试验虫株免疫原性较好;攻虫后对照组虽未出现明显的临床症状,但其增重明显低于试验组。结果表明:试验虫株致病性较弱,但具有良好的免疫原性。

和缓艾美耳球虫石河子株生物学特性分析

对和缓艾美耳球虫石河子株的部分生物学特性进行了研究。结果表明:该虫株卵囊大小为18.4～20.5μm,卵囊指数为1.11,最小潜在期是93 h,最短孢子化时间为16 h,粪便内卵囊的最短孢子化时间为17 h,卵囊产量高峰是感染后第5天。该研究为进一步利用该球虫株提供了参考。

和缓艾美耳球虫保定株的分离鉴定与致病性研究

采用单卵囊分离技术,从河北省保定市暴发球虫病的某鸡场鸡粪便中成功分离出1株和缓艾美耳球虫(Eimeria mitis),并对其生物学特性和致病性进行了研究。该虫株主要寄生于小肠后段,潜隐期为97 h,孢子化时间为22 h,卵囊呈球形,平均大小为15.9μm×14.4μm,卵囊指数为1.10,PCR鉴定为纯种的和缓艾美耳球虫,将其命名为和缓艾美耳球虫保定株。该虫株排卵期为感染后第4～10天,其中第5～6天为高峰期。SPF鸡分别感染5×10~4个、1×10~5和2×10~5个和缓艾美耳球虫保定株孢子化卵囊后,均出现精神不振、排水样粪便等球虫病引起的临床症状,且各组相对增重率分别为78.5%、63.5%和59.3%,明显低于空白对照组,该虫株具有一定的致病性,表现为发病和减重。

和缓艾美耳球虫保定株早熟系的选育及生物学特性研究

按照Jefiers 1975年建立的艾美耳球虫属球虫早熟选育方法,对和缓艾美耳球虫保定株进行了早熟选育。通过连续11代的早熟选育后,获得了潜隐期由97h缩短至82h的早熟系。该早熟系经过5代连续非早熟选择性传代,潜隐期仍稳定在82h。排卵囊期为感染后第4~10天,其中第5天为高峰期。该早熟系的致病力较亲本株弱,同样剂量感染后早熟系感染组相对增重率显著高于亲本株感染组。该早熟系免疫原性良好,每羽鸡免疫100个以上卵囊即可较好抵抗1x10^5个亲本株的攻击,相对增重率达80.0%以上和卵囊减少率达90.0%以上。

卫生及防疫

规模羊场的防疫卫生工作/董仁石(浙江省泰顺县龟湖镇兽医站 325508),郑圣锦//浙江畜牧兽医.-2004,29(5),-26规模羊场防疫卫生工作:(1)杜绝外来疫源侵袭。规模羊场应严格杜绝外来疫源侵袭,具体要求做好:①谢绝参观,严禁羊贩、屠工进场挑选商品羊。②严格饲料、饲草送货车辆进出羊场,严禁收治场外病羊,场内严禁饲养其他动物。③提高饲养员和勤杂员的防疫意识,做到进出场自觉消毒。④确需引种时,必须充分了解引种地区羊场的防疫情况。