新疆紫草抗HIV有效成分咖啡酸四聚体的理化性质和纯化工艺研究

目的:初步研究咖啡酸四聚体(CAT)的理化稳定性的基础上选择合适的大孔吸附树脂,去除杂质,提高紫草水溶性部分中有效成分咖啡酸四聚体的含量。方法:以咖啡酸四聚体为指标,HPLC检测纯化前后或其他条件改变的含量变化。结果:7种型号的树脂中LK001纯化效果最佳。确定工艺为吸附液质量浓度10 g·L^(-1),pH 4.5,3 BV·h^(-1)的流速流过树脂柱,用去离子水快速洗脱至Molish反应为阴性,再用20%乙醇洗脱至无色,然后以50 mL 45%的乙醇洗脱,洗脱液除去乙醇,50℃浓缩干燥得粉末。收率为3.6%,CAT单个有效成分的含量为58%,纯度提高了45倍。结论:采用LK001树脂可以去除杂质,提高粗提物中有效成分咖啡酸四聚体的含量。

新疆软紫草中咖啡酸四聚体对照品的制备

目的从新疆软紫草的丙酮水提取物中分离制备了咖啡酸四聚体对照品。方法经紫外光谱、红外光谱、核磁共振和质谱确定结构。结果其相关数据与文献一致,纯度为98.11%。结论符合中药化学对照品含量测定要求,可作为高纯度咖啡酸四聚体化学对照品的制备分离方法。

高效液相色谱法同时测定紫草中咖啡酸四聚体及其异构体含量

目的:建立同时测定紫草中咖啡酸四聚体及其异构体含量的高效液相色谱法。方法:色谱柱为YMC-Pack ODS-AC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-0.5%磷酸水(40∶60);流速:1.0mL·min-1;检测波长:252nm,柱温:室温;进样量:10μL。结果:咖啡酸四聚体在0.065～1.82μg,咖啡酸四聚体异构体在0.052～1.65μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系;咖啡酸四聚体和咖啡酸四聚体异构体的平均回收率分别为98.72%(RSD为3.27%,n=9),101.8%(RSD为2.46%,n=9)。结论:本方法简便可靠,结果稳定,重复性好,可作为紫草质量控制方法之一。

HPLC法同时测定复方紫草颗粒中咖啡酸四聚体和丹酚酸B的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方紫草颗粒中咖啡酸四聚体和丹酚酸B含量的方法。方法:色谱柱为YMC-PackODS-AC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸水(40∶60),流速为1.0mL·min-1,检测波长为252nm,柱温为室温,进样量为10μL。结果:咖啡酸四聚体、丹酚酸B的进样量分别在0.065～1.82、0.205～5.74μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.9996、0.9997);平均回收率分别为98.72%(RSD=3.27%,n=9)、101.39%(RSD=1.81%,n=9)。结论:本方法简便、可靠、结果稳定、重复性好,可用于复方紫草颗粒的质量控制。关键词复方紫草颗粒;高效液相色谱法;咖啡酸四聚体;丹酚酸B;

HPLC法测定复方紫草颗粒中咖啡酸四聚体异构体

目的建立HPLC法测定复方紫草颗粒剂中咖啡酸四聚体异构体的方法。方法YMCODS-AC-18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相：甲醇-0．5％磷酸水（40：60）；体积流量：1mL／min；检测波长：252nm，柱温：室温；进样量：10μL。结果咖啡酸四聚体异构体在0．052-1.65μg与峰面积值呈良好的线性关系。平均回收率为101．8％，RSD为2．46％。结论本方法简便可靠，结果稳定，重复性好，可用于测定复方紫草颗粒剂中咖啡酸四聚体异构体。

RRLC-MS/MS法测定大鼠血浆中咖啡酸四聚体的含量及药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中咖啡酸四聚体（CAT）的测定方法,并研究其药代动力学。方法：大鼠尾静脉注射CAT后不同时间经眼静脉采血,血浆样品经液-液萃取后,采用RRLC-MS/MS法,色谱柱为Agilent SB-C18（4.6 mm×100 mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸溶液（A）-乙腈（B）,梯度洗脱（0~3 min,68%A;3~6.5 min,68%A→2%A;6.5~10 min,2%A）,流速0.4 mL·min-1,柱温30℃,进样量10μL;质谱采用电喷雾离子源（ESI源）,正离子模式检测,扫描方式为多反应监测（MRM）。结果：咖啡酸四聚体检测限和最低定量限分别为5.7和11.4 ng·mL-1;在11.4~1420 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好（r=0.9991）;提取回收率为85.2%~97.1%;药动学参数：AUC0-t为（1.25±0.25）mg·L-1·h,t1/2为（4.66±1,07）h-1,K为（0.15±0.04）h-1,CLz为（3.19±0.52）L·h-1·kg-1,Vz为（1.87±0.59）L·kg-1。结论：本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于咖啡酸四聚体的血药浓度测定。

新疆软紫草水溶性化学成分的研究

目的:研究新疆软紫草的水溶性化学成分。方法:采用MCL-Gel CHP 20P,Sephadex LH-20和ODS柱色谱技术进行分离纯化,用光谱方法(IR、1H-NMR、13C-NMR、MS)鉴定结构。结果:分离得到3个酚酸类化合物,其结构分别为:化合物Ⅰ[2-(3′-甲氧基-4′-羟基)-苯基-3-羟甲基-6-甲氧基-5-苯并呋喃甲酸]、化合物Ⅱ(咖啡酸四聚体)和化合物Ⅲ(咖啡酸四聚体同分异构体)。结论:化合物Ⅰ为首次从该植物中分离得到。

复方紫草颗粒剂提取工艺

为优选复方紫草颗粒剂最佳提取工艺。采用正交试验法,以咖啡酸四聚体,丹酚酸B、浸膏得率为指标,多指标综合评分,优选复方紫草颗粒剂水提取工艺条件。结果表明复方紫草颗粒剂水提取的最佳条件为:16倍量的水,煎煮3次,每次煎煮1h。因此可知,该工艺简单、可行,收率高。

正交试验设计优选紫草复方的水提工艺

目的:研究紫草复方的水提取工艺条件和高效液相色谱法同时测定咖啡酸四聚体、丹酚酸B含量的方法。方法:采用正交试验设计法,分别考察加水量、煎煮时间、煎煮次数对咖啡酸四聚体、丹酚酸B含量和浸膏得率的影响,分别赋予咖啡酸四聚体、丹酚酸B含量和浸膏得率不同的权重系数(依次为0.4、0.4、0.2),进行多指标综合评分。结果:测定的流动相为甲醇∶0.5%磷酸水=40∶60;流速1ml/min,检测波长252nm。优化工艺条件为加16倍量的水,煎煮3次,每次1h。结论:高效液相色谱法同时测定咖啡酸四聚体、丹酚酸B含量的方法准确,线性好,该工艺稳定、简便。

新疆紫草总酚酸提取物指纹图谱建立及4种成分测定

目的建立新疆紫草总酚酸提取物HPLC指纹图谱,并测定总酚酸、咖啡酸、咖啡酸四聚体、紫草酸的含有量。方法新疆紫草总酚酸提取物70%乙醇溶液的分析采用Waters Symmtry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈⁃0.05%甲酸水,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长220 nm。结果9批样品指纹图谱中共有8个特征峰。总酚酸、咖啡酸、咖啡酸四聚体、紫草酸的含有量分别为55.62%~62.84%、0.20%~0.23%、18.55%~25.49%、0.46%~0.77%。结论该方法稳定可靠,可用于新疆紫草的质量控制。

高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱分析紫草中酚酸类化合物

目的:采用LC-HR-MS/MS技术研究紫草中酚酸类化学成分。方法:采用LC-HR-MS/MS法,使用C18(4.6 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.4 m L·min^(-1),柱温30℃,进样量10μL;质谱条件:HESI离子源;正负离子扫描模式;雾化温度为300℃;离子传输管温度为380℃,质量扫描范围为m/z 100~1 500。结果:以酚酸类化合物的质谱裂解规律为指导,参照紫草中已报道成分的质谱数据,分析推断了紫草中可能含有紫草酸、咖啡酸四聚体、迷迭香酸、和丹酚酸C等9个化学成分。结论:本实验建立的分析方法能够较全面地反映出紫草中酚酸类的化学成分,为进一步开发利用该药材提供实验依据。