雷公藤内酯醇对牛晶状体上皮细胞增殖及胞浆内游离Ca^(2+)浓度的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(Tri)对牛晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LECs)增殖的影响及可能的机制。方法:取体外培养的第4代牛LECs,分5组培养。空白对照组:以DMEM培养;增殖对照组:以DMEM+50μg/L rhEGF培养;Tri高、中、低剂量组分别以含50μg/L rhEGF和40μg/L、20μg/L、10μg/L Tri的DMEM培养。分组培养6h、12h、24h、48h、72h后用MTT比色法及流式细胞仪检测细胞增殖抑制率和增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达率;用荧光指示剂Fura-2/AM测定空白对照组、增殖对照组、Tri中剂量组分组培养48h后胞内游离Ca^(2+)浓度。结果:随着作用时间的延长和浓度的增加,Tri对rhEGF诱导的LECs增殖的抑制率逐渐增大;Tri各剂量组PCNA阳性表达率低于增殖对照组;Tri中剂量组胞内Ca^(2+)浓度高于增殖对照组和空白对照组。结论:Tri对LECs的增殖有明显的抑制作用,该作用可能通过影响胞内Ca^(2+)浓度来完成。

年龄相关性白内障晶状体前囊膜中核因子kB的免疫组化研究

目的：研究核因子kB蛋白在正常人、年龄相关性白内障的晶状体前囊膜上皮细胞中表达的差异，探讨NF—kB在年龄相关性白内障发病机制中的作用。方法：显微镜下随机收集年龄相关性白内障前囊膜组织30例为病例组及透明晶状体前囊膜组织5例为正常对照组，采用免疫组织化学方法检测NF—kB P65蛋白的表达。结果：正常品状体前囊膜上皮细胞胞质和胞核中可见NF—kB P65蛋白阳性表达，以胞质为主；年龄相关性白内障晶状体前囊膜上皮细胞胞质和胞核染色呈阳性且以胞核为主。图像分析表明病例组NF—kB P65平均吸光度值高于对照组，差异有统计学意义（t=6．2109，P〈0．05）。结论：NF＋kB表达水平升高与年龄相关性白内障发病密切相关，其表达异常可能参与年龄相关性白内障的发生与发展。

大鼠晶状体囊外摘出术后LECs基因差异表达的研究

目的探讨采用基因芯片技术检测大鼠晶状体囊外摘出术(ECLE)后晶状体上皮细胞(LECs)基因表达的差异。方法20只SD大鼠随机分成4组,双眼行ECLE;分别于手术后即刻及1、7、14d处死大鼠,完整取出囊膜;用含有5705个大鼠基因探针的芯片分别检测术后1、7、14d与术后即刻组相比较的基因表达差异;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证芯片检测结果。结果所有大鼠均成功施行双眼ECLE手术,术后出现PCO及晶状体物质再生。芯片实验质量控制可靠,结果可信。术后3个时间点差异表达基因共694条。发生差异表达的基因范围非常广泛,涉及所有细胞功能类别。结论成功地建立了大鼠ECLE术后PCO及晶状体物质再生模型。大鼠ECLE术后LECs基因差异表达极其复杂,提示PCO及晶状体再生的分子机制复杂,调控因素多。