中国主要油茶产区山茶炭疽菌群体遗传结构分析

以中国主要油茶产区的油茶(Camellia oleifera Abel.)炭疽病优势种山茶炭疽菌(Colletotrichum camelliae)的16个地理种群168个菌株为供试材料,应用ISSR分子标记技术进行遗传多样性和种群遗传结构分析。16个地理种群的多态位点百分比(PPB)为98.99%,Nei’s基因多样性指数(He)为0.28,Shannon信息多样性指数(Is)为0.43,遗传相似度(I)平均为0.834,遗传距离(D)平均为0.183,表明山茶炭疽菌遗传多样性水平较高且异质性较强,种群间存在一定程度的遗传变异,遗传距离与地理距离之间无相关性。湖北省、浙江省、江西省、湖南省和广西5个省级种群总基因多样度(Ht)为0.274 8,遗传分化系数(Gst)为0.517 4,基因流(Nm)为0.466 4,表明山茶炭疽菌5个省级种群虽然被分化,但是不存在基因流动现象(Nm<1)。

八角炭疽病菌哈锐炭疽菌生物学特性

哈锐炭疽菌Colletotrichum horii是在广西新发现的引起八角Illicium verum炭疽病的病原,为有效防治八角炭疽病提供病原学基础,主要研究了温湿度、碳氮源和光照对哈锐炭疽菌菌丝生长、产孢及孢子萌发的影响。结果表明:该菌菌丝生长和产生分生孢子温度为10~35℃,最适温度30℃;分生孢子在水滴中萌发率最高,为94.83%;对葡萄糖、D-木糖和蔗糖利用最好,可溶性淀粉和阿拉伯树胶粉利用最差,但能促进产孢;对牛肉膏利用最好,硫酸铵利用效果最差,产孢量最大;光照能加速菌丝生长,但不利于产孢。

16种杀菌剂对柿树炭疽病菌哈锐炭疽菌的抑制效果

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定了16种常用杀菌剂对柿树炭疽病菌哈锐炭疽菌(Colletotrichum horii)菌丝生长及孢子萌发的影响。结果显示,16种常用杀菌剂中,10%苯醚甲环唑散粒剂、33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油、70%代森锰锌可湿性粉剂、430 g·L^(-1)戊唑醇悬浮剂、50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂、400 g·L^(-1)氟硅唑乳油、250 g·L^(-1)己唑醇悬浮剂、70%代森联水分散粒剂、22%多菌灵+8%戊唑醇(福连)和50%福美双可湿性粉剂等11种杀菌剂对菌丝生长抑制效果较好,抑制率为95.63%~100%;70%代森联水分散粒剂、33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油、70%代森锰锌可湿性粉剂、50%氯溴异氰尿酸水溶性粉剂、50%福美双可湿性粉剂和400 g·L^(-1)氟硅唑乳油等7种药剂处理对病原菌分生孢子抑制效果较好,分生孢子萌发率为0~3.33%。其中,33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油、70%代森锰锌可湿性粉剂和400g·L^(-1)氟硅唑乳油对柿树炭疽病菌菌丝生长和产孢的抑制效果均较好,可作为防治柿树炭疽病的优选药剂,其次为70%代森联水分散粒剂和50%福美双可湿性粉剂,可作为备选药剂。该研究结果可为柿树炭疽病的有效防治提供科学依据和试验数据。

根癌农杆菌介导的香蕉炭疽菌转化

利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化方法,以香蕉炭疽菌(Colletotrichum musae)的分生孢子为受体,pTHPR1为双元载体,成功实现了植物病原真菌香蕉炭疽菌的遗传转化.在诱导培养基pH 5.6、乙酰丁香酮200μg/mL、共培养时间24 h等适宜条件下,最高转化率可达260个转化子/106个孢子.对转化子的PCR检测表明,T-DNA已整合到香蕉炭疽菌的基因组中,转化子的遗传表现稳定.

希金斯炭疽菌14-3-3蛋白质生物信息学分析

希金斯炭疽菌(Colletotrichum higginsanum Sacc.)可以侵染菜心、萝卜等十字花科蔬菜引起炭疽病,不仅降低蔬菜的产量,还影响蔬菜的品质。基于酿酒酵母中2个典型14-3-3蛋白质序列,利用Blastp以及关键词对炭疽菌属蛋白质数据库进行搜索,明确该菌存在2个典型的14-3-3蛋白质,分别命名为ChFTT1、ChFTT2;对这两个蛋白质进行理化性质、二级结构、疏水性、信号肽、跨膜结构域以及亚细胞定位等生物信息学分析,可为深入研究希金斯炭疽菌14-3-3蛋白质功能提供参考。

希金斯炭疽菌PITP生物信息学分析

以酿酒酵母中已经报道的5个典型PITP序列为基础,对炭疽菌属蛋白质数据库进行Blastp比对以及关键词搜索,并通过SMART保守结构域分析,明确该菌含有4个典型的PITP;同时,通过对上述氨基酸序列进行疏水性、细胞信号肽、跨膜区结构域、亚细胞定位以及二级结构等生物信息学分析,并与其他物种中15个同源序列进行遗传关系比较分析,以期为深入开展希金斯炭疽菌(Colletotrichum higginsanum Sacc.)PITP的功能研究打下理论基础,同时,也为进一步开展其他炭疽菌的研究提供重要的理论指导。

希金斯炭疽菌腺苷酸环化酶生物信息学分析

希金斯炭疽菌(Colletotrichum higginsanum Sacc.)可以侵染菜心、萝卜等众多十字花科蔬菜引起炭疽病,给生产造成巨大的经济损失。通过对该菌中可能的腺苷酸环化酶(AC)氨基酸序列进行理化性质、细胞信号肽、跨膜区结构以及二级结构等生物信息学分析。结果表明,该菌种Ch Cap1,Ch Cap2与Srv2在理化性质、二级结构、亚细胞定位方面差异较大,以期为深入开展AC基因的定位、表达以及功能域等方面研究及为进一步实现以控制病原菌G蛋白信号途径功能新药物靶标的开发提供有力的理论支撑。

巴西橡胶树48份野生种质对胶孢炭疽菌抗性评价

选取来自巴西3个州的48份橡胶树(Hevea brasiliensis)野生种质,将胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)活化后进行大田接种鉴定及自然条件评价,以筛选抗性种质。橡胶树种质人工接种大田鉴定结果表明,抗病种质3份,中感种质14份,感病种质25份,高感种质6份;自然评价的结果与大田接种鉴定结果显著相关。3份抗性种质均来自于巴西Rondonia州。

胶孢炭疽菌对核桃叶生理生化特性的影响

以离体的泡核桃(Juglans sigillata Dode)叶为材料,研究了胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)对核桃(Juglans regia L.)叶生理生化指标的影响。结果表明,接种胶孢炭疽菌感病后核桃叶片内超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均随着感病时间的延长呈先升高后降低的趋势,过氧化物酶(POD)活性则随着感病时间的延长呈先下降后升高的趋势,核桃叶发病第三天和第五天的SOD、POD和CAT活性均显著高于对照;丙二醛(MDA)、可溶性蛋白质和可溶性糖含量均随着核桃叶感病时间的延长呈现出升高的趋势,其中,MDA含量在感病的第三天和第五天均显著高于对照,而可溶性蛋白质和可溶性糖含量与对照差异不显著;叶绿素含量随着核桃叶感病时间的延长而下降,在感病第五天叶绿素含量显著低于对照;感病核桃叶的净光合速率显著低于对照,气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率则与对照差异不显著。可见,胶孢炭疽菌感染对泡核桃叶片的生理生化特性有显著影响。

甜柿炭疽病病原种类及生物学特性比较

【目的】明确浙江金华太秋甜柿果实炭疽病主要病原种类,探究不同病原菌生物学特性的差异,为甜柿炭疽病防治提供科学依据。【方法】2021年6—10月,通过对浙江金华永康太秋甜柿生长期果实炭疽病病样的采集和分离,致病性测定和系统发育分析,确定其主要病原菌种类;通过对不同甜柿炭疽病病原菌在不同温度、pH值、培养基类型、光照等培养条件和致死温度的测定,揭示不同种之间的差异。【结果】3种甜柿炭疽病菌(Colletotrichum horii、C. siamense和C. fructicola)为浙江金华太秋甜柿果实炭疽病主要病原菌,其中暹罗刺盘孢引起太秋甜柿炭疽病为国内首次报道。生物学特性研究表明,果生刺盘孢、哈锐炭疽菌和暹罗刺盘孢最适生长温度为30℃,最适产孢温度为35℃,哈锐炭疽菌最适产孢温度为25℃;果生刺盘孢和暹罗刺盘孢菌丝生长最佳培养基为PDA、CMA和GA,果生刺盘孢产孢最佳培养基为胡萝卜煎汁培养基,暹罗刺盘孢产孢最佳培养基为CMA培养基;哈锐炭疽菌菌丝生长最佳培养基为PDA和CA,产孢最佳培养基为OA培养基。pH值4~10均适宜甜柿炭疽病菌菌丝生长,果生刺盘孢在pH值5和9时产孢最佳,暹罗刺盘孢和哈锐炭疽菌在pH值9和10时产孢最佳;光照对太秋甜柿炭疽病菌菌丝生长无影响,但对不同的炭疽病菌的产孢影响较大,持续光照有利于果生刺盘孢产孢,光照黑暗交替可刺激哈锐炭疽菌产孢,光照对暹罗刺盘孢的产孢影响不大;果生刺盘孢分生孢子的致死温度为47.9℃10 min,哈锐炭疽菌和暹罗刺盘孢分生孢子的致死温度为49.2℃10 min。【结论】首次研究明确3种甜柿炭疽病病原菌的生物学特性差异。

贵州百香果果实炭疽病病原菌分离及鉴定

炭疽病是贵州百香果果实重要病害之一。采用组织分离法,从贵州百香果炭疽病病果中分离到疑似炭疽菌株B10、ZB3,根据分离纯化菌株的形态特征、柯赫氏法则验证,以及基于ITS-TUB2-ACT-CHS-1多基因序列系统发育树分析,明确引起贵州产区百香果果实炭疽病病原主要为巴西炭疽菌Colletotrichum brasiliense和喀斯特炭疽菌C.karstii。

富平尖柿炭疽病病原菌鉴定及其生物学特性

为了解引起富平尖柿炭疽病的病原菌种类及其生物学特性,本试验采集发生炭疽病的柿树秋梢,按照稀释分离法分离病原菌,观察其形态学特征,利用真菌通用引物(ITS1/ITS4)和胶孢炭疽菌特异性引物(Cg Int/ITS4)进行分子生物学鉴定,并在PDA培养基上进行孢子萌发和菌丝生长生物学特性研究,以及通过有伤接种试验确定病原菌致病性。结果表明,引起富平尖柿炭疽病的病原菌为刺盘孢属(Colletotrichum)哈锐炭疽菌(Colletotrichum horii);哈锐炭疽菌菌丝生长和孢子萌发最适温度为25℃左右;该病原菌对富平尖柿致病力强,适宜温度湿度极易引起炭疽病。

湖北省草莓炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性

由炭疽属真菌（ Colletotrichum spp.）引起的炭疽病是草莓育苗期的主要病害，在世界各地普遍发生。采用菌丝生长速率法，测定了湖北省内17个不同地区采集分离的103株草莓炭疽病菌株对咪鲜胺的敏感性。结果显示：咪鲜胺对湖北省草莓炭疽病菌的EC50值分布范围为0.0142~0.2156μg/mL，平均值为（0.0938±0.0299）μg/mL，其敏感性频率符合正态分布，因此可将该EC50平均值作为湖北省草莓炭疽病原菌群体对咪鲜胺敏感基线的参考值。

柿炭疽病研究进展

概述了柿炭疽病病原的命名发展过程、病原种类的多样性、侵染过程和分子生物学研究等方面的重要成果,特别是病原侵染过程的细胞学研究与其他炭疽菌侵染过程的异同、致病相关基因的克隆与功能分析方面,并对今后柿炭疽病的研究方向进行了展望。

一种八角炭疽病新病原鉴定

【目的】通过研究八角炭疽病病原菌,为防治八角炭疽病提供病原学基础。【方法】对采自广西玉林、崇左、河池、百色、防城港等市八角炭疽病样本,进行单孢分离,致病性测定,采用形态学特征结合病原菌核糖体内转录间隔区(ITS)、微管蛋白(TUB2)、肌动蛋白(ACT)和3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPDH)多基因分子系统学的方法对分离菌株进行鉴定。【结果】菌株在PDA培养基25℃暗培养7 d后,菌落呈圆形,灰白色至灰黑色,分生孢子无色单细胞,圆柱状,顶端钝圆,基部平截,光滑,大小为(17.09±1.11)μm×(5.26±0.55)μm,分生孢子附着孢近椭圆形,浅褐色,边缘光滑完整,大小为(7.72±0.77)μm×(5.45±0.68)μm;病原菌ITS、TUB2、ACT和GPDH四基因联合系统发育树显示,供试菌株与包括模式菌株在内的哈锐炭疽菌(Colletotrichum horii Weir&Johnst)聚在同一进化分支上。【结论】确定八角炭疽病病原菌为哈锐炭疽菌(Colletotrichum horii),其为八角炭疽病一种新的病原。

柿树炭疽病菌的生物学特性及其抑菌药剂筛选

通过十字交叉法和血球计数板法测定柿树炭疽病菌Colleltrichum horri的生物学特性,采用菌丝生长速率法和孢子萌发法分别测定16种常用杀菌剂对该菌菌丝生长的抑制作用和对孢子萌发的影响。柿树炭疽病菌菌丝生长的最适温度为25℃,最适产孢温度为28℃,适合菌丝生长的pH值为4.0-6.0,最适产孢pH值为4.0;最佳碳源为葡萄糖和麦芽糖,最佳氮源为牛肉膏。16种常用杀菌剂中,33.5%喹啉铜悬浮剂、25%溴菌腈乳油和70%代森锰锌可湿性粉剂对柿树炭疽病菌菌丝生长和产孢的抑制效果最好,可作为防治柿树炭疽病的优选药剂,其次为70%代森联水分散粒剂、400g·L^-1氟硅唑乳油和50%福美双可湿性粉剂,可作为备选药剂。该研究结果可为柿树炭疽病的有效防治提供依据。

金钗石斛炭疽病病原鉴定及杀菌剂毒力测定

近年贵州赤水市种植的金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl)炭疽病(烟煤病)发生较多,该病害分布广、危害严重。对金钗石斛炭疽病菌的生物学特性、培养性状及形态等研究,初步确定病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),结合ITS序列分析,确定该致病菌为胶孢炭疽菌。杀菌剂室内抑菌试验结果表明多菌灵对其有较好的抑制作用。

胶孢炭疽菌微管末端结合蛋白CgEB1的功能初步分析

在橡胶树胶孢炭疽菌基因组中鉴定到一个编码微管末端结合蛋白的基因CgEB1。为了研究CgEB1在胶孢炭疽菌生长和对寄主致病力中的作用,本研究构建了该基因的敲除突变体菌株ΔCgEB1,并对其生长和致病等表型进行了进一步的分析。结果发现,CgEB1的缺失导致病原菌的营养生长、产孢及其对寄主橡胶树叶片的致病力都受到明显的抑制。通过对附着胞结构的观测,发现敲除突变体菌株ΔCgEB1中附着胞形成率和对洋葱表皮细胞的入侵率都显著下降。此外,与野生型菌株WT相比,敲除突变体菌株ΔCgEB1对盐胁迫更加敏感。以上结果表明CgEB1是胶孢炭疽菌重要的致病因子。

枯草芽孢杆菌Bs-15对柿树炭疽病的离体防治效果

为探讨枯草芽孢杆菌Bs-15对柿树炭疽病的防治潜能,通过平板对峙试验研究Bs-15对柿树炭疽病菌的抑制作用,并通过离体接种试验,研究Bs-15对柿树炭疽病的防治效果。结果显示,在对峙平板中形成稳定而明显的抑菌带,宽为(0.56±0.05)cm;离体接种试验中,先接种Bs-15菌悬液后接种菌饼处理比先接种菌饼再接种Bs-15菌悬液处理对柿树炭疽病的防治效果好,其抑制率分别为54.76%和47.62%,防治效果分别为78.54%和70.04%,说明枯草芽孢杆菌Bs-15可能通过产生诱导抗性提高防效。本试验结果表明,枯草芽孢杆菌Bs-15对柿树炭疽病有较好的防治效果,可作为潜在的生防菌株,为柿树炭疽病的防治提供新的途径和方法。

番木瓜炭疽病生防木霉菌株的初步筛选

为利用生物防治的方法抑制番木瓜炭疽病,通过测定并综合分析比较各木霉菌株的抗生作用、产孢量、不同培养基下的抑菌率、生长速度以及耐药性,从90株木霉菌株中初步筛选出拮抗番木瓜炭疽菌的优良木霉菌(Trichodermaspp.)T05-049、T8-R、T05-035和T05-044等4株菌株,其产孢量分别为1.42×109、5.45×108、4.16×108、1.38×109;在1.01 mg/L特可多的条件下,均生长良好;该4个菌株在25、20、15和10℃下生长正常,耐温性较好,对炭疽菌(Colletotrichumspp.)的抗生作用分别为3、1、1、5;分别在PDA和番木瓜培养基上于25、20和15℃下培养,木霉对胶孢炭疽菌(C.gleosporioides)的抑制率在57.05%以上,对辣椒炭疽菌(C.capcisi)的抵制率在47.87%以上.