从噬菌体显示程序中筛选抗响尾蛇毒素的组合抗体的特异性和结合亲和性

我们用 Pharmacia公司的重组噬菌体抗体系统的组合方法制出一种对响尾蛇毒素特异的、具有高亲和力的单克隆单链抗体可变区 (sc Fv)。筛选出一个高亲和力的克隆 ,编号为 A1 0 G,对其 DNA进行了测序。A1 0 G蛋白显示出高的反应特异性 ,只与响尾蛇神经毒素、concolor毒素和 Mojave毒素有密切的关系。用第二组磷脂酶 A2 s (PLA2 s)筛选 ,与 1 1种显示出交叉反应。第一组磷脂酶 A2 s (PLA2 s)在 ELISA中有交叉反应。编码A1 0 G的基因被亚克隆到一个表达载体 ,结果表达非融合蛋白 ,标记为 A1 0 GPE,复性、纯化至表面均一性。A1 0 G与完整响尾蛇毒素和响尾蛇毒素基本亚单位的解离常数分别为 7× 1 0 - 1 0 M和 6.8× 1 0 - 9M。当 A1 0 GPE与响尾蛇毒素基本亚单位或响尾蛇全毒素以摩尔比 5 :1预先孵育 ,则没有抑制磷脂酶活性现象。然而 ,表达蛋白可以在小鼠中部分中和响尾蛇毒素同系物

南美洲响尾蛇神经毒素对丘脑束旁核神经元痛诱发放电的影响

目的以大鼠丘脑束旁核(Pf)神经元痛诱发放电为指标,来验证南美洲响尾蛇神经毒素(crotoxin)的镇痛作用。方法用玻璃微电极细胞外记录Pf神经元的单位放电,用电脉冲刺激坐骨神经作为伤害性刺激,诱发伤害性反应,观察侧脑室注射(i.c.v.)不同剂量crotoxin后痛诱发放电的变化。用i.c.v.注射生理盐水作为阴性对照,i.c.v.注射吗啡作为阳性对照。结果(1)侧脑室注射大剂量crotoxin(0.65μg/kg)后,Pf神经元的痛放电频率和持续时间明显降低,但放电潜伏期延长;(2)侧脑室注射中等剂量(0.4μg/kg)和小剂量(0.2μg/kg)crotoxin后,Pf神经元的痛放电频率和持续时间也降低,潜伏期也延长,但幅度依次递减。结论crotoxin对丘脑Pf神经元的痛诱发放电有明显的抑制作用,提示crotoxin有镇痛作用,且这种镇痛作用有一定的剂量依赖性。

肉毒梭菌毒素引起的食物中毒报告

肉毒梭菌系厌氧菌中致病性极强的一种革兰氏阳性粗大芽胞杆菌。本菌为腐生菌,很少引起感染。当摄入含毒素的食物,如:罐头、火腿、腊肠、发酵的豆制品和面制品等,即可发生食物中毒。该菌产生的毒素是极强烈的外毒素,比氰化钾强一万倍,比响尾蛇毒素高10万倍,对人的致死量为0.1～1.0g。因此对该菌的快速准确诊断,一直是微生物工作者的研究课题。2000年黑龙江省木兰县一家三口人因食用自制臭豆腐引起中毒,不同程度的出现临床中毒症状,我们接到报告后,及时取样、检验,为临床提供科学依据,把病人从死亡线上挽救回来。

南美响尾蛇神经毒素对吉非替尼诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡的影响

目的探讨南美响尾蛇神经毒素(crotoxin)对吉非替尼(iressa)诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡及其对吉非替尼的抗肿瘤效果的影响。方法应用MTT法和流式细胞仪annexinV-PI双标法研究crotoxin及其与iressa联用对人肺鳞癌SK-MES-1细胞促凋亡作用。结果 Crotoxin作用浓度大于或等于25μg/ml时对人肺鳞癌SK-MES-1细胞有明显生长抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),与iressa联合作用明显高于单用crotoxin和iressa,其Q值均在0.85～1.15之间,两者呈现出相加的抗肿瘤效果。结论 Crotoxin对人肺鳞癌SK-MES-1细胞的生长有抑制作用,并呈浓度依赖性,与iressa联合应用对人肺鳞癌SK-MES-1细胞有明显的促凋亡作用。

南美响尾蛇神经毒素联合吉非替尼对人肺腺癌A549细胞的作用

目的探讨南美响尾蛇神经毒素(Crotoxin)对人肺腺癌A549细胞的作用及其对吉非替尼(Iressa)的抗肿瘤效果。方法通过细胞生长抑制实验和细胞集落形成实验观察Crotoxin及其与Iressa联用对人肺腺癌A549细胞的作用,生长抑制实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,集落形成实验采用平板克隆法。结果Crotoxin对人胚肺成纤维细胞的生长无明显影响,但可明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,与Iressa联用可增强Iressa的抗肿瘤效果。结论Crotoxin对人肺腺癌A549细胞的生长有抑制作用,与Iressa联用效应为协同或相加。

动物毒素的治病魔力

成千上万年的演化历程,把动物毒素磨炼得非常高效。如果被南美洲响尾蛇咬一口,那肯定会很难受,因为它们有毒。更可怕的是,你还根本不知道它们在哪儿,它们可能已经用位于其眼睛下面的高度敏感的一对红外感测器感受到了你的体热。几乎所有人都不想碰到蛇,尤其是如此剧毒的蛇。不过,颇具讽刺意义的是,响尾蛇的毒素赋予了我们一种治疗高血压的良药。