响应面法优化有机溶剂极端耐受性菌株 Burkholderia sp.ZYB002产脂肪酶条件

Burkholderia sp.脂肪酶具有较高的有机溶剂耐受性和转酯活性,广泛应用于手性化合物的拆分。本研究利用统计学方法对一株具有有机溶剂极端耐受性的脂肪酶高产菌株Burkholderia sp.ZYB002在摇瓶培养条件下产脂肪酶条件进行了优化。通过单因素实验,首先确定了最适碳源、氮源、诱导剂等。以Plackett-Burrman设计筛选影响Burkholderia sp.ZYB002产酶的主要因素,通过最陡爬坡实验和响应面分析法确定产酶最适条件。K_2HPO_4、大豆油乳化液和起始pH确定为影响菌株产酶的3个主效因素。最佳产酶条件为:糊精0.3%(W/V),牛肉膏2.0%(W/V),MgSO_4.7H_2O 0.075%(W/V),K_2HPO_40.14%(W/V),大豆油乳化液4.89%(V/V),pH 8.11,玻璃珠10颗/瓶,接种量2.0%(V/V),30℃,250r/min,发酵时间22h。在此条件下,发酵液脂肪酶酶活最高达45.6U/mL,较发酵基本培养基发酵液的脂肪酶酶活提高了3.44倍。