一种基于哑铃型DNA探针检测碱性磷酸酶的非标荧光传感方法

以哑铃型(DS)DNA链作信号探针,基于DNA连接反应调控核酸外切酶作用的原理,发展了一种高灵敏、非标记检测碱性磷酸酶(ALP)的荧光传感方法。无目标ALP(CIP)时,连接反应将DS探针缺口缝合,形成哑铃状闭合DNA,阻止外切酶的酶切,嵌入SYBR Green I(SG I)后,得到显著的荧光信号,荧光强度与CIP浓度成反比。CIP检测的线性范围为0.00004~0.002 U/mL,检测限为2×10^(-5) U/mL。该方法具有高灵敏、高选择性和低成本的特点,可适用于ALP活性抑制剂的筛选。