柴朴汤对哮喘豚鼠肺内嗜酸粒细胞凋亡及气道重塑的影响

目的:研究柴朴汤对哮喘豚鼠肺内嗜酸粒细胞(EOS)凋亡及气道重塑的影响。方法:将2 7只豚鼠随机分成三组,每组9只:即对照组,模型组,柴朴汤组。以HE染色观察气道重塑,以TUNEL法标记肺内EOS凋亡,以免疫组化标记Fas抗原表达。结果:模型组EOS凋亡指数(0 14±0 0 2 ) % ,Fas抗原表达(1 2 9±1 86 ) %细胞,柴朴汤组EOS凋亡指数(2 6 3±0 35 ) % ,Fas抗原阳性表达(8 11±3 6 ) %的细胞,两组有显著性差异(P <0 0 5 ) ,并且EOS凋亡指数与表达Fas阳性的细胞比例呈显著正相关;柴朴汤组气道重塑指标明显低于模型组,两组相比有显著性差异(P<0 0 5 )。结论:柴朴汤可诱导哮喘豚鼠的肺内EOS凋亡,抑制气道重塑。

中药咳喘方对哮喘豚鼠肺组织病理学影响的研究

[目的]以卵蛋白致敏的哮喘豚鼠为动物模型,观察中药咳喘方对哮喘豚鼠肺组织病理学变化的影响。[方法]正常雄性豚鼠60只,体质量(300±20)g,随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组、咳喘方组,每组各15只。验组分别给予泼尼松、咳喘方水煎剂(黄芩、地龙、杏仁、麻黄、当归、细辛、半夏等),连续灌胃给药14d,观察实验动物肺组织病理学变化。[结果]对照组肺及支气管结构正常,各级支气管上皮完整,肺泡间隔正常,少量炎细胞浸润。模型组支气管管腔狭窄,管壁增厚,黏膜皱襞增多,部分脱落;杯状细胞明显增加;气道壁大量嗜酸性粒细胞浸润;肺泡间隔增宽,其中可见嗜酸性粒细胞;部分肺泡腔变小。泼尼松组支气管黏膜皱襞增多,部分脱落,管壁轻度增厚,管腔轻度狭窄。咳喘方组支气管黏膜上皮轻度增厚,气道壁炎细胞浸润较轻,肺泡间隔明显变薄,肺泡腔趋于正常,其间有少量嗜酸性粒细胞浸润。[结论]中药咳喘方能显著改善哮喘豚鼠肺组织病理学变化,其作用优于泼尼松组。

复方辛夷平喘液对哮喘豚鼠肺内LCA及淋巴细胞Fas表达的影响

目的:观察中药复方辛夷平喘液对实验性哮喘豚鼠肺内LCA及淋巴细胞Fas表达的影响,探讨中药治疗哮喘的机理。方法:实验设空白组、哮喘模型组、中药3个剂量组及对照组。免疫组化法检测豚鼠肺内LCA,流式细胞仪检测外周血淋巴细胞Fas表达。结果:(1)免疫组化见模型组肺泡内有阳性细胞,支气管壁及管周见较多阳性细胞,较空白组明显增高;复方辛夷平喘液各组阳性表达较空白组高,但低于模型组。(2)哮喘模型组淋巴细胞的fas表达较空白对照组下降明显(P<0.01),复方辛夷平喘液各组fas表达水平较模型组均显著提高(P<0.01)。结论:哮喘豚鼠存在肺内LCA高表达、血淋巴细胞fas低表达;复方辛夷平喘液下调LCA表达、上调Fas表达可能是其控制哮喘的作用途径之一。

哮喘豚鼠初级传入神经元ERK的表达及NGF的调节作用

目的 探讨细胞外信号调节蛋白激酶 (ERK)在哮喘豚鼠初级传入神经元 (C7 T5脊神经节 )的表达及神经生长因子 (NGF)对ERK的调节作用。方法 利用免疫组织化学结合显微图像分析 ,研究哮喘豚鼠C7 T5脊神经节活化的ERK免疫反应变化。结果 与对照组相比 ,哮喘组豚鼠活化ERK免疫反应在C7 T5脊神经节神经元核内明显上调 (P <0 .0 1) ,其阳性细胞比率明显高于对照组。Anti NGF组豚鼠活化ERK免疫反应在C7 T5脊神经节神经元的核中明显低于哮喘组 (P <0 .0 1)。结论 C7 T5脊神经节神经元活化的ERK可能参与哮喘的发病过程 ,NGF可上调哮喘豚鼠C7

穴位敷贴对过敏性哮喘豚鼠血浆及支气管肺泡灌洗液前列腺素F_(2α)、E_2的影响

本研究采用的敷贴疗法是在总结多年的“天灸”治哮经验基础上改进而来。缘其兼具针灸、中药双重治病优势,临床疗效满意。为探索穴位敷贴的治病机制,本研究以炎性介质为指标,在造成实验性豚鼠哮喘模型的基础上,观察穴位敷贴对前列腺素介质的影响。材料和方法1 敷贴药物组成及制备麻黄20g 细辛10g 防风10g延胡索加g 甘遂10g 白芥子30g,将以上各药用微型粉碎机共研为末,充分混匀,置4℃冰箱备用。称之为赖氏Ⅰ号方。2 造模及分组方法健康雄性豚鼠(具一级动物合格证书,我院动物实验中心提供)25只,体重350～400g。

不同工艺消喘贴膏对哮喘豚鼠引喘潜伏期及皮肤刺激性的影响

目的通过观察不同工艺消喘贴膏(止咳化痰中药方剂)对豚鼠哮喘潜伏期的影响及家兔皮肤刺激性对比研究。方法观察新旧工艺消喘贴膏对豚鼠哮喘模型的抑制作用;同时用家兔进行完整皮肤与破损皮肤的刺激性试验。结果消喘贴膏的新旧工艺对卵清蛋白致豚鼠哮喘均有显著抑制作用(P<0.01);但2工艺之间的差异未见统计学意义(P>0.05)。对家兔的皮肤均有轻度刺激性;但新工艺的刺激性较小。结论消喘膏工艺的改进能保证治疗作用,同时能降低对皮肤的刺激性。

蛙鸣粉对哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数量影响途径的实验研究

支气管哮喘的气道炎症是由多种炎症细胞、炎症介质和细胞因子参与其炎症过程。实验观察蛙鸣粉对哮喘豚鼠肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EC)数量显著降低,为了探讨降低的途径,因而进行了小鼠免疫功能的测定及抗炎实验。材料1 实验动物昆明种小白鼠,雄性,体重(20±2)g,浙江省药物检验所动物房提供。合格号94103。2 药物中药复方蛙鸣粉,由地龙、防风、蝉蜕、乌梅、钩藤、冬虫夏草等组成,经粉碎过100目筛,水煎,制成含生药1g/ml。环磷酰胺(CTX)、氢化考的松,购于浙江省中医院药房。

马兜铃对哮喘豚鼠肺组织及支气管肺泡灌洗液中细胞数的影响

目的 研究马兜铃对哮喘豚鼠防治作用的影响 ,观察其肺组织学光镜及电镜的变化 ,为中药治疗哮喘提供理论依据。方法 取豚鼠 2 4只 ,分成 3组 (每组 8只 ) ,①哮喘组 :用 4 %卵清白蛋白致敏 ,2周后用1 0 %卵白蛋白超声雾化吸入致其哮喘发作 ;②马兜铃组 :致哮同哮喘组 ,从致敏第 2d起 ,用浓度为 0 2g/mL浓度的马兜铃液 ,按 1g/kg ,每日灌马兜铃药液 1次 ,诱喘同前 ;③正常对照组 :不给予任何处置。结果 哮喘组豚鼠肺组织损害明显 ,气管内膜脱落 ,细胞核浓缩 ,胞浆内大量空泡 ,BALF液中大量细胞浸润。马兜铃组病理改变明显减轻 ,BALF液中细胞浸出减少。

地塞米松对哮喘豚鼠肺及内脏感觉传入系统神经生长因子表达的抑制作用

目的:探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺及内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:利用免疫组织化学和Western印迹方法,观察生理盐水组、单纯致敏组、哮喘组和地塞米松组豚鼠肺及内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)NGF表达的变化。结果:哮喘组豚鼠NGF在肺及内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)表达明显高于对照组,而地塞米松组则明显低于哮喘组。结论:NGF可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠NGF的表达可能是其治疗哮喘的机制之一。

地龙胶囊对哮喘豚鼠肺组织C-JUNmRNA表达的影响

目的:探讨地龙胶囊治疗哮喘的疗效机理.方法:用原位杂交方法检测不同实验组豚鼠肺组织的C-JUN mRNA的表达.结果:哮喘组豚鼠肺组织的C-JUNmRNA呈高表达,尤其是在哮喘激发后24h表达最明显.而其他三组表达不明显.结论:地龙胶囊可以通过改善C-JUNmRNA的表达治疗哮喘.

异丁斯特对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞凋亡的作用及机制

目的：研究异丁斯特（Ibudilast）对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞（eosinophil，EOS）凋亡的作用及机制。方法：Hartley豚鼠，随机分为正常对照组、哮喘模型组、异丁斯特10、20、30mg／kg组及地塞米松（DXM）给药组。采用卵白蛋白致敏法制备豚鼠哮喘模型。给药后，收集支气管肺泡灌洗液（BLAF）并进行白细胞计数及分类计数；TUNEL技术原位检测EOS凋亡；逆转录．多聚酶链反应（ImPCR）技术检测EOSFasmRNA的表达；酶联免疫吸附（ELISA）法测定BLAF中粒细胞-巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）及白介素-5（IL-5）的含量。

止嗽散及其改进方对哮喘豚鼠作用的比较

目的:比较止嗽散及其改进方对由卵蛋白致敏哮喘豚鼠作用的异同。方法:用Wright染色法计血液和肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)的数目。采用放射免疫法和硝酸还原酶法分别测定哮喘豚鼠血清和BALF中内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)的含量。在光镜和电镜下观察哮喘豚鼠肺组织的病理变化。结果:与止嗽散比较,止嗽散改进方(MZ)能够明显减少血液和BALF中EOS的数目,降低哮喘豚鼠血清和BALF中ET-1、NO的含量,减轻哮喘豚鼠肺组织的病理改变。结论:MZ减少哮喘豚鼠体内EOS数目和降低ET-1、NO含量的作用可能与其加入地龙、杏仁等中药有关。

哮喘豚鼠脊神经节和结状神经节内的NKA

应用ＡＢＣ免疫组织化学方法，结合图像定量分析，研究了１８只哮喘豚鼠结状神经节和Ｃ７～Ｔ５段脊神经节内神经激肽Ａ（ＮＫＡ）的变化。结果表明，哮喘时结状神经节及Ｃ７～Ｔ，段脊神经节内ＮＫＡ阳性细胞教分别增加了约３０．６％和３５．１％；ＮＫＡ平均密度分别增加了３５．２％和３１．７％，ＮＫＡ灰度值的改变也有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结果提示一级传入系统的ＮＫＡ可能参与了哮喘发作的病理生理过程。

复方麻辛酊离子导入调节哮喘豚鼠免疫机制的研究

目的:观察复方麻辛酊敷贴离子导入疗法对哮喘豚鼠免疫机制的影响。方法:用复方麻辛酊敷贴离子导入疗法对哮喘豚鼠进行治疗,并与正常组、模型组、离子导入组、敷贴组、口服组、西药组相比较,观察各组动物肺组织环腺核苷酸(cAMP)、环鸟核苷酸(cGMP)、β受体及血浆白介素-2(IL-2)含量的变化。结果:模型组 cAMP、cAMP/cGMP、β受体含量及血浆 IL-2含量较正常组明显降低(P<0.01),治疗组、敷贴组、口服组肺组织 cAMP、cAMP/cGMP、β受体含量、治疗组血浆 IL-2含量均较模型组明显升高(P<0.01)。结论:复方麻辛酊敷贴离子导入疗法能显著提高哮喘豚鼠的免疫功能。

1,25-二羟维生素D3对哮喘豚鼠肥大细胞类胰蛋白酶释放的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3对哮喘豚鼠肥大细胞类胰蛋白酶释放的影响。方法用卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘豚鼠模型。将30只健康豚鼠分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、1,25-二羟维生素D3组(C组),每组10只。A、B组予花生油灌胃;C组予1,25-二羟维生素D3融入花生油灌胃。测定哮喘豚鼠呼气相气道阻力(Re),收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数;肺组织HE染色和免疫组化观察肺组织病理变化及肥大细胞类胰蛋白酶分布情况。结果 C组Re较B组明显降低(P<0.05)。B组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞比例较A组增高(P<0.05),肺组织炎性病变明显;C组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞比例较B组明显降低(P<0.05),肺组织炎性病变减轻。B组Tryptase阳性细胞较A组明显增多(P<0.05),主要分布在气道黏膜下,肺泡间隔及血管周围;C组Tryptase阳性细胞较B组显著减少。结论 1,25-二羟维生素D3可降低哮喘豚鼠气道阻力,减轻肺组织炎症反应,并可抑制肥大细胞释放类胰蛋白酶。

息风定喘方对哮喘豚鼠血清VEGF、EGF、TGF-β2的调节作用

目的研究息风定喘方对哮喘豚鼠血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子β2(TGF-β2)的调节作用,探讨其作用机制。方法将72只普通级雄性豚鼠按照随机数字表法分为正常对照组、寒哮模型组、息风定喘方高剂量组[22.72 g/(kg·d)]、息风定喘方中剂量组[11.36 g/(kg·d)]、息风定喘方低剂量组[5.68 g/(kg·d)],地塞米松组[0.5 mg/(kg·d)],每组12只。除正常对照组外利用卵清蛋白致敏+寒冷刺激复制寒性哮喘豚鼠模型,正常对照组给予等剂量生理盐水,造模成功后于实验第29天起,息风定喘方高、中、低剂量组灌胃给药,正常对照组和寒哮模型组予生理盐水。观察各组豚鼠的一般情况,HE染色法检测息风定喘方对寒性哮喘豚鼠模型的治疗效果;酶联免疫吸附试验分析血清VEGF、EGF、TGF-β2的含量。结果息风定喘方高剂量组豚鼠症状改善情况优于息风定喘方中、低剂量组。与寒哮模型组比较,息风定喘方各剂量组气道改变均有减轻,有不同程度炎症细胞浸润,肺泡间隔厚度降低。与正常对照组比较,寒哮模型组血清中VEGF、EGF、TGF-β2含量显著升高,差异均有高度统计学意义(P<0.01)。与寒哮模型组比较,息风定喘方各剂量组的VEGF、EGF、TGF-β2含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。息风定喘方低、中剂量组血清VEGF含量高于息风定喘方高剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。息风定喘方低剂量组血清EGF含量高于息风定喘方高、中剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。息风定喘方低剂量组血清TGF-β2含量高于息风定喘方高、中剂量组,息风定喘方中剂量组血清TGF-β2含量高于息风定喘方高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论息风定喘方可通过调节VEGF、EGF、TGF-β2含量,达到降低炎症因子水平,控制气道炎症,干预气道重塑的目的。

针药疗法对哮喘豚鼠模型病理学改变的观察

目的 :观察针药疗法在治疗实验性豚鼠哮喘病中的镜下病理学改变。方法 :采用 30只健康豚鼠 ,雌雄各半 ,随机分成五组 :正常对照组 ,阳性对照组 ,针灸组、针灸 +中药组、中药组 ,每组 6只。后四组造支气管哮喘模型 ,正常对照组用生理盐水激发。造模成功后 ,分别给以相应的治疗。豚鼠处死后 ,组织病理切片送实验室进行病理学改变观察。结果 :针灸 +中药组效果最好 ,支气管粘膜见部分上皮脱落 ;支气管腔内未见粘液栓 ;支气管壁有少量炎细胞浸润。针灸组和中药组效果一般 ,但也有上述作用。通过本实验 ,为中西医结合三管齐下治疗哮喘在临床上取得的良好效果提供了动物实验的依据。

哮喘豚鼠肺组织T-bet基因表达的实验研究

目的 探讨哮喘豚鼠肺组织中 T- bet基因 m- RNA的表达水平。方法 采用 RT- PCR技术 ,检测哮喘豚鼠肺组织中 T- bet基因表达水平。结果 哮喘组肺组织中 T- bet基因的表达水平明显低于正常对照组 (p<0 .0 1)。结论 哮喘组肺组织中 T- bet基因的表达水平明显降低。

补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠气道炎症的影响

目的:观察补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸粒细胞(EOS)直接计数和白介素-5(IL-5)的影响,探讨补肺益肾方减轻幼龄哮喘豚鼠气道炎症的机制。方法:24只健康幼龄豚鼠随机分为正常组、模型组、中药组,以卵蛋白致敏激发制备豚鼠哮喘模型,在细胞计数板上计数细胞总数和EOS直接计数,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中IL-5的含量。结果:模型组细胞总数和EOS直接计数高于正常组,中药组细胞总数和EOS直接计数低于模型组;模型组IL-5水平高于正常组,中药组IL-5水平均低于模型组。结论:补肺益肾方可通过降低气道IL-5水平、减少嗜酸性粒细胞浸润来减轻气道炎症,从而达到防治哮喘的目的。