川陕哲罗鱼、太门哲罗鱼及石川哲罗鱼的生物学比较

哲罗鱼属共有五个种类,其中川陕哲罗鱼(Hucho breeker)、太门哲罗鱼(Hucho taimen)、石川哲罗鱼(Hucho ishikawai Mori)在我国境内有分布。本文通过全面收集国内外资料,对我国分布的三种哲罗鱼,从形态特征、生物学特性、分布区域等指标进行了生物学的初步比较研究。

哲罗鱼全人工繁育的初步研究

从乌苏里江捕获体质量0.5～2 kg的野生哲罗鱼(Hucho taimen)幼鱼,经人工培育至性腺成熟后催产获得鱼苗,分别饲养于北京房山鲟鱼基地(水温8～22 ℃)和黑龙江渤海冷水鱼实验站(水温3～18 ℃),观察和测定在人工养殖条件下哲罗鱼的生长和性腺发育,并进行全人工繁殖实验.结果表明,在流水池塘驯养条件下,投喂人工配合颗粒饵料可以保证哲罗鱼的生长能量需求,性腺能够发育成熟.北京房山基地的养殖池,生长适温期较长,5龄鱼体质量可达(5 560±1 353)g,体长(76.85±6.56)cm.黑龙江渤海站的养殖池,生长适温期较短,5龄鱼体质量可达(3 626±1 282)g,体长(67.32±6.13)cm.在黑龙江渤海站饲养的实验鱼,原始生殖细胞出现明显性别分化的时间在出苗后60 d左右,Ⅰ期卵巢的出现期在3～14个月,Ⅱ期卵巢出现期在15～34个月,Ⅲ期卵巢出现期在35～47个月,Ⅳ期卵巢出现期在48～59个月.所得鱼苗经5年多的人工池塘驯养,2006年分别在北京房山基地和黑龙江渤海站成功进行了哲罗鱼的全人工繁殖,为该鱼的规模化养殖提供了实验依据.

哲罗鱼人工繁育技术的初步研究

1997年于乌苏里江段采捕17尾2+～4+龄(体重0.5～2kg)野生哲罗鱼(Huchotaimen),在池塘环境下人工培育。2001年3月挑选3尾7+龄以上、体重超过5kg的雌性个体,用虹鳟脑垂体对其进行催熟。当水温在8℃以上时,胸腔注射人工合成催产药物进行繁殖试验。结果表明,在人工池塘养殖条件下,哲罗鱼性腺可发育至性成熟;催产药物HCG、S GnRH A和DOM的合剂可促使成熟的亲鱼排卵,效应时间11d,产卵量约在1100粒/kg,体重8.7kg和7.4kg雌鱼受精卵分别为56.3%和70.3%,孵化率分别为47.1%和66.7%。从卵受精到仔鱼孵出积温需要281.12TU,到仔鱼全部上浮摄食外源营养需要588.61TU;鱼苗生长到第29天时,开始摄食人工开口饲料。通过驯化养殖,86.7%的鱼苗可摄食人工饲料;鱼苗在水温8～17℃,溶氧7～10mg/L时能快速生长,低于这一温度生长开始减慢,4℃以下生长停滞。

人工养殖条件下哲罗鱼生长的初步研究

哲罗鱼[Hucho taimen(Pallas)]又称太门哲罗鱼,属鲑形目,鲑科,哲罗鱼属,是我国大型的土著名贵冷水性鱼类.由于生态环境遭到破坏,资源量下降,目前仅分布于新疆哈纳斯湖和乌苏里江上游及黑龙江呼玛河段[1],并被列入<中国濒危动物红皮书>[2].

哲罗鱼仔鱼饥饿实验及不可逆生长点的确定

在水温10—12℃条件下,研究了哲罗鱼Hucho taimen仔鱼饥饿对其生长、形态和行为的影响,确定其初次摄食饥饿不可逆点(PNR)和最佳初次摄食时间。结果表明:饥饿状况下哲罗鱼仔鱼全长基本维持恒定,但肥满度不断降低,在第24日龄后体重出现负增长,其卵黄囊吸收与生长变化密切相关;饥饿后的仔鱼身体发黑、头大身瘦、后脑部下陷;集群性、初次摄食力与饥饿时间呈负相关;25日龄出现自残现象,30日龄自残率达到最大值14.5%。哲罗鱼仔鱼初次摄食时间在21日龄,当29日龄摄食率达到最高值100%,PNR期为39—40日龄;初次摄食仔鱼最佳投喂时间在25日龄,也就是仔鱼上浮后第4天。

哲罗鱼基因组微卫星富集文库的构建与分析

采用磁珠富集法构建哲罗鱼（Hucho taimen Pallas）荩因组微卫星文库。哲罗鱼基因组DNA经MboⅠ限制性内切酶消化后，选取400-900bp的片段，用生物素标记的简单重复序列（ACA）15作探针与其杂交，杂交复合物结合到包被有链霉亲和素的磁珠上，获得目的片段，连接T载体克隆，构建基因组微卫旱富集文库。再用同位素标记的（ACA）15探针进行二次筛选，筛选出686个阳性克隆，阳性克隆率为35．94％。对其中140个阳性克隆进行测序，共获得149个微卫星序列，4个小卫星序列，其GenBank Accession Number为DQ110955～DQ121108。其中perfect（完美型）62个，占41．61％；imperfect（非完美型）92个，占61．74％；compound（混合型）5个，占3．36％，重复次数主要分布于6～45（81．21％），平均重复次数为32．5，这表明（ACA／TGT）。在哲罗鱼基因组DNA中含最非常丰富。本研究旨为从DNA水平上研究哲岁鱼种群结构、遗传多样性及目前群体现状等方面提供有效工具。

野生、人工养殖哲罗鱼生化成分分析和营养品质评价

为了给哲罗鱼的营养价值和人工配合饲料的研制提供科学依据,2001～2003年4～5月、10～11月,利用现代化学分析手段,分别对乌苏里江虎头江段野生的哲罗鱼和人工养殖的哲罗鱼的肌肉、内脏营养成分进行了综合分析与评价,分析结果:色氨酸为第一限制氨基酸(AAS为0.16～0.28,CS为0.10～0.17),其它氨基酸AAS、CS都大于1;EAAI为118.14～176.05,明显高于鳜鱼(62.30)、草鱼(60.59)、鲢鱼(57.59)和鳙鱼(60.87)的肌肉.人工养殖与野生哲罗鱼的氨基酸含量和营养价值无明显差异.

哲罗鱼稚鱼的蛋白质和脂肪需求量

采用4×3两因素完全随机设计,研究了哲罗鱼(Hucho taimen)稚鱼蛋白质和脂肪的需要量。初始体质量为7-8 g的哲罗鱼饲养于玻璃钢水簇箱中(直径90 cm,水深45 cm)。实验共设4个蛋白质水平(50%、46%、42%、38%),每个蛋白质水平设3个脂肪水平(10%、15%和20%),共12种饲料,每种饲料投喂组设3个重复,每个重复100尾鱼。实验期间水温11.5-17.5℃,溶解氧7.8-10 mg/L,每天饲喂3次,实验共进行8周。结果表明,不同处理对成活率未产生显著影响;脂肪水平对蛋白质需要量影响较大,在10%脂肪水平,与其他蛋白质水平相比,50%蛋白质水平显著提高了终末体质量、终末体长和平均日增重(P<0.01),特定生长率和饵料系数也得到改善(P<0.05);在15%脂肪水平下,与38%蛋白质水平相比,42%、46%和50%蛋白质水平各组终末体质量、平均日增重、特定生长率和饵料系数都显著改善(P<0.05);在20%脂肪水平下,38%与50%蛋白质水平相比,终末体质量、平均日增重和饵料系数差异显著(P<0.05),但其他各组差异不显著;与10%和15%脂肪水平相比,20%脂肪水平显著提高了蛋白质效率(P<0.05);鱼体脂肪含量随饲料中脂肪含量增加而显著提高(P<0.01);50%蛋白质水平显著降低了鱼体水分和脂肪含量,提高了体蛋白含量(P<0.05);鱼体总能随着蛋白质和脂肪水平的提高也极显著提高(P<0.01)。本实验结论为:在10%脂肪水平,哲罗鱼稚鱼最适蛋白质水平为50%,在15%和20%脂肪水平下,最适蛋白质水平为42%。

豆油代替鱼油对哲罗鱼稚鱼生长和体成分的影响

研究不同比例豆油取代粗制鱼油对哲罗鱼（Hucho taimen）稚鱼生长和体成分的影响。实验分4个组，每组设3个重复，每个重复100尾稚鱼（体质量7～8g）。第1组（G1）为对照组，添加15％鱼油，第2组（G2）、第3组（G3）和第4组（G4）分别用5％、10％和15％豆油取代鱼油。实验进行8周。结果表明，不同处理成活率和平均日增重差异不显著（P〉0．05），但随着豆油比例的增加，特定生长率和肥满度都得到提高，G3和G4组特定生长率显著高于G1组（P〉0．05）；G4组肥满度显著高于G1组（P〉0．05）。G3、G4组饵料系数显著降低（P〈0．05）。不同处理体成分中水分、粗蛋白质和粗脂肪含量均差异不显著（P〉0．05）。实验表明，豆油作为脂肪源可以完全代替鱼油用于哲罗鱼稚鱼饵料生产。

呼玛河哲罗鱼遗传多样性的AFLP分析

2002年4月在黑龙江水系呼玛河塔河河段100km范围内，用三刺网捕获索饵洄游哲罗鱼（Hucho taimen PNlas）个体20尾，用12对引物对其进行AFLP分析，每对引物组合扩增的位点在39～53之间，共扩增出了565个位点，多态性位点为477个，多态性比例为84．43％，平均Nei氏基因多样性指数H为0．3867，平均Shannon氏指数I为0．5102，个体间平均遗传距离为0．4552，UPGMA聚类结果显示呼玛河水系哲罗鱼群体内有严重的近亲交配现象。研究结果表明呼玛河水系哲罗鱼具有适度的遗传多样性，这对呼玛河水系哲罗鱼资源量的恢复有着至关重要的作用。[中国水产科学，2007，14（4）：615-621]

微卫星DNA标记对乌苏里江哲罗鱼遗传多样性的分析

从网上查询获得鳟微卫星标记30对,并对乌苏里江哲罗鱼的基因组进行遗传多样性分析,结果筛选出10对具多态性的微卫星标记。并用其中6对微卫星引物对17尾乌苏里江哲罗鱼进行基因组DNA扫描检测。用2%的琼脂糖凝胶电泳检测微卫星标记的PCR扩增产物,并对扩增结果进行了统计分析,计算了6个基因座的等位基因频率、杂合度等。结果表明,乌苏里江哲罗鱼等位基因频率为0.0455～0.7857,多态信息含量(PIC)为0.2801～0.6351,杂合度(H)为0.3368～0.6563。统计结果初步表明乌苏里江哲罗鱼的遗传多样性程度处于中等偏下水平。同时,结合资源量下降的事实,建议在保护遗传多样性的前提下对其采取人工繁殖和放流的方法增加其种群数量。

哲罗鱼微卫星亲子鉴定的应用

该文通过7对微卫星标记,对哲罗鱼的微卫星亲子鉴定准确率、亲子鉴定能力与候选亲本群体大小的关系及应用作了研究。通过计算机软件分析,亲子鉴定能力随候选亲本群体的增大而减小。在81个可能的父母对条件下,单独养殖家系鉴定准确率为80%,混合养殖家系有78.9%的后裔可以鉴定其父母;而在9个可能的父母对条件下,单独养殖家系鉴定准确率为93.3%,混合养殖家系鉴定率为92.2%。该研究表明微卫星分子标记可以用于哲罗鱼的家系鉴定。

饲料中添加谷氨酰胺二肽对哲罗鱼仔鱼肠道抗氧化活性及消化吸收能力的影响

以刚上浮哲罗鱼(Hucho taimen)仔鱼(体质量0.11～0.12g)为研究对象,在实验饲料中添加5个水平的谷氨酰胺二肽(Ala-Gln),各处理饲料中Ala-Gln添加量分别为0%(对照组)、0.125%、0.25%、0.50%、0.75%和1.0%,每处理3个重复,每重复1000尾仔鱼。实验期间水温7～10℃,溶氧保持高于7.8mg/L,实验共进行8周。结果表明,添加Ala-Gln能够显著提高哲罗鱼仔鱼肠谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸含量(P<0.05),提高肠脂肪酶活性和Na+,K+-ATPase活性(P<0.05),同时,丙二醛(MDA)含量显著(P<0.05)或极显著降低(P<0.01)。结论认为,饵料中适量添加Ala-Gln可以提高哲罗鱼仔鱼肠道Gln和谷氨酸含量,以及消化酶活性和抗氧化能力。

乌苏里江上游虎头江段哲罗鱼种群结构及生长特性

20 0 2、2 0 0 3年春、秋季对乌苏里江上游虎头江段哲罗鱼种群结构、生长特性进行了调查研究 ,通过对339尾样本分析 ,得其叉长、体重和年龄组成及生长情况 :乌苏里江上游虎头江段哲罗鱼种群结构合理 ,种群生殖群体、补充群体较大 ,有利于资源的增殖和恢复。叉长与体重关系r=0 .995 8,生长拐点年龄t=16 .5 ,拐点体重W =3714 .71g。性成熟年龄 :雌性为 6 + 龄 ,雄性为 5 + 龄 ,性比 (♀ :♂ )为 1.13:1。叉长、体重的相对增长率 8+ 龄以下增长较大 ,生长比速、生长常数、生长指标与之表现出相同的规律性 ,表明乌苏里江上游哲罗鱼 8+ 龄之前生长旺盛 ,以后虽然生长较 8+ 龄之前减慢 ,但仍保持较快的生长特性。

哲罗鱼(♀)与细鳞鱼(♂)杂交种胚胎及仔稚鱼发育

通过性激素药物诱导和人工繁育技术对哲罗鱼(♀)(Hucho taimen)与细鳞鱼(♂)(Brachymystax lenok)进行属间远缘杂交,并对杂交种胚胎及仔稚鱼的发育进行初步研究。结果表明:在水温6.2～8.9℃条件下,哲罗鱼(♀)×细鳞鱼(♂)的杂交受精卵完成胚胎期发育所需的有效积温为5806.70℃·h,整个胚胎发育过程可分为6个阶段,24个发育分期。刚破膜的仔鱼不具有游泳能力,全身透明,体循环清晰可见;7d后卵黄囊期仔鱼口裂明显,头顶部和腹部开始变得浅黄,尾鳍分化不断完成;17d后,仔鱼开始上浮,卵黄囊基本吸收完全,仔鱼具有游泳能力,鳍条和腹部鳞片开始不断分化。上浮40d后仔鱼发育成稚鱼,脂鳍分化和身体两侧鳞片覆盖基本完毕,幼鲑斑开始出现。根据研究结果可以初步断定,该杂交种的胚胎发育速度介于双亲之间,稚鱼期基本具备成鱼形态特征,早期杂交种外部形态略偏向于哲罗鱼,但仔稚鱼期生长较双亲快,推断这种杂交优势的贡献力可能来源于母本。

哲罗鱼消化系统形态学和组织学观察

采用活体解剖和显微镜技术对哲罗鱼（Hucho taimen）消化系统进行了较详细的观察,描述了消化道、消化腺的形态特征及各消化段的基本组织结构特点以及各段的细胞学特征。结果表明,哲罗鱼消化系统具有以下特点：（1）口端位,吻尖,口腔、口裂都较大;上下颌、犁骨、腭骨及舌上均有细小的尖齿,齿多向内倾斜;舌肌不发达,舌前端游离,舌黏膜表面为复层鳞状上皮,内含味蕾和杯状细胞。（2）食道粗短,肌层发达,内壁上有较深的纵向褶,黏膜层有大量的杯状细胞。（3）胃U型,分3部分,胃壁内有纵向皱褶,纵褶之间有网状褶,胃底部有胃腺。（4）盲囊呈指状,约180~256个左右,盲囊腔内有灰白色的胶冻状物质,上皮游离面具有微绒毛,黏膜层突入腔内形成窄长的绒毛,黏膜下层不明显。（5）肠直行,分前后肠,黏膜层中有单管状的肠腺。（6）肝不分叶,底边分叉呈枫叶状,在肝的右腹面有一长形的裸露胆囊,肝小叶分隔不明显。（7）肝胰脏分开。本研究通过对哲罗鱼消化系统的形态及显微结构的观察,探讨了其消化系统组织学和解剖学特征与其食性的适应性。

哲罗鱼消化系统器官发生发育的组织学观察

采用形态观察与连续组织切片技术，对哲罗鱼（Hucho taimen）胚胎期（水温7～8℃）和胚后期（水温3～14℃）消化系统的发生发育进行观察和研究。结果表明，哲罗鱼受精11d形成原始的消化管。受精18d肝原基出现，U型胃雏型形成。受精30d鱼体破膜，口能自由闭合。破膜8d后，齿形成，肛门与外界相通，消化道初步形成口咽腔、食道、U型胃、肠和肛门。破膜16d，胰及瓣囊出现，仔鱼消化系统初步具备了摄食和消化外源性食物的能力。破膜24d后，鱼体开始上浮，主动摄食，由内源性营养转向混合性营养。破膜30d后，卵黄囊完全被吸收，各消化器官功能和结构逐步发育完善，鱼体由混合性营养进入外源性营养阶段。此后随着鱼体的生长消化器官逐步发育成熟，舌齿和下颌齿分别为双排，胃腺发达，形成网状结构，幽门盲囊较多，肠为直行，肝和胰为相互分开的独立器官。

哲罗鱼(Hucho tamen)消化系统胚后发育的形态与组织学的研究

利用形态学和连续组织切片技术,对哲罗鱼仔鱼、稚鱼和幼鱼的消化系统进行了光镜观察,描述了其消化器官发育过程中形态学和组织学结构特征。结果表明,实验水温为7—12℃时,初始孵化仔鱼消化道细而直,两端封闭,位于卵黄囊背,随着仔鱼发育消化系统结构逐渐完善。破膜后16d消化系统完全贯通,破膜34d食道发育与成鱼基本相同,明显分为粘膜层、粘膜下层、肌层及浆膜层,出现3—4个粘膜褶皱;破膜2d在消化管道前端,胃开始分化,管壁较厚,可见明显的两层,胃原基细胞形成胃腔,破膜24d胃组织结构发育得较完整,由粘膜层、粘膜下层、肌肉层和浆膜层构成,出现胃腺;破膜后46d肠的组织结构与成鱼相同,粘膜层大量分布Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型粘液细胞;初孵仔鱼在肠背侧出现,与肝脏相互分开的一个独立的器官为胰腺组织。哲罗鱼破膜后26d消化系统明显分化成食道、胃、前肠、直肠以及肝脏和胰脏,破膜后36d出现幽门盲囊原基。本实验得出哲罗鱼仔鱼最佳初次投喂时间应在破膜后24—26d,即上浮后3—5d,由于破膜后46d幽门盲囊组织结构发育基本完善,可适当增加投喂量。

哲罗鱼不同组织SOD、CAT、ACP和AKP活力的比较研究

对1龄、2龄及3龄哲罗鱼肝脏、血液、鳃及肌肉等组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)及酸性磷酸酶(ACP)进行活性分析。结果表明,所检测组织中均有这4种酶存在,但不同组织表现出活性有所差异,AKP活性水平表现为鳃>肝脏>肌肉>血浆,ACP在各组织中的活性为鳃>肝脏>血浆>肌肉,CAT和SOD均在肝脏中表现为最高活性,实验发现各实验组不同组织中这4种酶的活性也表现出一定的差异性。