哺乳动物不育系20样激酶1在代谢性疾病中的研究进展

哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)是Hippo信号通路的核心组件,在进化中高度保守,最初研究证实MST1在肿瘤的发展进程中起重要作用,随着对其深入研究,发现MST1在肝脏细胞、胰岛β细胞、肿瘤细胞、骨细胞等人体多种细胞系广泛表达,并在代谢调节、维持代谢稳态中发挥关键作用,参与多种代谢性疾病的发生。本文就MST1在代谢性疾病中的最新研究进展进行综述,以期为代谢相关性疾病的研究和治疗提供理论基础及可能的思路和策略。

Yes相关蛋白、哺乳动物不育系20样激酶1、细胞周期蛋白D1在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨Yes相关蛋白(YAP)、哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)在鼻咽癌中的表达及与鼻咽癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色方法检测YAP、MST1、CyclinD1在鼻咽黏膜慢性炎组织和鼻咽癌组织中的表达。结果 YAP及CyclinD1在鼻咽癌组织中的表达均高于鼻咽黏膜慢性炎组织(P <0.05),MST1在鼻咽癌组织中的表达低于鼻咽黏膜慢性炎组织(P <0.05)。YAP、CyclinD1与病理分型相关(P <0.05),而MST1与病理分型无相关性(P>0.05);三者与患者的性别、年龄、生存时间、淋巴结转移、临床分期、远处转移、复发及生存状态无相关性(P>0.05)。在鼻咽癌组织内,YAP与CyclinD1、MST1与CyclinD1呈正相关(P <0.05),YAP与MST1无相关性(P>0.05)。结论 YAP和CyclinD1蛋白的高表达、MST1蛋白的低表达可能与鼻咽癌的发生、发展有关,三者有望成为治疗鼻咽癌的新靶点。

哺乳动物不育系20-样激酶1在心肌细胞凋亡中的作用

心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤、心肌梗死后心室重塑、心肌病和心力衰竭等病理生理过程中具有重要作用。哺乳动物不育系20-样激酶1(Mst1)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于生发中心激酶亚家族Ⅱ中的一员。作为Hippo信号通路上游的关键分子,Mst1具有调控细胞增殖和凋亡及影响组织器官生长等作用。在病理情况下,Mst1具有促进心肌细胞凋亡的作用。心肌细胞特异性Mst1过表达小鼠具有扩张型心肌病的表型,敲除或抑制内源性Mst1可抑制心肌细胞凋亡,改善心功能。现主要综述Mst1促进心肌细胞凋亡的作用,以及β肾上腺素能受体通过Mst1调控心肌细胞凋亡的分子机制,并评估了Mst1敲除或失活对心脏可能产生的保护作用。

哺乳动物不育系20样激酶1表达水平与宫颈癌相关病理学参数的关联性

目的分析哺乳动物不育系20样激酶1(Mst1)表达水平与宫颈癌相关病理学参数的关联性。方法选取2011年1月至2019年12月黄河水利委员会黄河中心医院收治的80例宫颈癌患者作为研究对象,均经手术病理证实,手术治疗时均取宫颈癌组织及配对癌旁组织(距肿瘤边缘≥4 cm处),分别采用免疫组化法、免疫印迹(Western blot)法检测宫颈癌组织及癌旁组织Mst1表达水平,并比较不同病理参数(年龄、肿瘤直径、组织学分型、分化程度、FIGO分期、是否有淋巴结转移)Mst1阳性表达率,分析Mst1阳性表达率与FIGO分期的相关性。结果宫颈癌组织Mst1表达水平、阳性表达率均较癌旁组织低(P<0.05)。不同年龄、肿瘤直径、组织学分型、分化程度宫颈癌患者Mst1阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);FIGO分期为ⅡB~Ⅳ期、有淋巴结转移宫颈癌的患者Mst1阳性表达率低于FIGO分期为ⅠB~ⅡA期、无淋巴结转移宫颈癌的患者(P<0.05)。Spearman相关系数分析显示,Mst1阳性表达率与FIGO分期呈负相关(r=-0.601,P=0.012)。结论Mst1在宫颈癌中呈异常低表达,参与肿瘤的发生、进展,可作为评估宫颈癌病情程度的重要指标,为临床诊治提供参考依据。

XMU-MP-1调节M1/M2极化平衡保护氧糖剥夺的BV2小胶质细胞的作用研究

目的:探讨XMU-MP-1(Xiamen University-inhibitor of mammalian sterile 20-like kinase protein 1)对氧糖剥夺(OGD)损伤后小胶质细胞M1/M2极化平衡的调节作用。方法采用OGD法诱导BV2细胞损伤。实验分为6组:对照组、模型组、MST1/2 siRNA组和低、中、高剂量实验组(分别给予1.25、5.0和20.0μg·mL^(-1) XMU-MP-1)。采用MTT法测细胞活力,ELISA测细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β表达,qRT-PCR测M1和M2标志物的mRNA表达,流式细胞术测CD206表达,蛋白印迹法测MST1、LATS1和YAP蛋白表达。结果与模型组相比,XMU-MP-1抑制BV2细胞增殖,显著降低TNF-α、IL-6和IL-1β的表达水平,下调MCP-1、IL-6、TNF-α和i NOS mRNA的表达,上调CD206、IL-10、TGF-β、IL-10和YM1 mRNA表达,降低MST1和LAST 1蛋白表达,上调YAP和CD206表达。结论XMU-MP-1通过调控MST1/2的磷酸化,调节OGD损伤后的BV2细胞M1/M2极化平衡,为神经炎症靶点药物研发提供理论基础。

蛋白激酶MST1与中枢神经系统疾病关系的研究进展

中枢神经系统(CNS)是人体神经系统的主要部分,包括脑和脊髓两部分。CNS负责全身各处信息的接收、整合、加工及传出。神经细胞凋亡坏死、氧化损伤、炎症反应、缺血、脱髓鞘、星形胶质细胞与少突胶质细胞的兴奋性毒性作用,轴突和基因的改变等多种病理生理学机制参与CNS疾病的发生发展过程[1,2]。CNS的这些改变通常会引起意识、认知、运动、感觉及平衡障碍等多种临床表现,甚至出现死亡。

MST1过表达抑制宫颈癌细胞系SiHa的增殖、迁移和侵袭

目的探讨哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)对子宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法Western blot检测正常宫颈上皮细胞H8与宫颈癌细胞SiHa中MST1的表达;构建p J3H-HA-MST1质粒并转染SiHa细胞系,Western blot检测MST1、Ki-67和MMP9的蛋白表达;MTS、划痕实验和Transwell分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 SiHa细胞的MST1蛋白表达水平明显低于H8细胞(P<0.05);SiHa细胞转染MST1质粒后,MST1蛋白表达明显升高,而Ki-67和MMP9蛋白表达水平显著下降(P<0.05),SiHa细胞的增殖被明显抑制(P<0.05),同时细胞的迁移和侵袭能力也显著降低(P<0.01)。结论 MST1过表达可以抑制宫颈癌细胞SiHa的增殖、迁移和侵袭能力。

吉西他滨诱导的结肠癌细胞凋亡与MST1、CypD线粒体复合物的关系

目的探讨哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)及亲环素D(Cyp D)与吉西他滨化疗耐药关系的机制。方法使用Annexin V-FITC/PI测量各种处理后的结肠癌细胞凋亡。使用二氯二氢荧光素乙酸DCFH-DA测定细胞内活性氧和线粒体膜电位。Western blotting方法检测MST1和Cyp D表达。线粒体部分分离蛋白裂解液与抗体孵育(抗-Cyp D)进行免疫共沉淀。结果吉西他滨耐药结肠癌细胞株中MST1和Cyp D表达显著低于吉西他滨敏感型细胞株。在体外,吉西他滨通过活性氧物种(ROS)的产生激活MST1,抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)防止MST1激活。吉西他滨活化MST1易位到线粒体并与线粒体膜通透性转换孔蛋白Cyp D形成复合物。MST1 shRNA沉默可减少吉西他滨诱导的细胞死亡,而MST1过表达可增加吉西他滨诱导的细胞死亡。Cyp D的抑制剂环孢菌素A(Cs A)可以防止吉西他滨诱导MST1/Cyp D复合物形成。结论 MST1可以被吉西他滨激活,并通过与Cyp D结合促进结肠癌细胞死亡。

MST1在帕金森细胞模型中的作用及其机制研究

目的探讨沉默哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)基因对帕金森病中多巴胺能神经元细胞作用的影响。方法培养PC12细胞并诱导分化为神经元,将神经元分为对照组、1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)组、MST1 SiRNA+MPP+组、MST1SiRNA组,转染后培养48 h,采用Western blot法检测神经元细胞MST1、自噬启动蛋白1(ULK1)、核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)的蛋白表达;采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性。结果转染后,MST1 SiRNA组神经元细胞中MST1蛋白表达明显减少(P<0.001)。与对照组相比,MPP+处理后能够明显抑制PC12细胞的增殖(P<0.01),增加MDA含量,抑制SOD、CAT活性并降低GSH含量(P<0.01),增加MST1和ULK1蛋白表达,抑制p-S6K1蛋白表达(P<0.01)。与MPP+组相比,MST1 SiRNA转染后能够有效改善MPP+对PC12细胞增殖的抑制作用(P<0.05),同时降低MDA的含量,增加GSH含量和SOD、GSH、CAT的活性(P<0.01),降低MST1和ULK1的蛋白表达,增加p-S6K1的蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论沉默MST1基因能够抑制氧化应激、促进细胞增殖以及发挥神经元的保护作用。

巨噬细胞特异性敲除MST1小鼠模型的构建

目的制备髓系(包括巨噬细胞和粒细胞)特异敲除哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)基因小鼠,为研究巨噬细胞MST1在临床相关疾病发生中的作用及机制提供动物模型。方法利用MST1基因携带loxP位点的小鼠(Mst1^(flox/flox))和髓系细胞特异表达LysM-Cre小鼠杂交构建巨噬细胞特异性敲除MST1小鼠(Mst1^(flox/flox)LysM-Cre^(+),即Mst1^(ΔM/ΔM));通过聚合酶链式反应(PCR)分别扩增loxP位点和Cre基因进行基因型鉴定;通过定量PCR以及免疫荧光验证MST1在巨噬细胞中的敲除效率;通过流式细胞术检测肝脏主要免疫细胞群。结果Mst1^(flox/flox)LysM-Cre^(+),即Mst1^(ΔM/ΔM)为巨噬细胞特异性敲除MST1小鼠基因型;qPCR和免疫荧光检测表明骨髓来源的巨噬细胞和腹腔巨噬细胞的MST1敲除效率达70%以上;流式检测表明敲除巨噬细胞MST1基因对小鼠肝脏的主要免疫细胞群无明显影响。结论成功构建巨噬细胞特异敲除MST1小鼠模型,为进一步研究巨噬细胞MST1在临床相关疾病中的作用及机制奠定了基础。

网络药理学结合体内实验探讨肺康颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠Hippo信号通路核心分子MST1/2的影响

【目的】通过网络药理学结合体内实验观察肺康颗粒对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的治疗机制。【方法】网络药理学:利用R语言运算,对肺康颗粒-COPD交集基因靶点进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,获取、筛选出Hippo信号通路。体内实验:将70只大鼠随机分成正常组,模型组,肺康颗粒低、中、高组,哺乳动物不育系20样激酶(MST)抑制剂组和地塞米松组等7组,除正常组,其余各组大鼠构建COPD模型,对应给药20周后,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、MST1/2、核因子kappaB抑制蛋白(IκB)、Rac1 mRNA表达水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化。【结果】经网络药理学分子对接KEGG通路分析得到Hippo信号通路(P<0.05)。体内实验结果显示:与正常组比较,模型组和MST抑制剂组大鼠肺组织TLR4、MST1/2、IκB、Rac1的mRNA表达水平下降(P<0.05),可见肺泡结构破坏严重;与模型组和MST抑制剂组比较,肺康颗粒低、中、高剂量组TLR4、MST1/2、IκB、Rac1的mRNA表达水平升高(P<0.05),肺泡结构破坏程度减轻。【结论】肺康颗粒可能通过调节Hippo信号通路核心分子MST1/2的表达,减轻COPD大鼠肺组织损伤。

化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎大鼠Hippo信号通路相关蛋白RASSF1A、SAV1、MST2表达的影响

目的观察化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠Hippo信号通路哺乳动物不育系20样激酶2(MST2)、RAS相关区域家族亚型A(RASSF1A)、含WW结构域的人同源重组蛋白1(SAV1)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用联合造模法制备CAG大鼠模型,成模大鼠随机分为模型组、维酶素组和化浊解毒方高、中、低剂量组,每组10只,同时设正常组10只。正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,维酶素组给予维酶素混悬液灌胃,化浊解毒方高、中、低剂量组给予相应剂量药液灌胃,连续12周。HE染色观察大鼠胃黏膜组织病理变化,RT-qPCR和Western blot分别检测大鼠胃黏膜组织RASSF1A、SAV1、MST2 mRNA和蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜组织RASSF1A、SAV1、MST2 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,化浊解毒方高、中剂量组和维酶素组大鼠胃黏膜组织RASSF1A、SAV1、MST2 mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.05),其中化浊解毒方高剂量组升高最明显。结论化浊解毒方具有干预CAG大鼠和延缓癌变进展的作用,其机制可能与上调模型大鼠抑癌基因RASSF1A、SAV1、MST2的表达相关。

亚砷酸钠对小鼠肝细胞AML12氧化应激、凋亡及MST1、MST2蛋白表达的影响

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对小鼠肝细胞AML12氧化应激、凋亡及哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、MST2蛋白表达的影响。方法取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,分为对照组(不含NaAsO_(2))及实验组(10、15、20、25及30μmol/L NaAsO_(2)处理24 h),采用荧光探针染色法和化学比色法分别检测各组小鼠AML12细胞内活性氧(ROS)含量和超氧化物歧化(SOD)活性水平,采用Western blot检测各组小鼠AML12细胞的MST1、MST2、磷酸化MST1/2(p-MST1/2)及半胱氨酸蛋白酶3剪接体(c-caspase 3)蛋白相对表达量。结果与对照组相比,随着NaAsO_(2)浓度的增加,各实验组小鼠AML12细胞内ROS含量逐渐升高(P<0.05),SOD活性逐渐降低(P<0.05);与对照组相比,各实验组小鼠AML12细胞内p-MST1/2蛋白相对表达量升高(P<0.05),20-30μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML12细胞内为MST1蛋白相对表达量降低、c-caspase 3蛋白相对表达量升高(P<0.05),15-30μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML12细胞内MST1蛋白相对表达量升高(P<0.05)。结论NaAsO_(2)可促进小鼠肝细胞AML12发生氧化应激、凋亡及p-MST1/2、MST1、MST2蛋白表达异常。

宫颈癌中MST1蛋白的表达及临床意义

目的探讨哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)在宫颈癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学实验检测139例宫颈癌组织及20例癌旁组织(距离肿瘤≥4 cm)标本中MST1蛋白表达情况,Western blot和q PCR分别检测20例宫颈癌及其配对癌旁组织中MST1蛋白及m RNA表达水平,并分析其表达与临床病理因素及预后之间的关系。结果 MST1主要表达在细胞质。宫颈癌组织中MST1的表达阳性率(27%,38/139)明显低于癌旁组织(80%,16/20),差异有统计学意义(χ~2=21.62,P<0.01),且宫颈癌组织MST1蛋白及m RNA表达水平均明显降低(P<0.01)。Ⅰb+Ⅱa期的宫颈癌患者MST1阳性表达率高于Ⅱb+Ⅳ期,有淋巴结转移者MST1阳性表达率低于无淋巴结转移者(均P<0.05);患者年龄、肿瘤直径、组织学分型及分化程度对MST1阳性表达率无影响。MST1阴性表达患者的生存时间较阳性表达者显著缩短(Log-rank χ~2=28.35,P<0.01)。结论 MST1在宫颈癌中呈低表达,可能是宫颈癌临床治疗和判断预后的新靶点。

牛磺酸通过上调MST1蛋白表达诱导宫颈癌细胞凋亡

为观察牛磺酸(Tau)对宫颈癌细胞凋亡的诱导作用及初步机制。以人宫颈癌细胞系SiHa细胞为对象,MTT比色法检测细胞增殖活性,将pEGFP-N1-MST1重组质粒转染SiHa细胞,流式细胞术检测细胞凋亡及Western blot检测细胞中MST1,Bcl-2及Bax蛋白水平。结果显示:Tau能抑制SiHa细胞增殖并诱导其凋亡;上调SiHa细胞MST1及Bax蛋白表达(P<0.01),下调Bcl-2表达水平(P<0.01),且MST1过表达能增强Tau对凋亡的诱导作用(P<0.01)。结果表明牛磺酸通过上调MST1蛋白表达,进而引起Bax蛋白表达上调和Bcl-2蛋白下调,诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡。

牛磺酸通过MST1-Akt通路诱导人结直肠癌细胞自噬的初步研究

探讨牛磺酸(Tau)对结直肠癌细胞自噬的影响及初步机制。用牛磺酸处理结直肠癌HT-29和SW480细胞,荧光显微镜(MDC染色)检测细胞自噬体形成,Western blotting分析细胞中自噬及MST1-Akt通路相关蛋白表达。MDC染色显示,40 mmoL处理组和80 mmoL处理组荧光标记自噬颗粒较Control组明显增多,并出现大量自噬体和自噬溶酶体,即40~80 mmoL Tau能诱导自噬小体形成;Western Blotting结果显示,随着Tau浓度增加,HT-29和SW480细胞中MST1,Beclin1和LC3-Ⅱ蛋白表达也呈显著性增加(P<0.01),而HT-29细胞Akt蛋白表达及p-Akt(Ser473)水平则呈显著性降低(P<0.01);且MST1蛋白过表达能增加HT-29细胞Beclin 1和LC3-Ⅱ蛋白表达,降低Akt蛋白表达;Tau可能通过MST1-Akt通路增强结直肠癌细胞中Beclin1和LC3-Ⅱ蛋白表达,诱导自噬。

MST1启动子区DNA低甲基化在ApoE^(-/-)小鼠肾损伤中的作用

目的探讨哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)及其DNA甲基化在载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠肾损伤中的作用及意义。方法实验动物分为2组:(1)Apo E-/-组(n=10):雄性Apo E-/-鼠饲以高蛋氨酸饮食;(2)对照组(n=10):雄性C57BL/6J鼠饲以高蛋氨酸饮食。喂养14周后,全自动生物化学分析仪测定小鼠血清肌酐和尿素氮水平;PAS染色及透射电子显微镜观察小鼠肾脏组织损伤情况;实时定量PCR及Western blot分别检测小鼠肾脏中MST1 mRNA和蛋白表达水平。巢式甲基化特异性PCR(n MS-PCR)检测小鼠肾脏MST1 DNA甲基化水平。结果与对照组比较,Apo E-/-组血清肌酐和尿素氮分别升高了1.1倍和1.6倍(P<0.01);PAS染色和透射电镜结果显示,Apo E-/-组较对照组肾脏明显损伤;Apo E-/-小鼠肾脏MST1表达分别与血清肌酐和尿素氮水平呈正相关(R2=0.7571,P=0.0012;R2=0.7342,P=0.0015);n MS-PCR结果显示,Apo E-/-组肾脏中MST1 DNA甲基化水平较对照组显著降低(P<0.01)。结论 MST1表达上调可能在Apo E-/-小鼠肾损伤中发挥重要作用,而MST1启动子区DNA低甲基化改变可能是MST1表达上调的重要机制。

PCMT1/MST1通路在甲基丙二酸血症脑损伤中的作用

目的:探讨PCMT1/MST1通路在甲基丙二酸血症脑损伤中的作用。方法:培养小鼠皮层神经元,用不同浓度甲基丙二酸诱导小鼠皮层神经元,观察细胞形态变化。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测小鼠皮层神经元活力,Westernblotting法检测各组(甲基丙二酸诱导组、CGP3466B治疗组和对照组)神经元蛋白异天冬氨酸甲基转移酶1(PCMT1)、磷酸化蛋白激酶(MST1)、裂解MST1(cl-MST1)、磷酸化MST1(p-MST1)、Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:不同浓度甲基丙二酸诱导24h显示,甲基丙二酸浓度≤8mmol·L^-1时神经元形态无明显变化;甲基丙二酸浓度为12mmol·L^-1时神经元胞内出现空泡,神经元突起缩短,胞体皱缩;甲基丙二酸浓度为16mmol·L^-1时神经元胞体脱落,突起几乎全部断裂。甲基丙二酸组神经元PCMT1、MST1蛋白相对表达量均低于对照组和CGP3466B治疗组(P<0.05),cl-MST1、p-MST1蛋白相对表达量均高于对照组和CGP3466B治疗组(P<0.05)。甲基丙二酸组Caspase-3、Bax蛋白相对表达量均高于对照组和CGP3466B治疗组(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量均低于对照组和CGP3466B治疗组(P<0.05)。结论:甲基丙二酸可引起皮层神经元凋亡,这可能是通过PCMT1/MST1通路来实现的。

叶酸和维生素B12在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

目的:探讨叶酸和维生素B12在同型半胱氨酸(Hcy)通过哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡中的作用及机制。方法:将HUVECs分为3组,分别为对照组(0μmol/L Hcy)、Hcy组(100μmol/L Hcy)和干预组(100μmol/L Hcy+30μmol/L叶酸+30μmol/L维生素B12)。细胞处理72 h后,流式细胞术检测HUVECs的凋亡率;荧光倒置显微镜观察DNA甲基转移酶1(DNMT1)过表达腺病毒转染的效率;RT-qPCR和Western blot分别检测MST1及DNMT1的mRNA和蛋白表达水平;巢式甲基化特异性PCR法检测MST1启动子区的甲基化水平。结果:与正常对照组比较,Hcy组HUVECs的凋亡率升高(P<0.01),MST1的mRNA(P<0.01)与蛋白(P<0.05)表达水平明显增加,DNMT1的mRNA水平降低(P<0.01);而叶酸和维生素B12干预可明显抑制Hcy引起的HUVECs凋亡、MST1 mRNA水平升高(P<0.01)及DNMT1 mRNA水平降低(P<0.01),MST1的mRNA水平与HUVECs凋亡率呈正相关(r=0.943 9,P<0.001)。转染DNMT1过表达腺病毒后,可见HUVECs中大量绿色荧光蛋白表达;同时,DNMT1的mRNA和蛋白表达(P<0.01)以及MST1启动子区的DNA甲基化水平明显增加(P<0.01),而MST1的蛋白水平下降(P<0.01)。结论:MST1表达增加可以诱导HUVECs凋亡,而叶酸和维生素B12在缓解Hcy介导的HUVECs凋亡中发挥重要作用,其保护机制可能是通过上调MST1启动子区DNA甲基化实现的。这将为进一步研究动脉粥样硬化的发病机制提供理论依据。

肺癌组织中YAP、Lats 1、Mst 1蛋白的表达及其临床意义

目的:分析肺癌组织中转录共激活因子相关蛋白(YAP)、大肿瘤抑制基因1蛋白(Lats 1)、哺乳动物不育系20样激酶1(Mst 1)水平与血清肿瘤标志物的相关性,探讨其对肺癌复发转移的预测价值。方法:取50例新鲜肺癌标本和癌旁组织标本以及同期50例肺部良性病变患者经皮肺穿刺活检获得的正常组织标本,采用免疫组化SP法检测标本中YAP、Lats1、Mst1蛋白的表达情况。同时收集患者的性别、年龄、术前血清学、肿瘤的临床病理特征及随访预后结果等。结果:①YAP在肺癌组织中强阳性表达,含量明显高于癌旁组织与正常组织(均P<0.05)。②YAP的表达与血清细胞角蛋白19片断(CYFRA21-1)、糖类抗原(CA125)水平呈正相关(均P<0.05),与血清神经元特异性烯醇化(NSE)无关(P>0.05);Lats 1的表达与血清CYFRA21-1、NSE、CA125水平呈负相关(均P<0.05);Mst 1的表达与血清CYFRA21-1、CA125水平呈负相关(均P<0.05),与NSE无关(P>0.05)。③截至随访末期,41例(82.0%)发生复发转移。Kaplan-Merier生存分析示:YAP及Mst 1高表达组的无病生存期(DFS)与其低表达组比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。Lats 1高表达组的DFS明显高于低表达组(P<0.05)。④COX比例风险模型分析示:TNM分期、淋巴结转移、Lats 1蛋白的表达是肺癌患者DFS的独立预后因子。结论:Hippo通路失调对肺癌复发转移的预测价值有限。