乌苏里江唇鱼骨的全人工繁育

从乌苏里江捕获野生唇鱼骨(Hemibarbus labeo)亲鱼150余尾,经人工繁殖获得鱼苗,饲养于池塘中,研究其在人工养殖条件下的生长、繁殖和性腺发育等生物学特性。结果表明,野生亲鱼及其F1在池塘中饲养下,性腺可自然发育至成熟,繁殖季节(5-6月)雌、雄亲鱼会出现明显的副性征,注射催产激素HCG、LRH-A2和DOM的混合制剂,可促使成熟的雌性亲鱼产卵,水温22～26℃时,药物的效应时间在17～22h,人工繁殖的催产率、受精率、孵化率和畸形率分别为87.55%、68.95%、92.5%和5.75%。唇鱼骨的卵为圆形、灰白色或淡绿色,遇水后产生较强的黏性,吸水膨胀卵径为(2.32±0.12)mm(n=50),体质量400～900g的雌性亲鱼绝对怀卵量为(3.19±0.85)×104粒(n=15)。水温22～24℃时,从卵授精到仔鱼孵出需要积温69.43℃·d,到仔鱼平游摄食需要积温139.25℃·d,刚出膜的仔鱼全长(6.1±0.3)mm,平游时全长达到(8.9±0.4)mm。在哈尔滨地区人工池塘养殖唇鱼骨,1+龄鱼体质量为(17.20±2.46)g,2+龄鱼为(89.84±9.30)g,3+龄鱼为(234.94±25.94)g,4+龄鱼为(371.57±64.65)g;雄性3+、雌性4+有部分个体性腺成熟,5+龄时多数个体可发育至性成熟。唇鱼骨的全人工繁育成功,可初步解决苗种来源和池塘养殖问题,并为野生资源的增殖和人工规模化养殖奠定基础。

唇鱼骨、花鱼骨及其杂交F_1的形态差异分析

运用3种多元分析法分析了唇鱼骨Hemibarbus labeo、花鱼骨H.maculates及其杂交F1(唇鱼骨♀×花鱼骨♂)的形态差异。结果表明:杂交F1在体形和体色上完全偏向于母本唇鱼骨,仅背部的小黑点是继承了花鱼骨的形态特征;唇鱼骨、花鱼骨和杂交种F1的可数性状中背鳍、臀鳍、胸鳍和腹鳍条数基本上一致,各项差异均不显著。利用主成分分析构建了9个主成分,对总变异的累积贡献率为80.8%。聚类分析结果表明,杂交F1的形态与唇鱼骨形态较为相似。采用逐步判别分析方法建立了3种鱼的判别函数,判别准确率分别为86.7%～100%(P1)、87.9%～100%(P2),综合判别率为94.4%。

唇鱼骨基因组DNA提取与ISSR-PCR的优化

以唇鱼骨为材料,分别采用4种不同方法(CTAB法、SDS法、ROSE法及试剂盒)提取基因组DNA,并对影响PCR反应的模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+、Taq酶浓度等主要因子进行了优化,建立了适合唇鱼骨基因组DNA的ISSR-PCR反应体系.25μL的PCR反应液含有的组分和终浓度分别为:约60 ng模板DNA,1.2 UTaq酶,0.4μmol/L引物,2.0 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,2%甲酰胺.结果表明,利用优化反应体系对4种不同方法提取的DNA进行PCR扩增,均能得到较好的PCR扩增条带,以试剂盒法最佳,为淡水溪流性同属鱼类遗传多样性分析奠定了技术基础.

骨唇黄河鱼耳石早期形态发育和轮纹特征研究

研究了骨唇黄河鱼仔稚鱼耳石在实验室养殖条件下的发育过程和生长特点,确证了轮纹沉积规律。结果表明,在14.0—17.8℃孵化条件下,微耳石和矢耳石在受精后96h 30min出现,星耳石在出膜后第16天出现。仔稚鱼生长过程中矢耳石形状变化较大,由出膜时的圆形发育到稳定时的箭矢状。微耳石由近圆形发育成贻贝形,其中心核位置随发育明显偏移。星耳石形状不规则,从出现时的心形发育成为星芒状。微耳石和矢耳石在前后轴方向上后区的生长快于前区(P<0.05);在背腹轴方向上,微耳石腹区的生长快于背区(P<0.05),矢耳石背区的生长快于腹区(P<0.05),两对耳石的前后区半径之和与全长均呈线性相关。微耳石和矢耳石的第1个轮纹均在出膜后第2天形成,新增的轮纹数(微耳石IL,矢耳石IS)与出膜后的天数(D)表现出显著的线性相关,方程分别为:IL=0.9911D?1.0008(R2=0.9971,n=220,P<0.001)和IS=0.9925D?0.10873(R2=0.9919,n=161,P<0.001),方程的斜率与1均无显著差异(P>0.05),表明两对耳石轮纹沉积均呈日周期性,生长轮为日轮。研究结果丰富了骨唇黄河鱼的发育生物学资料,可为研究其自然种群早期生活史提供参考。

饲料中碳水化合物水平对唇[鱼骨]生长和饲料利用的影响

在平均水温21.6℃下,将平均体质量148.03±0.28g的2龄唇Hemibarbus labeo饲养在6m×12m×3.5m网箱中,网箱放在水库中,每个网箱放养1500尾,投喂鱼粉为蛋白源、大豆油为脂肪源和玉米淀粉为碳水化合物源,微晶纤维素补充剩余比例的5种等蛋白质和等脂肪而含不同水平(25.3%、29.2%、33.3%、37.1%和41.%)碳水化合物的实验饲料,每组3个重复。60d的投喂表明:饲料中碳水化合物水平对唇的成活率没有显著差异(P>0.05),但日增重和特定生长率却随饲料碳水化合物水平增加而先升高后降低,41.6%组的终体质量显著低于29.2%、33.3%和37.1%组(P<0.05),但与25.3%组没有显著差异(P>0.05);33.3%、37.1%和41.6%组间饲料转化率和蛋白质效率差异不显著(P>0.05);25.3%和29.2%组间差异显著(P<0.05)。结果表明:唇饲料的碳水化合物含量为33.3%~37.1%时生长和饲料转化效率较高。

基于微卫星标记的瓯江唇鱼骨增殖放流效果评估

为评估瓯江唇鱼骨(Hemibarbus labeo)的增殖放流效果,利用已开发的10对微卫星引物,基于亲子鉴定技术,开展了瓯江增殖放流唇鱼骨对野生群体的资源贡献率评估。结果显示:28尾繁殖亲本群体和103尾回捕群体中共检出等位基因数(N_(a))133个,单个位点等位基因数(N_(a))、多态信息含量(PIC)、观测杂合度(H_(o))和期望杂合度(H_(e))的变化范围分别为7~19个、0.501~0.883、0.328~0.787和0.523~0.897,对应的平均值分别为13.3个、0.703、0.598和0.737,10对微卫星引物均表现为高度多态性,可用于后续亲缘关系鉴定。亲缘关系分析表明,在亲本性别未知的情况下,非亲排除率(NEP)范围为0.043~0.400,10座位累计非亲排除率(CEP)达到0.99999962。亲子鉴定结果表明,在回捕的103尾唇[鱼骨]个体中,3尾确认来源于增殖放流群体,由此推算出放流群体对野生群体的资源贡献率为2.91%。综合分析表明,瓯江唇[鱼骨]增殖放流具有一定的资源恢复效果。

鸭绿江水系唇鱼骨肌肉营养成分与品质的评价

用生化分析方法,对鸭绿江水系唇鱼骨肌肉一般营养成分、氨基酸、脂肪酸和微量元素的组成成分进行分析,并对其营养品质进行评价。结果表明:肌肉中水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分的含量分别为:(75.45±0.64)%、(19.10±0.28)%、(3.70±0.71)%和(1.30±0.03)%。氨基酸组成分析表明,肌肉鲜样中含有18种氨基酸,氨基酸总量为(18.71±0.23)%,其中必需氨基酸和鲜味氨基酸总量分别为(7.61±0.11)%和(6.91±0.21)%,鲜味氨基酸中谷氨酸含量最高为(2.95±0.01)%;鸭绿江水系唇鱼骨的第一限制性氨基酸是色氨酸。必需氨基酸占总氨基酸的比值(WEAA/WTAA)为40.67%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(WEAA/WNEAA)为78.82%,氨基酸平衡效果较好。脂肪酸组成分析表明,其主要有3种饱和脂肪酸(SFA),4种单不饱和脂肪酸(MUFA)和8种多不饱和脂肪酸(PUFA),其中PUFA含量最高为(45.17±1.51)%,PUMA中亚油酸含量最高,其次分别为DHA、花生四烯酸、EPA、α-亚麻酸、二高-γ-亚麻酸、顺,顺-11,14-二十碳二烯酸和DPA。微量元素组成分析得出,碘含量最高,其次依次为锌、铁、铜、硒和锰。研究表明,鸭绿江水系唇鱼骨是一种营养丰富,肉味鲜美的经济鱼类,具有食用价值和保健作用。

骨唇黄河鱼生物学特性及保护建议

骨唇黄河鱼为黄河上游特有鱼类。近年来受气候变化、人为活动特别是水利水电设施的影响,境况堪忧,分布范围相比历史记载明显萎缩,目前青海省境内主要在黄河龙羊峡上游呈不连续分布,主要分布在干流扎陵湖、羊曲、班多、支流泽曲河,资源量十分有限。已被列入《中国濒危动物红皮书》和《中国物种红色名录》,濒危物种。本文介绍了骨唇黄河鱼生物学特性、致危因素并提出了保护建议。

网箱养殖唇鱼骨的生长性能与生长模型

研究网箱养殖1、2、3龄唇鱼骨的生长性能,并结合唇鱼骨生长数据,应用Logistic、Gompertz和von Bertalanffy生长模型拟合其生长曲线。结果表明:1、2、3龄唇鱼骨的特定生长率随年龄的增长而逐渐下降,1龄鱼特定生长率最高,为4.56%/d,其次为2龄鱼,为2.05%/d,3龄鱼最低,为0.93%/d;随年龄的增长,唇鱼骨的肥满度也逐渐增加,1、2和3龄鱼肥满度依次为0.015、0.016、0.018 g/cm3;1和2龄鱼饵料系数相近,分别为1.44和1.31,均低于3龄鱼饵料系数1.88;不同月龄唇鱼骨的体质量和体长均随月龄的增加而呈指数函数增长。3种生长方程拟合结果表明,von Bertalanffy生长模型的拟合度最高,可较好表达网箱养殖唇鱼骨的生长过程及变化规律。

3月龄唇[鱼骨]形态性状对体质量影响分析

为研究3月龄唇[鱼骨]形态性状对体质量的影响,运用相关分析、通径分析和回归分析,进行全长(x1)、体长(x2)、头长(x3)、吻长(x4)、眼径(x5)、眼后头长(x6)、头高(x7)、体高(x8)和尾柄高(x9)9项形态学指标与体质量(y)相关性分析。试验结果显示,唇[鱼骨]的体质量变异系数最大(21.59%)。各形态性状间的表型相关系数均达到极显著水平(P<0.01)。通径分析表明,全长、体长、眼径、头高、体高和尾柄高达显著水平,是影响体质量的主要形态性状,其通径系数分别为0.218、0.239、-0.075、0.106、0.339和0.211。主要形态性状对唇[鱼骨]体质量的决定系数中,体高最大(0.115);两两形态性状对其体质量的决定程度分析表明,体长和体高协同作用对体质量的影响最大(0.111)。3月龄唇[鱼骨]全长、体长、眼径、头高、体高和尾柄高对体质量的相关系数达到0.894,回归关系达到显著水平(P<0.05)。通过逐步回归分析,建立最优回归方程:y=-3.935+0.234x1+0.303x2-1.018x5+0.700x7+1.414x8+1.976x9。本研究确定3月龄唇[鱼骨]全长、体长、眼径、头高、体高和尾柄高6项形态学指标是影响其体质量的重要指标,为唇[鱼骨]的人工选育和形态学研究提供参考依据。

嘉陵江上游唇鱼骨两性异形及其与年龄的关系研究

于2017年3—10月,在嘉陵江上游广元段共采集94尾唇鱼骨(Hemibarbus labeo),分析其两性异形现象。结果表明,嘉陵江上游唇鱼骨(H.labeo)存在两性异形现象,雌性个体较雄性个体大(P<0.05)。对比同龄雌雄个体发现,唇鱼骨(H.labeo)雌性在头部和躯干部的形态性状比雄性更大,而尾部的差异相对不明显。单因素方差分析(One-way ANOVA)结果显示2龄雌雄个体间局部特征性状差异程度较3龄和4龄雌雄个体间差异程度小。主成分分析对2龄、3龄和4龄唇鱼骨(H.labeo)群体分别提取了2个、4个和2个主成分(Eigenvalue>1),累积贡献率分别为87.57%,85.55%和80.58%。通过5个特征性状(头长、头宽、体长、躯干距和背吻距)构建的判别函数,能够对唇鱼骨(H.labeo)雌雄个体进行较好的判别。

寒地唇[鱼骨]生物学特性及人工繁育技术要点

唇[鱼骨](Hemibarbus labeo)是广泛分布于中国各大水系的名优鱼类,具有较高的经济价值,人工养殖前景看好。文章介绍了北方高寒地区唇[鱼骨]的生物学特性、人工繁殖和苗种培育技术,供养殖者参考。

唇(鱼骨)成鱼脾和肾的解剖学与组织学特征

采用解剖、石蜡切片及H.E染色技术研究了唇(鱼骨)脾脏、头肾及中肾的解剖学与组织学特征。结果显示,唇(鱼骨)脾脏单个,暗红色,呈扁平椭圆形,脾实质被起自被膜的结缔组织隔膜分隔成许多小叶,小叶内红髓与白髓界限不明显,含红细胞、淋巴细胞及黑色素巨噬细胞等,血管丰富。肾脏分为头肾和中肾。头肾位于体腔前端的心腹隔膜上方,分左右两叶,对称分布。头肾实质部分无肾单位,主要由淋巴组织构成,分红细胞聚集区和白细胞聚集区,内含丰富的红细胞、淋巴细胞、粒细胞及一定数量的黑色素巨噬细胞,在细胞组成上与脾脏有类似特征。中肾位于鱼体的胸腹段,紧贴体腔背部脊椎两侧,实质部分主要由肾单位、集合管及淋巴组织等构成;淋巴组织在细胞组成上与头肾有相似之处,含红细胞、淋巴细胞、粒细胞及黑色素巨噬细胞。研究结果表明,唇(鱼骨)脾脏、头肾是机体重要的免疫和造血器官,中肾除了泌尿功能外,在免疫及造血中也发挥重要作用。

乌苏里江唇的鳞片和生长特征

依据238尾鱼的测量数值,研究了乌苏里江野生唇(Hemibarbuslabeo)的鳞片及生长特征,并调查了乌苏里江抓吉镇江段唇的捕捞资源情况。结果表明,唇的鳞片较大,为规则圆鳞,年轮特征清晰,易于分辨,鳞径(R鳞径)与生长时间(年龄t)的回归方程为R鳞径=0.8583t+2.275(n=238,r=0.9868),体长与鳞径的回归方程为L=4.3326R鳞径+0.0293(n=238,r=0.9903)。乌苏里江唇体重与体长的回归方程为W=0.0115L3.0868(n=238,r=0.9962),其生长特征适合VonBertalanffy生长方程,体重的生长拐点t=4.59龄,W=340.90g。在乌苏里江抓吉镇江段主要捕捞唇的时间从每年开冰期4月20日到封冰期11月15日左右,其捕捞量随季节的变化而不同,4～5月、10～11月数量最多,为100～150kg/d,6～7月为50～100kg/d,8～9月较少,为30～40kg/d。

唇人工繁殖和鱼苗培育初步研究

对唇（鱼骨）（Hemibarbus labeo）的亲鱼培育、人工繁殖、孵化和鱼苗培育等技术进行了初步研究。试验结果表明：唇鳕野生亲本在池塘条件下经人工驯养可达性成熟；在水温19．0～21．0℃时一次性注射LHR—A2、HCG和DOM混合催产剂，其效应时间18～21．5h；2005～2006年采用人工催产、自然产卵及人工授精、流水孵化、豆浆法培育鱼苗等方法，共催产雌鱼44尾，平均催产率81．5％，共计产卵45．7万粒，平均受精率82．6％，孵化率77．4％，共孵出鱼苗24．5万尾。鱼苗经25～30d豆浆法培育后可达3cmI；2_L，平均成活率为65．5％，共培育夏花15．1万尾。

黑龙江和乌苏里江唇的微卫星引物筛选及群体遗传结构

利用鲤(Cyprinus carpioL.)(20对引物)和Hemibarbus mylodon(21对引物)共41对微卫星引物对黑龙江(逊克,XK)和乌苏里江(虎头,HT;海青,HQ)的3个野生唇(Hemibarbus labeo)群体进行引物适合性研究,并将获得的多态性微卫星位点用于唇群体遗传结构分析。引物筛选结果表明,5对鲤引物可对唇扩增出条带,但产物均无多态性;11对H.mylodon引物能在唇中成功扩增,10对引物(10个位点)的扩增产物具有多态性,其中7个位点为高度多态(PIC>0.5)。对3个唇群体进行遗传多样性分析,结果显示10个位点的平均杂合度为0.4834,共检测到96个等位基因(40个有效等位基因),以HT群体的遗传变异水平最高。卡方检验结果表明,8个位点在3个群体中不同程度地偏离遗传平衡(P<0.05),且偏离平衡的位点均表现为杂合体缺失(Fis>0)。3个群体两两间具有较多的基因交流(Nm>11),以XK和HQ间最高(17.27),二者的遗传距离也最近(0.0497),群体间的遗传分化微弱(Fst=0.0236)。以上结果表明,H.mylodon的微卫星引物适合于唇的群体遗传变异研究。黑龙江和乌苏里江的野生唇资源受人为及环境因素的影响较大;3个群体间的遗传分化不明显,乌苏里江的HT群体更适合在人工繁殖计划中利用。

唇受精的细胞学研究

唇精孔器属深凹陷、短孔径型。精子在受精后2s到达精孔管、5s进入卵子。受精后8—15min,卵子进入第二次减数分裂后期。受精后10min,开始形成雄性原核。受精后20min,进入第二次减数分裂末期。受精后25min,雌性原核形成。受精后30—35min,雌性原核向雄性原核移动。受精后40min,雌雄原核接近。受精后50min,雌雄原核结合。受精后70min,受精卵进入第一次有丝分裂中期,受精后80min,进入第一次有丝分裂后期,受精后120min,进入末期。卵黄降解与其内部或外周小泡的泡状缺口紧密相关。雌雄原核结合是精子星光扩张、牵引和细胞质流动的共同结果。有多精入卵的现象。

花和唇的含肉率及肌肉营养成分分析

利用国内外通用的营养测试方法测定了花(Hemibarbus maculates)和唇(Hemibarbu labeo)的含肉率和肌肉营养成分。结果表明:花和唇含肉率分别是70.61%7、1.52%;花肌肉(鲜样)中蛋白质(18.41%)和脂肪含量(2.46%)显著高于唇的,而花的灰分含量要显著低于唇;水分含量分别是78.35%、78.51%,两者无显著差异。花和唇肌肉中脂肪酸种类丰富,饱和脂肪酸(SFA)4种,不饱和脂肪酸(UFA)7种;其中单不饱和脂肪酸(MUFA)4种,多不饱和脂肪酸(PUFA)3种;其中DHA含量高达5.00%和14.32%。花和唇肌肉中的氨基酸总量分别是63.07%和67.63%,呈味氨基酸分别为25.96%和26.30%。缬氨酸、蛋氨酸和胱氨酸为限制性氨基酸。

RAPD标记在唇与花种质鉴定中的应用

利用RAPD分子标记技术对浙江瓯江溪水性鱼类唇和花进行了种质鉴定和遗传分析,从40个10碱基随机引物中筛选出14个多态性高的引物,分别扩增出130条和127条DNA带,多态位点比率达84.62%和66.93%,平均每个引物扩增多态性带9.3条和9.1条.Shannon多样性指数为0.451 5和0.354 8,Nei s指数为0.303 7和0.239 2.唇和花群体间的平均遗传距离为0.288 0和0.209 6.引物S383、S399、S463和S471扩增的6个特异性标记,可用来区分唇和花.最后应用UPMGA法对它们进行了聚类分析.结果表明唇和花的群体遗传多样性较高,存在较大的遗传变异.RAPD分子标记技术可以方便地应用于属鱼类的种质鉴定.

基于微卫星标记的唇■亲子鉴定技术研究

为进一步研究基于标记的唇[鱼骨]Hemibarbus labeo苗种放流效果评估工作,以安谷水电站鱼类增殖放流站实际工作中的两个唇[鱼骨]家系为研究对象,采用6个多态性微卫星标记对两个唇[鱼骨]家系开展了亲子关系鉴定分析。结果显示:6个微卫星标记共检测出37个等位基因,观测杂合度和期望杂合度分别为0.361~0.952(平均值为0.776)和0.302~0.795(平均值为0.589);多态信息含量为0.262~0.767(平均值为0.526);Cervus软件分析显示,在双亲均未知的情况下,唇[鱼骨]6个微卫星位点的累计非亲权排除率(CEP)为99.09%;两个家系中的72个子代个体,正确分配到对应家系父母本(12个亲本)的总体比例为95.83%。研究表明,本研究中采用微卫星标记方法来开展唇[鱼骨]家系亲子鉴定的分析,可为唇[鱼骨]的增殖放流效果评估提供技术支撑。