基于体温扩增的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种3种可视化快速检测方法的建立

为实现食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种(Burkholderia gladioli pv. cocovenenans)的快速检测,基于体温扩增技术——酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA),并根据唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种bonM基因序列设计和筛选了ERA检测引物和探针,分别建立ERA显色法、荧光法、试纸条法3种可视化快速检测方法,并评估其特异性和灵敏度,以及在市售样品检测适用性和准确性。结果显示,建立的方法对3株唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病型菌株均有扩增,其他常见的食源性致病菌以及其他唐菖蒲伯克霍尔德氏菌均无扩增,说明检测方法的特异性良好。3种方法的检出限均为10^(-2)ng/μL,灵敏度较好。采用建立的3种可视化快速检测方法对15份市售样品进行检测,检出阳性2份,检出率为13.3%。该结果与国标方法的检测结果一致,说明方法具有较好的适用性和准确性。本研究建立的基于体温扩增技术的显色法、荧光法和试纸条法具有较高的特异性及灵敏度,37℃体温扩增15 min左右即可获取检测结果,且裸眼可视,可为食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种的现场可视化快速筛查提供新型简便的策略。

食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌实时荧光PCR检测的研究

目的:建立唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的核酸检测方法。方法:根据16S~23S rRNA基因片段序列,利用Oligo7设计TaqMan探针及引物,并验证实时荧光PCR检测方法的特异性和灵敏性。结果:用实时荧光PCR检测方法检测15株标准菌株,只有唐菖蒲伯克霍尔德氏菌呈阳性,验证了此方法具有良好的特异性。灵敏度实验中得出菌液灵敏度为5.8×10~2 CFU·mL^(-1),DNA灵敏度为7.2×10^(-4) ng·μL^(-1)。结论:建立的实时荧光PCR检测方法有良好的特异性和灵敏度,该方法可用于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的快速检测,具有较好的应用价值。

生物炭和腐植酸对唐菖蒲生长及根际土壤环境的影响

为探究生物炭和腐植酸对唐菖蒲(Gladiolus hybridus)生长及根际土壤环境的影响,以唐菖蒲为试验材料,采用设施大棚栽培方式,设置8个处理:对照处理(CK:不加任何生物炭和腐植酸);单施腐植酸处理(T1:0.2 kg·m^(-2));单施生物炭处理(T2:1.5 kg·m^(-2));2种生物材料配施处理(T3:0.5 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸;T4:1.0 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸;T5:1.5 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸;T6:2.0 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸;T7:3.0 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸),测定不同处理下的植株生长和土壤指标。结果表明,生物炭添加腐植酸处理整体增加了唐菖蒲的生物量,与CK相比,单施生物炭处理(T2)与组合配施处理(T4、T5、T6、T7)在定植60和90 d时的唐菖蒲鲜重和干重有所增加。此外,通过检测唐菖蒲叶片中叶绿素含量的相对值发现,随着生物炭施用量的增加,叶绿素相对值(SPAD)也相对增加。而在定植60 d时,通过根系扫描系统(WinRHIZO)分析根系长度、表面积、体积等指标发现,各处理均在一定程度上促进了唐菖蒲根系生长,其中T2、T3、T4、T5、T6、T7各指标均显著高于CK。从土壤理化性状变化看,各处理的有机质含量整体较CK显著提高。与CK相比,除T1处理唐菖蒲根际土壤的pH值降低外,其余处理pH值均有所提高,以T2、T6、T7处理增幅较大,分别增加了0.88、0.87和1.07个单位。同时,与CK相比,T2、T5、T6、T7处理的土壤紧实度分别显著降低15.56%、20.95%、19.45%和24.97%。综上,生物炭和腐植酸在培肥土壤和促进植物生长方面具有潜在的应用价值,在本试验条件下,T5和T6处理的生物炭和腐植酸配施对唐菖蒲生长具有较好的促进作用。本研究为唐菖蒲高效栽培提供了技术参考。

基于物联网技术的湿米粉类食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌风险监测研究

湿米粉作为一种深受消费者喜爱的传统食品,其生产和流通过程中易受唐菖蒲伯克霍尔德氏菌污染,引发米酵菌酸中毒事件,对公共健康构成严重威胁。本研究旨在探讨物联网技术在湿米粉类食品生产、加工、贮存及销售环节中的应用,实现对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌风险的有效监测与控制。通过物联网技术构建实时监控系统,结合数据分析,为湿米粉类食品的安全管理提供科学依据和技术支持。

图像处理技术在唐菖蒲叶面积测定中的应用

以数码相机结合Photoshop软件实测的唐菖蒲(Gladiolus hybridus Hort)叶面积为参照,用不同叶位叶片的长径(L)和宽径(W)求得唐菖蒲叶面积的矫正系数和回归方程。以矫正系数(K)法求算叶面积:品种“桃红”LA=0.65LW,品种“玫瑰粉”LA=0.71LW;回归方程法求算叶面积:“桃红”LA=0.58×L×W+7.02,“玫瑰粉”LA=0.69×L×W+1.58。经方差分析比较证明,应用回归方程法计算的叶面积比用矫正系数法更为可靠。

蔗糖对提高唐菖蒲切花观赏品质的生理效应

蔗糖对提高唐菖蒲切花观赏品质的生理效应蔡永萍，陈静娴，聂凡，张鹤英（安徽农业大学生物工程系，合肥２３００３６）关键词唐菖蒲；蔗糖；切花；衰老ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＳｕｃｒｏｓｅＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌＦｕｎｃｔｉｏｎｉｎＩｎｃｒｅａｓｉｎｇＣｕｔＧｌａ...

唐菖蒲花粉低温保存效果分析

以‘超级红’等唐菖蒲切花品种的花粉为试材,研究了花蕾的开放状态、花粉含水量、不同干燥时间与不同保存温度、预冻方式和解冻方式对唐菖蒲花粉萌发率的影响,同时测定了唐菖蒲4个栽培品种花粉的长期保存效果。结果表明：唐菖蒲花朵刚呈展开状态时的花粉萌发率最高;未干燥花粉和干燥1 h之内花粉萌发率次高。保存温度和含水量对花粉的保存效果影响显著,花粉在干燥0~1 h、-80℃温度下保存效果好;0℃预冻有利于花粉的低温保存;37℃温水化冻处理的花粉萌发率明显高于其他解冻方式。唐菖蒲4个栽培品种花粉的长期保存以-80℃低温条件效果较好,保存时间可达1 a以上,0℃处理的次之,4℃和-20℃条件下保存的花粉萌发率较低,且品种间差异显著。

外源钙对唐菖蒲切花的保鲜效果和生理效应

【目的】探讨乙酸钙对唐菖蒲切花的保鲜效果和生理效应,为乙酸钙在唐菖蒲切花保鲜上的应用提供理论依据。【方法】以唐菖蒲红色品种‘马加烈’切花为材料,瓶插在含有乙酸钙或钙离子专一性螯合剂乙二醇二乙醚二胺四乙酸(EGTA)的溶液中,分析乙酸钙对切花观赏品质的影响以及第1和第3朵小花内钙调素(CaM)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)、玉米素(ZRs)、Ca2+、丙二醛(MDA)和可溶性糖含量的变化。【结果】乙酸钙处理后唐菖蒲切花的小花开放率显著高于对照,2mmol·L-1乙酸钙处理的切花日观赏值、瓶插寿命以及平均观赏值均高于其它钙浓度处理和对照,所以2mmol·L-1的乙酸钙对唐菖蒲切花有较佳的保鲜效果。和对照相比,乙酸钙(2mmol·L-1)使唐菖蒲花瓣和苞叶的CaM和内源激素GA含量以及GA/ABA、ZRs/ABA升高,使内源激素ABA含量降低,并且减弱EGTA(20mmol·L-1)对这些指标的影响。乙酸钙(2mmol·L-1)还提高唐菖蒲花瓣和苞叶的Ca2+含量,降低这两部位的MDA含量,使可溶性糖含量在花瓣中高于对照,在苞叶中低于对照。【结论】用乙酸钙溶液瓶插切花时,不仅可以降低切花的MDA含量,稳定膜结构,而且可能激活CaM,调节花瓣和苞叶中的内源激素水平,调运切花中苞叶等处的可溶性糖到花瓣中,促使小花开放,并延长切花寿命。

化学药剂对唐菖蒲切花衰老的影响

从化学药剂处理后的唐菖蒲切花体内的生理变化,结合切花在瓶插期间的形态变化,研究了化学药剂对唐菖蒲切花衰老的影响。结果表明,化学药剂能明显地缓解切花水分胁迫,改善体内水分平衡,延缓切花衰老,提高切花的寿命。以游离脯氨酸和可溶性蛋白质含量为主要生理指标,进行切花保鲜剂的研究和筛选的方法是可行的。本实验所用的保鲜剂对唐菖蒲切花具有较好的保鲜效果。

唐菖蒲花粉低温保存过程中的生理生化特征

以唐菖蒲切花栽培品种嫦娥粉花粉为实验材料,比较其花粉各项生理生化指标在-80℃和4℃贮藏过程中(360 d)的变化,以探讨2种保存条件下花粉保存效果出现显著性差异的生理生化原因.结果表明:唐菖蒲花粉在2种保存温度条件下,随保存时间的延长,各项生理生化指标表现出显著差异.与4℃保存处理相比,-80℃保存处理抑制了花粉中MDA的积累,增强了超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性,减轻了花粉膜质过氧化和膜系统受伤害程度,同时提高了花粉可溶性蛋白质和可溶性糖的含量,增强了花粉的抗冻能力,从而使低温保存花粉活力维持在相对较高水平,这或许是-80℃条件下花粉保存效果较好的部分生理生化原因.

唐菖蒲组培脱毒技术研究

在MS培养基上 ,附加 5mg/L病毒唑培养唐菖蒲 ,再经 38～ 40℃热处理 ,切取微茎尖两次 ,去除了危害唐菖蒲的 3种主要病毒TMV、CMV和TVY。以MS +BA 0 5mg/L +NAA 0 5mg/L +KT 1mg/L为继代培养基 ,1/ 2MS无激素培养基为成球培养基 ,进行快繁获得了脱毒种球 ,移植后 ,植株生长发育状况得到明显改善。

唐菖蒲球茎形成期蔗糖和淀粉代谢及其相关酶活性

以唐菖蒲品种‘RoseSupreme’为材料,研究叶片、新球、匍匐茎和籽球中蔗糖、淀粉含量及其相关酶活性变化。结果表明:唐菖蒲叶片中蔗糖含量顺序为叶片>新球、籽球>匍匐茎。叶片和匍匐茎中淀粉含量较新球和籽球低。叶片、新球和籽球中蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性较高。唐菖蒲生长发育前期各部位蔗糖合成酶(SS)活性均较低,但后期新球中的SS活性快速升高,叶片中则快速下降。酸性转化酶(AI)活性的高低顺序是叶片>匍匐茎>籽球>新球。叶片中性转化酶(NI)活性较其他部位高,匍匐茎不断增加,新球是先增加后降低。Q酶活性除了叶片外,其他部位均不断增加;总淀粉酶活性变化趋势均是先增加后降低。在唐菖蒲生长发育过程中,蔗糖代谢主要受SPS、SS、AI和NI的综合调控,Q酶和淀粉酶在球茎发育过程中对淀粉代谢起重要作用。

不同品种唐菖蒲叶片浸提液对土壤微生物数量的影响

为了明确不同品种唐菖蒲地上部分叶片对土壤微生物数量化感作用的差异,采用稀释平板菌落计数法,以新星(Nova Lux,A1)、金色原野(Gold Field,A2)、阿姆斯特丹(Amsterdam,A3)、粉友谊(Friendship,A4)和超级红(Red Supreme,A5)5个唐菖蒲栽培品种为研究对象,研究了各品种叶片浸提液对土壤微生物数量的影响。结果表明,唐菖蒲叶片浸提液对土壤中微生物数量产生了显著影响,同时,这种影响具有一定的品种效应和浓度效应。在对土壤细菌的影响上,A1、A2、A3具有极显著的促进作用和低浓度促进效应,其中A3在叶片浸提液浓度为10 g·L-1时细菌数量最多,约是对照的4-5倍;A4和A5则表现较强的抑制作用,其中A5叶片浸提液为10 g·L-1时,细菌数量约是对照的50%。在对真菌的影响上以抑制效应为主,而且品种间抑制效应存在较大差别。其中以A4在10 g·L-1时的叶片浸提液的抑制效果最强,真菌的数量仅为对照的5%。在对放线菌影响上,只有A3对放线菌数量有显著的低浓度促进效应,在叶片浸提液浓度为10 g·L-1时放线菌数量约为对照的二倍,其他品种均有一定程度的抑制作用。

唐菖蒲花粉离体萌发的液体培养基研究

以唐菖蒲栽培品种"粉友谊"的新鲜花粉为试验材料,采用花粉离体培养法,研究蔗糖、H3BO3、CaCl2所组成的基本培养基配方不同组分浓度对唐菖蒲花粉萌发率的影响,并在此基本培养基配方的基础上,研究Mg2+、Zn2+、Fe3+、Cu2+和K+离子对花粉萌发的影响。蔗糖、H3BO3、CaCl2单因子和正交试验结果表明,蔗糖和H3BO3对唐菖蒲花粉萌发有显著影响,蔗糖是花粉萌发的必需物质。低浓度的Mg2+、Fe3+和K+对花粉的萌发有促进作用,离子浓度过高对花粉萌发产生抑制作用。而Cu2+、Zn2+在所设定的浓度范围内均表现出抑制作用。唐菖蒲花粉培养液最适配方:蔗糖100 g.L-1+H3BO3100 mg.L-1+CaCl2150 mg.L-1+Fe2(SO4)350 mg.L-1+KNO350 mg.L-1+MgSO4.7H2O 100 mg.L-1;最适培养温度为25℃,且光照、黑暗的环境条件对花粉萌发无显著影响。

壳聚糖保鲜液对唐菖蒲切花保鲜的影响

试验采用0.25‰,0.5‰,0.75‰,1‰,1.25‰的壳聚糖保鲜液处理唐菖蒲切花,观察切花寿命和开花率,旨在探索壳聚糖保鲜液处理切花的效果。试验结果表明,1‰壳聚糖保鲜液处理后的鲜切花,寿命最长,开花率最高。

辐射诱发唐菖蒲复色花突变体的AFLP分析

以唐菖蒲品种‘新秀’的种球为材料,经不同剂量60Coγ射线诱变后,进行生物学性状观察,并以‘新秀’为对照,用AFLP分子标记对突变体进行多态性分析。结果显示,(1)诱变后代出现了广泛变异,并从75 GY剂量组M2代中选出了花瓣呈粉白相间的复色花突变体。(2)突变体的大多数引物扩增产物带型与对照带型差异显著;64种引物中50对引物检测出DNA分子的多态性,产生1 600条清晰谱带,多态性位点112个,多态性13.08%,相似性系数为93%,差异片段主要集中于100～700 bp之间。研究表明,复色花突变体和对照之间的差异与遗传物质的改变相关,其中一些可能与花色形成基因有关。

唐菖蒲花序发育特性的研究

唐菖蒲６ 个切花品种花序生长发育与叶数的增加呈特定的关系， 在２ ～３ 叶期花序分化开始后， 首先是小花数迅速增加， 至５ 叶期停止增加， 而花茎开始迅速伸长生长， 单个小花生长发育加快， 同时已分化的小花从花序顶端开始发生不同程度的败育， 导致切花的每穗花数降低。

26个唐菖蒲品种RAPD分析

唐菖蒲是世界著名的切花之一,由于是纯粹的外来品种,目前国际上对其分类尚无统一的方法,主要是依据其生物习性等形态特征进行分类,受环境影响很大。同工酶是基因的产物,利用同工酶可以进行唐菖蒲品种鉴定和分类,但它在植物的不同器官组织发育的不同时期存在差异,而分子标记技术具有不受环境、器官、组织发育不同时期影响、遗传性稳定、分析简单等特点而被广泛应用在花卉品种分类上。利用RAPD技术对26个主要唐菖蒲切花品种进行分类和亲缘关系的研究,从520个随机引物中筛选出33个用于PCR反应,共在206个位点上扩增出条带,平均每个引物扩增位点6.24个,多态性位点185个,占总带数的89.8%,可以进行品种的鉴定。从分子水平揭示出唐菖蒲切花品种种质资源遗传基础狭窄,夏花大花型唐菖蒲品种间存在一定的亲缘关系。

激动素对唐菖蒲切花的保鲜效应

采用激动素(Kinetin,KT)处理,探讨了对唐菖蒲(Gladiolus hybridus Hort.)切花保鲜的效果以及生理作用的影响,结果表明,30 mg/L激动素与30 g/L蔗糖组合的处理液,能明显改善唐菖蒲切花体内的水分平衡状况,增加切花鲜重,提高观赏品质,推迟切花达到鲜重峰值和最大观赏值的时间,延长切花瓶插寿命,提高POD和SOD活性,延缓MDA含量的增加。单用激动素主要能增加唐菖蒲切花鲜重、促进吸水和提高抗氧化酶的活性,降低膜质过氧化水平,而蔗糖主要有利于花朵开放和提高观赏效果。

催花液对唐菖蒲切花水分生理及衰老的影响

本研究用两种不同催花液对唐菖蒲切花进行了处理。结果表明催花液不但具有催花效应 ,而且具有保鲜效应 ;催花液 的效果优于催花液 。结果还表明催花液能够提高唐菖蒲切花的开放率 (第 1 5天比对照平均多 34.48% ) ,降低衰老率 (第 1 5天比对照平均低 56.82 % ) ,明显地缓解切花水分胁迫 ,改善体内水分平衡 ,抑制和缓解干物质和蛋白质的降解。