双四唑盐的合成及表征

介绍了双四唑钾盐(K2BHT)、双四唑(BHT)、双四唑胍和双四唑氨基胍的合成。采用滴加醋酸和加入硫酸铜改善中间产物双四唑锰盐过滤性,提高了产率。采用双四唑锰盐和碳酸钾高温置换反应生产双四唑钾盐。双四唑和碳酸胍、碳酸氨基直接反应生成双四唑胍和双四唑氨基胍。通过DSC-TGA、元素分析、IR、1H NMR1、3C NMR和MS等方法,对其结构进行了鉴定,并进行了常规感度测试。结果表明,双四唑感度较高,而其它双四唑盐感度较低。

四甲基偶氮唑盐法评价牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料的体外细胞毒性

背景:越来越多的新型材料被纳入口腔领域应用的视野,对生物材料进行生物相容性评价是进入临床试验前的重点研究内容。目的:通过体外细胞毒性实验评价自制牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料的生物相容性。方法:根据ISO标准,采用四甲基偶氮唑盐比色法行体外细胞毒性实验,阴性对照组为DMEM培养液,阳性对照组为含有0.1%苯酚的DMEM培养液,实验组为受试材料的浸提液。测试人牙龈成纤维细胞在牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料浸提液中培养1,3,5d的吸光度值,观察细胞形态变化,计算细胞相对增殖率,判断细胞毒性的级别。结果与结论:实验组体外细胞毒性实验吸光度值均与阴性对照组差异无显著性意义(P>0.05),与阳性对照组差异有显著性意义(P<0.01),自制牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料体外细胞毒性级别为0～1级,初步认为其具有良好的生物相容性。

四唑盐细胞活力指示剂研究进展

四唑盐类化合物是细胞生物学、细胞与分子毒理学及临床诊断领域用于测定细胞活力的生物指示剂。分别综述了:1)四唑盐及其性质;2)甲臜及其四唑盐的制备方法;3)四唑盐的发展阶段、市场需求以及商品化四唑盐基于比色技术在细胞毒性、抗菌药物的筛选及抗菌药敏实验等方面的应用,并对其发展前景进行了展望。

四甲基偶氮唑盐比色法测定原发性肝癌对化疗药物的敏感性

目的:探讨肿瘤药敏试验在肝癌化疗选药中的作用。方法:将12例患者的肝癌组织进行体外培养,以临床常用的9种化疗药物加以干预,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测化疗药物对癌细胞的抑制率。结果:9种化疗药物对肝癌细胞的抑制率差异有显著性(P<0.01),肝癌对多西他赛高度敏感,对泽菲、顺铂、卡铂、阿霉素、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶中度敏感,对羟基喜树碱、健择低度敏感。结论:肿瘤药敏试验对肝癌化疗起重要作用。以MTT法检测相关化疗药物对肝癌细胞的抑制率,优选敏感药物组成化疗方案,可实现个体化治疗,从而提高疗效,减轻不良反应。

四甲基偶氮唑盐比色法测定脑源性神经营养因子生物学活性的研究

目的:探索四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)实验方法的最佳条件,并检测脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的生物学活性。方法:根据MTT法的测定原理,采用三因素(细胞数量、MTT浓度、MTT染色时间)三水平的正交实验设计;并依据MTT的最优条件测定BDNF的生物活性。结果:MTT比色法检测SH-SY5Y细胞活性的最优条件为:每孔细胞数:(0.2×108个/L,100μl),MTT的染色时间(6小时),MTT的剂量(5g/L)。在ATRA诱导SH-SY5Y细胞产生TrkB受体后,随着BDNF浓度的增加,吸光值也增加,当BDNF浓度增加到50μg·L-1后,随着BDNF浓度的增加,吸光值增加并不显著。结论:建立了MTT比色法的最佳条件,并应用于BDNF细胞因子的活性检测中,在BDNF浓度为50μg·L^(-1)时。

应用四唑盐比色法对义齿软衬材料的细胞毒性评价

四唑盐比色法(MTT assay)是通过比色测定细胞数量和活性的新方法.其敏感性与细胞计数法、同位素标记法相似.本文采用该法检测了三种义齿软衬材料(可见光固化、室温固化及热固化义齿软衬材料)对细胞的毒性作用.结果表明,3种材料的50%浓度浸渍液的细胞毒性程度为1～0级,100%浓度浸渍液的细胞毒性程度为2～0级,显示出较低的细胞毒性.

PEG功能化1,3-二唑盐的合成及在水相Heck反应中的研究

以商品化的聚乙二醇单甲醚为起始原料,通过三步反应制备了4种PEG功能化的1,3-二唑季铵盐(L1~L4),产物的收率都在90%以上.随后将上述4种产物作为水溶性卡宾前体分别和Na_2PdCl_4反应在线生成卡宾钯络合物并用于催化均相的水相Heck反应.优化实验结果表明:L1的催化性能最优,在纯水相中模型反应的TON值大于8 900.建立的催化体系对底物的适用性较好,可用于制备许多二苯乙烯类化合物,收率为51%~98%.该方法具有产物分离简便、收率高、催化剂用量少和环境友好等优点.

有限层Langmuir-Blodgett类晶型薄膜微观结构与超分子结构的小角X射线散射研究——Ⅱ.(艹氐)唑盐/花生酸镉混合膜系

本文应用SAXS与微机模型拟合(MCMI)研究了S-LB(S为芪唑盐)薄膜与SA-LB(SA为芪唑盐/花生酸镉)薄膜的微观结构与超分子结构,以及这类LB薄膜凝聚态不稳定的原因.结果指出;第一,从π-A.曲线可知,S与A的脂肪链可以类似于脂肪酸晶胞形成二维类晶系结构;第二,随着分子比R_M=S/A=0到l,S和A之间发生了从分散相至连续相的相逆转;第三,S在二维类晶系中处于不稳定的近似伸直型的高能态构象,然而,哑铃形的芪唑基类似于芪趋向于作倾斜状密堆砌,S的两条脂肪链则倾向于转变为稳定的全反式燕尾形的低能态构象,仅占S分子长约2/3的脂肪链亦降低子S分子间与S-A分子间的凝聚力,这就导致了S连续相的二维类晶系存在大量晶格缺陷,故只能形成4～6层不稳定的Y型LB薄膜;第四,存放一月后,这种不稳定的S连续相的层状超分子结构极易破坏和崩塌.

羧基荧光素乙酰乙酸与四甲基偶氮唑盐法检测人脐血间充质干细胞刺激脾淋巴细胞增殖作用的比较

目的比较羧基荧光素乙酰乙酸（CFSE）与四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测人脐血间充质干细胞（CB-MSCs）和神经分化的CB-MSCs对大鼠脾淋巴细胞（LCs）刺激作用的敏感程度。方法分别制备刺激细胞和LCs,将刺激细胞分为4组：1.CB-MSCs组;2.Dif-CB-HSCs组：脐血间充质干细胞培养7d后维甲酸（RA）处理4d诱导其神经分化细胞;3.SH-SY5Y组：人源SH-SY5Y细胞（人神经母细胞瘤细胞系）作为阳性对照组;4.Auto-LC组：自体大鼠LCs作为阴性对照组。分别将上述各组刺激细胞与LCs进行混合培养,分别通过酶标仪（MTT法）,流式细胞术（CFSE法）检测LCs增殖情况（n=3）。结果CFSE法和MTT法检测结果均显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组刺激LCs增殖明显弱于阳性对照组（SH-SY5Y细胞组）,但CFSE法检测结果显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组细胞刺激LCs增殖百分率高于阴性对照Auto-LC组,MTT法检测结果显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组的吸光度（A）值稍低于阴性对照Auto-LC组。结论CFSE法比MTT法能更加客观地...

利用四唑盐染料WST反映巨噬细胞受脂多糖刺激活化后的氧化应激和代谢变化

目的通过四唑盐染料显色方法分析巨噬细胞受脂多糖刺激后的氧化应激和代谢变化,分析这种方法在炎症研究中的应用价值。方法通过活细胞计数方法和CCK-8检测试剂分别检测RAW264.7巨噬细胞的活力;用CCK-8和WST-1显色方法研究超氧阴离子的释放;用DCFH-DA荧光染色和流式细胞术检测细胞内活性氧的生成;用乳酸检测试剂盒和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD+(H)检测试剂盒分别检测上清中乳酸和细胞内NADH的含量。结果经脂多糖刺激的RAW264.7细胞的活细胞计数结果和CCK-8显色结果存在反差;相同数目的正常培养细胞和脂多糖刺激细胞的CCK-8显色比较,后者读数显著升高,超氧化物歧化酶能够下调CCK-8显色读数,WST-1显色结果与CCK-8一致,脂多糖刺激细胞中的活性氧含量显著增加;脂多糖导致RAW264.7细胞上清中的乳酸含量和细胞内的NADH含量显著增加。结论应用WST染料测定经脂多糖刺激的RAW264.7细胞活力时,测定结果会受到细胞中还原性物质——超氧阴离子和NADH含量变化的干扰。通过WST-1或WST-8显色实验,可验证脂多糖能够刺激RAW264.7巨噬细胞发生氧化应激和能量代谢变化。这一显色实验在炎症研究和药物筛选中可能有重要应用价值。

骨肉瘤化疗药物体外四甲基偶氮唑盐药敏的实验研究

目的 探讨卡铂 (CBP)和其它抗骨肉瘤基本药物对OS_732细胞株的抑制作用。方法 应用体外四甲基偶氮唑盐药敏试验 ,选用CBP、顺铂 (CDP)、阿霉素 (ADM)和氨甲喋呤 (MTX) ,参考临床所能达到的血浆最大理论浓度设定不同浓度梯度 ,观察它们对OS_732细胞株的抑制率。 结果 上述药物在体外均有一定的抑瘤作用 ,其中以CDP、CBP、CDP +ADM和CBP+ADM的抑制率较好 (平均值分别为82.86%、80.85%、81.92 %和82.30% ) ,4组间的差别无显著性意义 (P>0.05) ;ADM次之 (66.63% ) ;MTX最差 (30.57% ) ,与前5组比较差别均有显著性意义 (均P<0.01)。 结论 临床使用的几种抗骨肉瘤药物对OS_732细胞株均有一定的抑制作用 。

四甲基偶氮唑盐法用于非小细胞肺癌药敏试验条件的筛选

目的筛选非小细胞肺癌药敏试验的条件。方法取25例非小细胞肺癌患者的瘤细胞，用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察9种化疗药物，在不同浓度、不同时间对瘤细胞的敏感性。结果9种化疗药物对瘤细胞的敏感性，有随着药物浓度的增加、作用时间的延长而增高的趋势，但每个药物都有各自的特点。结论非小细胞肺癌细胞MTT法药敏试验的浓度应为临床用药量的计算值，药物作用时间应以48h为宜。

1,1′-二羟基-5,5′-联四唑-5-氨基四唑盐的合成及性能预估

以乙二醛、盐酸羟胺和氨基胍碳酸盐等为原料合成了1,1′-二羟基-5,5′-联四唑-5-氨基四唑盐(5-ATHTO),并对反应条件进行了优化。采用核磁共振光谱、红外光谱、质谱对其进行表征,通过DSC分析了其热稳定性,用密度泛函理论(DFT),在B3LYP/6-31+G**理论水平下估算了该化合物的爆轰性能。结果表明,在水为介质、反应时间为5h、反应温度为100℃条件下,5-ATHTO的产率最高为86.2%。该化合物在240℃左右分解,说明其热稳定性良好。结构优化后用Monte-Carlo方法估算5-ATHTO的理论密度为1.85g/cm3,用Born-Haber循环求得生成热为808.5kJ/mol,用Kamlet-Jacobs公式估算出爆热为1 504.35J/g,爆速为8.25km/s,爆压为32.6GPa,撞击感度的计算值为52cm,表明5-ATHTO是具有良好爆轰性能的钝感含能化合物。

四唑盐比色试验中有关条件的探讨

用10种细胞对四唑盐比色试验(MTT assay)中波长、MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑嗅盐]作用时间、细胞数、MTT结晶物溶解后放置时间等因素与光吸收值的关系进行了研究.结果表明:在微孔培养板中当细胞生长不过度时,MTT结晶物形成的量与细胞数量成正比;MTT与细胞充分发生作用所需时间因细胞不同而有差异,其范围为2-8h;结晶物经二甲亚砜溶解后,光吸收最大值为波长490—515 nm;该溶液在室温下保持稳定至少12 h.

四唑盐比色法评价聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物的细胞毒性

目的评价聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物的细胞毒性。方法采用能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的比色分析方法MTT比色法,分别检测对聚乳酸、聚乙醇酸细颗粒对小鼠胚胎成纤维细胞相对增殖率的影响,评价其细胞毒性。结果参照美国药典的评价标准,两类医用高分子材料均呈现较高的细胞相对增殖率,其细胞毒性为1级,即无细胞毒性。结论聚乳酸、聚乙醇酸无细胞毒性。

四甲基偶氮唑盐比色法测定人外周血NK细胞活性的改进

四甲基偶氮唑盐比色法测定人外周血ＮＫ细胞活性的改进杨建英李红育徐以珍（甘肃省地方病防治研究所，兰州７３００３０）关键词效靶比例（Ｅ／Ｔ）四甲基偶氮唑盐自然杀伤细胞自然杀伤细胞（ＮＫ）活性检测已作为临床观测肿瘤、病毒感染、免疫功能异常等常用指标之一。检...

SAXS对NLO芪唑盐LB薄膜稳定性的研究

具有优良NLO性质的芪唑盐(记为S)已被用于制备LB薄膜,但其成膜性不好,稳定性差;S和花生酸镉(记为A)的混合系虽可改善成膜性,但在此混合膜系中,S相的稳定性仍然不佳。应用SAXS和微机模型拟合(MCMI)研究了上述两类LB薄膜的凝聚态结构,结果指出:在LB薄膜的二维类晶系结构中,S分子中呈哑铃形的芪唑基倾向于作倾斜状的密堆砌,S分子中的丙条脂肪链则倾向于采取全反式燕尾式构象,而且脂肪链只占S分子长的2/3,这就导致了S分子在二维类晶系结构中凝聚力的下降,以及造成LB薄膜层状超分子结构的破坏和崩塌。

乳酸脱氢酶法和四唑盐比色法对纳米银抗菌凝胶细胞毒性评价的比较研究

目的:采用两种体外细胞毒性方法评价纳米银抗菌凝胶的细胞毒性,旨在评估两种方法在纳米银抗菌凝胶毒性评价中的适宜性及优缺点,为该产品的细胞毒性研究提供技术支持。方法:采用乳酸脱氢酶(LDH)试验和四唑盐比色法(MTT试验)对抗菌凝胶进行细胞毒性评价。结果:MTT试验结果显示抗菌凝胶100%浸提液(0.1g/mL)和70%、60%、50%、40%、20%系列稀释液细胞相对存活率分别为:1%,2%,1%,27%,89%,96%;LDH试验结果显示抗菌凝胶100%浸提液(0.1g/mL)和70%、60%、50%、40%、20%稀释液的LDH总释放率为:2%,3%,10%,55%,28%,16%。MTT试验的IC50为0.048g/mL,抗菌凝胶IDH试验的LC50为0.051g/mL。结论:两种方法测得的细胞毒性随着试验样品浓度的降低均降低,两者的趋势一致,且其IC50浓度接近,两种方法从不同角度阐明了该产品的毒性,为临床合理用药提供数据支持。