基质金属蛋白酶-9和唾液酸化Lewis-X抗原表达与肝癌侵袭转移相关性研究

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和唾液酸化Lewis-X抗原(sialyl Lewis-X,SLeX)与肝细胞性肝癌(HCC)侵袭转移的相关性。方法对45例HCC根治性切除病理组织切片进行苏木精-伊红染色,并用CD105,MMP-9,SLeX进行免疫组化染色,计数被CD105抗体染色的肿瘤血管内皮细胞数,以测定微血管密度(MVD),并对MVD与MMP-9、SLeX的关系进行分析。结果MMP-9、SLeX表达都呈阳性的肝癌组织微血管密度高于MMP-9和SLeX单阳性及二者均阴性的肝癌组织。结论MMP-9高表达有利于癌组织局部浸润,SLeX高表达有利于癌细胞血行转移。

唾液酸化路易斯-X抗原和CD44v6表达与胆管癌生物学行为的关系

目的 探讨唾液酸化路易斯 X(sialylLewis X ,SLeX)抗原和CD44v6表达与胆管癌生物学行为的关系。方法 用催化信号放大 (catalyzedsignalamplification ,CSA)免疫组化方法 ,检测 43例胆管癌组织及 10例慢性胆管炎组织中SLeX抗原和CD44v6蛋白的表达 ,分析SLeX和CD44v6蛋白的表达与胆管癌临床病理特征的关系。结果 在胆管癌组织中 ,SLeX和CD44v6表达阳性率分别为 67.4%和 62 .8% ,显著高于对照组的 2 0 .0 % (P<0 .0 5)。SLeX和CD44v6表达阳性率与胆管癌的TNM分期、分化程度、淋巴结和脏器转移密切相关 (P<0 .0 5)。SLeX表达与CD44v6表达呈正相关 (r =0 .49,P<0 .0 0 1)。

人胃腺癌组织中唾液酸化路易斯-X抗原的测定

目的:检测人胃腺癌组织中唾液酸化路易斯-X(SLeX)抗原的表达,并探讨其与胃腺癌转移潜能的关系。方法:采用原位杂交技术检测36例人胃腺癌组织(男22例,女14例;≤60岁16例,>60岁20例;肿瘤直径≤5cm13例,>5cm23例;高、中分化11例,低分化25例;有淋巴结转移24例,无淋巴结转移12例;浸润至黏膜下层以内6例,肌层11例,浆膜层19例;组织学分级,Ⅰ级3例,Ⅱ级9例,Ⅲ级24例;TNM分期,Ⅰ、Ⅱ期11例,Ⅲ、Ⅳ期25例)、15例相应癌旁不典型增生组织及10例正常胃黏膜组织中SLeX抗原合成酶α-1,3岩藻糖转移酶(α-1,3Fuc-T)的mRNA表达水平,应用免疫组织化学检测3种组织中SLeX抗原的蛋白表达水平。结果:胃腺癌组织中SLeX抗原和α-1,3Fuc-TmRNA阳性表达率高于正常组织、癌旁不典型增生组织,差异均有统计学意义(P均<0.05)。胃腺癌组织中,Slex抗原和α-1,3Fuc-TmRNA的阳性表达率与分化程度、淋巴结转移情况、浸润深度、组织学分级和TNM分期相关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小无关(P均>0.05)。结论:SLeX抗原表达与人胃腺癌转移和浸润密切相关,可作为判断胃腺癌浸润和转移的指标之一。

肝细胞癌中唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原和P16基因蛋白的表达及其意义

目的 :探讨唾液酸化的路易斯寡糖 X抗原 (sialylLewis X ,SLeX)和P16基因蛋白表达与肝细胞癌 (HCC)转移和预后的关系。方法 :应用免疫组织化学方法 ,检测分析 110例HCC组织中SLeX及P16蛋白表达 ,结合随访资料分析。结果 :在HCC中 ,SLeX和P16阳性表达率分别为 3 9.1%和 3 4.5 %。SLeX阳性表达的HCC转移率高 (P <0 .0 5 )、分化程度和患者 >5年生存率低 (P <0 .0 5 ) ;P16阳性表达的HCC转移率低 (P <0 .0 5 )、分化程度和患者 >5年生存率高 (P <0 .0 5 )。表达SLeX与P16表达呈负相关 (r =- 0 .5 6,P <0 .0 0 1)。结论 :SLeX和P16表达与HCC转移和患者生存期密切相关 。

唾液酸化Lewis-X抗原和P16在胆管癌中表达的临床意义

探讨唾液酸化Lewis -X(sialylLewis-X ,SLeX)抗原和P16基因蛋白表达与胆管癌病理指标的关系。应用免疫组化方法 ,检测 43例胆管癌组织中SLeX抗原和P16基因蛋白表达 ,综合分析了SLeX和P16蛋白表达与胆管癌临床病理因素间的关系。在胆管癌组织中 ,SLeX和P16表达阳性率分别为 67 4%和 44 2 %。SLeX高表达和P16低表达与胆管癌的TNM分期、分化程度和转移密切相关 (P <0 0 5 )。SLeX表达与P16表达呈负相关 (r =-0 5 4,P <0 0 0 1)。

唾液酸化路易斯-A抗原在宫颈癌的表达及意义

目的 :探讨唾液酸化路易斯 -A抗原 (SLe A)在宫颈癌组织的表达及其意义。方法 :采用免疫组织化学染色技术检测了10 0例宫颈癌组织 ,分析其表达水平与临床特征的相关性。结果 :SLe A在非癌组织中无明显表达 ,在宫颈癌组织中的表达率为 66% ,其表达与宫颈癌的病理类型、癌灶大小和患者年龄无关 (P>0 .0 5 ) ,SLe A在细胞分化程度低、临床分期晚、有转移、复发及预后差的患者中的表达显著增强 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论 :SLe A的表达与宫颈癌的恶性潜能成正相关。

中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种宿主后中肠组织化学的动态观察

对中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种组和佐剂对照组宿主后中肠蛋白质、糖原和多糖以及DNA的动态变化进行了观察。结果表明：中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种宿主后，中肠上皮细胞蛋白质含量较对照组明量降低。多糖组织化学显示，蜱中肠上皮发生破损，基膜可出现松散和断裂现象，但糖原及多糖含量与对照组相比无显著性变化。DNA含量也较对照组明显下降（P＜0．01）、结果提示：抗蜱免疫作用可干扰蜱中肠上皮细胞蛋白质和核酸的代谢，而对糖代谢无明显影响。

利用人唾液做基础吸收精制抗N血清

本文介绍先采用人唾液对粗制抗N血清做基础吸收后,再通过红细胞抗原进行精制的一种新方法。精制的抗N血清具有效价高、特异性好的特点,且减少了因用人红细胞重复吸收而引起的溶血反应。

乳腺癌Lewis X和唾液酸化Lewis X表达研究

目的:研究Lewis X(LeX)和唾液酸化 Lewis X(sLeX)在乳腺癌组织中表达状况及其与肿瘤发生、分化、转移及预后的关系。方法:应用催化信号放大法(CSA)检测120例乳腺癌、71例转移淋巴结和30例远离癌组织的正常乳腺组织上皮细胞LeX和sLeX的表达状况。结果:LeX和sLeX阳性物质在远离癌组织的正常乳腺组织上皮细胞中阳性率分别为 70 .0%(21 /30)和 20 .0%(6 /30),而在乳腺癌组织中阳性率分别为81. 7%(98 /120)和86. 7%(104 /120),转移淋巴结标本中阳性率分别为66 .2%(47 /71)和88. 7%(63 /71)。结论:癌细胞膜Lewis糖抗原异常糖基的形成及其唾液酸化,可能与肿瘤转移行为有关。sLeX可以作为预测乳腺癌侵袭、转移的肿瘤相关抗原,对评估患者预后较 LeX具有更重要的临床意义。

基质金属蛋白酶-26和唾液酸化Lewis-X蛋白在乳腺癌中的表达及其意义

目的研究基质金属蛋白酶-26(matrix metalloproteinase-26,MMP-26)和唾液酸化Lewis-X(sialy lLewis-X,SLeX)抗原蛋白在乳腺癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系。方法应用免疫组化催化信号放大法检测120例乳腺癌、71例转移淋巴结和30例正常乳腺组织中MMP-26和SLeX蛋白的表达水平。结果MMP-26和SLeX蛋白在正常乳腺组织上皮细胞中的表达阳性率分别为16.7%(5/30)和20.0%(6/30),而在乳腺癌组织中两者的表达阳性率分别为63.3%(76/120)和86.7%(104/120),差异有统计学意义(P<0.05)。在有淋巴结转移的乳腺癌组织中,SLeX表达阳性率〔100%(71/71)〕明显高于无淋巴结转移者〔67.3%(33/49)〕,P<0.05,而MMP-26表达阳性率差异则无统计学意义(P>0.05)。在有癌转移的淋巴结中,MMP-26和SLeX蛋白表达阳性率分别为23.9%(17/71)和88.7%(63/71),后者与原发癌组织中的表达具有较高一致性(r=0.874,P<0.05)。结论乳腺癌组织中MMP-26和SLeX蛋白均呈高水平表达,并且后者与淋巴结转移密切相关。作为预测乳腺癌侵袭和转移的肿瘤相关抗原,联合检测MMP-26和SLeX对评估患者的预后具有重要实用价值。

唾液酸转移酶对肿瘤中唾液酸化结构的影响

随着侵袭能力的增强,肿瘤细胞表面经常会出现唾液酸化糖链结构的增加。现在已经证实许多特殊的唾液酸化结构,如TF类抗原、sLew类抗原、α2-6唾液酸化的乳糖胺结构、PSA结构、神经节苷脂结构都参与细胞间的相互作用。本文综述了与肿瘤相关的特殊的唾液酸化结构的改变与相应的唾液酸转移酶在其中发挥的作用。

SLeX抗原和CD44v6基因与结直肠癌的关系研究

目的探讨唾液酸化的路易斯寡糖-X(SLeX)抗原和CD44v6基因表达与结直肠癌生物行为间的关系。方法采用高敏催化信号放大免疫组化技术,检测120例结直肠癌组织、30例正常大肠粘膜组织中SLeX抗原与CD44v6基因表达水平,并分析它们与结直肠癌生物行为和临床因素的相关性。结果 120例结直肠癌中SLeX抗原和CD44v6基因阳性表达率为89.2%和85.8%,30例正常组织中均为阴性,两组差异具有统计学意义(P<0.01);SLeX抗原和CD44v6基因表达呈显著正相关,结直肠癌患者的临床分期越晚、分化程度越低、有淋巴结及远处器官转移、患者的生存期越短的癌组织中SLeX抗原和CD44v6基因表达水平越高(P<0.05)。结论 SLeX抗原和CD44v6基因表达参与结直肠癌的侵袭与转移,是判定结直肠癌患者预后的重要生物学指标。

Sialyl Lewis-X抗原在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨大肠癌组织中唾液酸化的路易斯寡糖-X(Sialyl Lewis-X,SLeX)抗原表达及其临床意义。方法采用高敏感性的催化信号放大免疫组化技术,检测SLeX抗原在78例大肠癌、20例癌旁组织和20例正常大肠黏膜组织中的表达,分析其与大肠癌临床病理因素的关系。结果大肠癌中SLeX抗原阳性表达率为82.1%,癌旁组织中为35%,正常组织中为阴性,三者之间差异具有显著性(P<0.01);SLeX抗原表达与大肠癌的临床分期、分化程度、淋巴结及远处转移和预后有关(P<0.05)。结论SLeX抗原表达与大肠癌的侵袭、转移有关,并在大肠癌发生、发展中发挥重要作用,检测大肠癌中SLeX抗原表达可作为判定其预后的生物学指标。

抗口腔支原体、精氨酸支原体单克隆抗体的制备及其应用方法的初步研究

用口腔支原体、精氨酸支原体抗原免疫ＢＡＬＧ／ｃ小鼠，取其脾细胞，与小鼠骨髓瘤细胞（Ｓｐ２／０）融合，获得了７株稳定分泌抗口腔支原体单克隆抗体（ＭｃＡｂ），２株分泌抗精氨酸支原体ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。间接ＥＬＩＳＡ测定其抗体效价可达１：１０３～１：１０７；９株ＭｃＡｂ中１株为ＩｇＧ２ａ，其余均为ＩｇＧ１。初步建立了ＥＬＩＳＡ检测支原体的方法。

中华硬蜱叮咬免疫接种宿主后中肠病理变化的动态观察

目的为系统观察中华硬蜱成虫叮咬蜱抗原免疫接种组和佐剂对照组宿主后中肠上皮形态学动态变化。方法选用中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种组0兔和佐剂对照组兔，分别在叮咬后24h、48h、72h以及第5、8天电镜下观察中肠上皮形态学变化。结果中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种宿主后，蜱中肠上皮遭到较严重程度的损伤和破坏，消化细胞表面微绒毛减少、变短、排列不整，细胞内粗面内质网扩张，线粒体嵴减少，高铁血红素颗粒及脂滴较对照组明显减少，基底迷路系统空泡化，基膜变性、松散和断裂等。而对照组蜱中肠消化细胞发育正常。讨论结果提示在蜱抗诱导的宿主抗蜱免疫作用中，蜱中肠是主要损伤部位，中肠的病理损伤是蟀吸血、生殖能力变化的病理学基础。

唾液酸化路易斯抗原X ssDNA适配子的筛选与鉴定

目的建立体外获得唾液酸化路易斯抗原X（SLeX）ssDNA适配子（aptamers）的方法。方法构建长度为70m的初始随机单链DNA库，其中含30个随机序列，以溴化氰活化的琼脂糖小球为筛选介质，运用指数富集配体的系统进化技术（SELEX技术）获得SLeX的ssDNA适配子。将适配子库克隆、测序，采用DNAMAN软件对其结构进行分析，通过生物素-亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定适配子与SLeX的亲和力。结果经逐轮筛选，所得富集库与SLeX的亲和力逐步提高（A值从0．145增加到了0．460），大部分适配子克隆测序后与预期相符。结论经9轮筛选获得的ssDNA适配子与SLeX的体外结合有高度的特异性及亲和力。

特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子抑制肝癌细胞株HepG2体外侵袭转移

目的观察特异结合唾液酸化LewisX（SLeX）抗原DNA适配子抑制HepG2细胞与E一选择素黏附能力及其体外抑制HepG2细胞浸润转移能力。方法采用黏附实验、Transwell体外侵袭实验，检测该适配子对HepG2细胞与E选择素黏附及对HepG2细胞体外侵袭的影响。结果该DNA适配子可有效抑制HepG2细胞与E-选择素黏附，黏附细胞数随适配子浓度的增加而减少（P〈0．01），20nmol浓度的适配子与单克隆抗体CSLEX-1效果相似；Transwell侵袭实验中，5、10、20nmo]适配子组的侵袭细胞数分别为159．00±3．27、142．00±5．50、115．00±5．07，与对照组（178．00±4．64）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子町以抑制HepG2细胞与E-选择素黏附，阻断Lewis-selectin途径，抑制HepG2细胞体外侵袭转移。

E-选择素与肿瘤转移研究进展

肿瘤的转移是一个复杂的多步骤过程,它是恶性肿瘤致死性的关键因素.粘附分子与内皮细胞的粘附在此过程中起着重要作用.E-选择素(E-selectin)是粘附分子中的一类,仅表达在内皮细胞上.E-selectin的结构和功能及在肿瘤转移方面的研究表明:静息时,内皮细胞上的E-selectin含量甚微;当内皮细胞受到炎症介质白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-alpha(TNF-α)、细菌脂多糖(LPS)等刺激后,E-selectin的表达4h可达高峰,24h下降.唾液酸化的Lewis血型抗原(sialyl-Lewisx)是E-selectin的配体,它和E-selectin相互作用共同在肿瘤转移过程中起着重要作用.

共免疫对跳蚤叮咬引起的猫过敏性皮炎保护效果评价

为评价共免疫r FSA1和p VAX-FSA1对于猫跳蚤过敏性皮炎(FAD)的预防免疫保护效果,用人工合成的跳蚤唾液抗原(FSA1)基因,分别构建原核表达质粒p ET28a-FSA1和真核表达质粒p VAX1-FSA1。p ET28a-FSA1转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达纯化FSA1,获得r FSA1。12月龄以上猫共免疫r FSA1+p VAX-FSA1,第14天实施二免后,进行跳蚤叮咬,连续4轮,跳蚤叮咬结束后,统计皮炎评分。结果显示,第4轮攻跳蚤后共免疫r FSA1+p VAX-FSA1组的猫皮炎评分远远低于FAD对照组,说明共免疫r FSA1+p VAX-FSA1能抑制FAD症状,对跳蚤叮咬猫引起的过敏性皮炎有显著保护效果,可以作为预防猫跳蚤过敏性皮炎的良好办法。

RNA干扰敲减FucT Ⅶ表达抑制人结肠癌细胞HT-29和HUVECs的粘附能力

探讨利用RNA干扰(RNAi)技术抑制岩藻糖基转移酶Ⅶ(FucT Ⅶ)表达对人结肠癌细胞HT-29与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)粘附能力的影响及其机制.本课题构建3对针对FucT Ⅶ基因的RNAi表达载体,并将其转染入人结肠癌细胞HT-29,Western印迹检测FucT Ⅶ及其下游产物sLeX蛋白的变化;实时PCR检测FucT Ⅶ mRNA表达的变化;玫瑰红染色法检测RNAi对HT-29与HUVECs细胞粘附能力的影响.结果显示,3对FucT Ⅶ siRNA表达载体均可有效抑制HT-29细胞FucT Ⅶ mRNA和蛋白表达,以pSilencer 2.0-FucT Ⅶ 2最为有效;与空白细胞组比较,转染pSilencer 2.0-FucT Ⅶ的HT-29细胞表面sLeX表达水平明显下降,以pSilencer2.0-FucT Ⅶ 2最为显著;RNA干扰FucT Ⅶ表达后HT-29细胞和HUVEC之间的粘附能力明显受到抑制.研究表明,RNAi靶向沉默HT-29细胞中FucT Ⅶ基因表达可显著降低其下游产物sLeX的合成,进而抑制HT-29细胞与HUVECs的粘附能力.