应用WGCNA分析挖掘唾液腺多形性腺瘤恶变关键节点基因及通路

目的:基于高通量转录组测序及WGCNA,挖掘唾液腺多形性腺瘤(PA)恶变为癌在多形性腺瘤中(Ca-ex-PA)过程中的核心驱动基因及相关通路。方法:收集PA、Ca-ex-PA患者肿瘤及癌旁唾液腺的新鲜标本各5例,进行高通量转录组测序(RNA-Seq)分析,筛选PA与瘤旁唾液腺组、Ca-ex-PA与癌旁唾液腺组中的差异表达基因。取PA、Caex-PA共有的差异表达基因进行WGCNA分析,获得与PA恶变相关的基因群体。结果:测得良、恶性肿瘤共有差异表达基因426个,通过WGCNA得到的4个模块中,包含78个基因与恶性肿瘤表型相关。其中评分最高的EFNA3基因表达程度与高组织学分级的腺癌亚型显著相关(P<0.05)。结论:WGCNA能有效筛选出与PA恶变相关的核心驱动基因,EFNA3过表达可能与PA恶变有关,其作为预后评估和治疗靶点的价值有待进一步研究。

唾液腺多形性腺瘤恶变108例临床病理分析

目的:研究唾液腺多形性腺瘤恶变的临床病理特点。方法:回顾分析上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科1993年1月至2005年5月间唾液腺多形性腺瘤恶变病例的病理与临床资料。结果:108例唾液腺多形性腺瘤恶变病例,男68例,女40例,男女比为1.7∶1;年龄28～92岁,60～70岁最好发(29例),其次为50～60岁(22例)、70～80岁(20例)和40～50岁(19例)。发生于腮腺者68例,腭部20例,下颌下腺15例,其他部位包括唇、咽旁小唾液腺等。恶变成分主要为腺癌(26例),其次为肌上皮癌(19例),黏液表皮样癌(6例,包括低、中、高度恶性),腺样囊性癌(4例),其他有腺鳞癌、上皮-肌上皮癌、腺泡细胞癌、唾液腺导管癌、鳞癌等。5例发生颈部淋巴结转移,约占4.6%,其原发灶的恶变成分主要为腺癌。结论:唾液腺多形性腺瘤恶变多见于中老年男性,好发于腮腺,其次为下颌下腺和腭部,恶变成分多为腺癌和肌上皮癌;发生颈淋巴结转移者,恶变成分多为腺癌。

唾液腺多形性腺瘤恶变分子机制研究进展

多形性腺瘤(PA)是唾液腺最常见的上皮性肿瘤,具有交界性肿瘤的特性,肿瘤病程长或多次复发可恶变为恶性PA。PA的恶变过程是多基因、多因素参与的。细胞染色体改变、基因变异、表观遗传学改变以及转录因子、细胞周期调控因子、细胞黏附分子等各种调控因子的改变均参与唾液腺PA的恶变过程。

小唾液腺来源复发性多形性腺瘤的临床分析

目的:探讨分析小唾液腺来源的复发性多形性腺瘤(recurrent pleomorphic adenoma,RPA)的临床病理特点及预后。方法:回顾性收集2011年1月至2020年12月间就诊于我院的小唾液腺来源RPA患者的临床资料,并结合文献复习分析其临床特点及预后情况。结果:共收集17例小唾液腺来源的RPA,其中男性5例,女性12例;年龄为14~80岁,中位年龄为52岁;平均复发次数为2.8次,平均复发间隔为7.9年。按发病部位来分,发生于腭部的最为多见(52.9%),其次为颊部(29.4%)。复发肿瘤较大时可引起一定的症状,如骨质吸收、咽腔阻塞及面部膨隆等。17例患者中共计7例(41.2%)出现恶变,其中腭部来源的9例RPA中,有5例(55.6%)发生恶变。手术治疗的预后较好,平均随访5.7年,其中15例(88.2%)患者为无瘤生存状态。结论:小唾液腺来源的RPA是一种较为少见的临界性肿瘤,好发于腭部,复发间隔时间较长。反复复发的小唾液腺来源的RPA易出现恶变,手术治疗的预后较好。

左侧腮腺巨大多形性腺瘤恶变1例

多形性腺瘤是最常见的唾液腺肿瘤之一,然而特别巨大的多形性腺瘤伴恶变较为少见。本文报道了1例77岁男性左腮腺巨大多形性腺瘤恶变患者的诊治经过,查体见一大小约20.0 cm×18.0 cm×18.0 cm的肿物,手术完整切除肿物。

43例小唾液腺癌在多形性腺瘤中的影像学表现

目的:总结小唾液腺癌在多形性腺瘤中的CT和MRI特征,分析其与病理分型的相关性。方法:收集经手术后病理检查证实的小唾液腺癌在多形性腺瘤中患者43例,分析CT和MRI表现,并将其与病理分型相关联。采用SPSS 25.0软件包中的Fisher确切概率法分析Ⅰ/Ⅱ型和Ⅲ型之间肿瘤形态、边界、内部结构、骨质侵犯和颈淋巴结转移等与病理分型的相关性。结果:83.7%(36/43)的肿瘤边缘呈分叶状;81.4%(35/43)内部出现囊变或坏死,呈现不均匀强化;37.2%(16/43)可见粗钙化或混合钙化灶;25.6%(11/43)出现邻近骨质压迫性吸收。75%(12/16)的Ⅰ/Ⅱ型肿瘤形态规则(圆形或卵圆形),77.8%(21/27)的Ⅲ型肿瘤形态不规则。93.8%(15/16)的Ⅰ/Ⅱ型肿瘤边界清楚,66.7%(18/27)的Ⅲ型肿瘤边界模糊。59.3%(16/27)的Ⅲ型肿瘤出现溶骨性骨质吸收。Ⅰ/Ⅱ型肿瘤平均最大径显著小于Ⅲ型(P<0.05)。Fisher确切概率法分析显示,肿瘤形态、边界、溶骨性骨质吸收3种影像特征与病理分型相关(P<0.001)。结论:大部分小唾液腺癌在多形性腺瘤中的CT和MRI表现以边缘分叶状,不均匀强化为共同特征。Ⅰ/Ⅱ型肿瘤形态多呈圆形或卵圆形、边界清楚,罕见溶骨性骨质破坏;Ⅲ型肿瘤多数形态不规则、边界模糊且易出现溶骨性骨质破坏。将形态、边界和溶骨3种特征相结合,更有助于鉴别Ⅰ/Ⅱ型和Ⅲ型肿瘤。

肿瘤间质成纤维细胞对体外培养唾液腺多形性腺瘤细胞生物学行为的影响

目的探讨肿瘤间质成纤维细胞(TSF)对体外培养唾液腺多形性腺瘤(SPA)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用组织块培养法培养唾液腺多形性腺瘤细胞(SPAC)、TSF和瘤旁正常成纤维细胞(NF),并通过免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。选取对数期TSF、NF制备条件培养液,培养SPAC并命名为TSF-SPAC组和NF-SPAC组,单纯培养SPAC作为对照组(SPAC组)。采用MTT实验、Transwell实验和划痕实验分别检测3组细胞的增殖、侵袭和迁移能力;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测3组培养液中血管内皮生长因子(VEGF)的表达量。结果免疫细胞化学染色显示:波形蛋白(Vimentin)在TSF和NF中为阳性,而α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞活化蛋白(FAP)在NF中为阴性,在TSF中为弱阳性。MTT结果显示:TSF-SPAC组细胞增殖与NF-SPAC组和SPAC组的差异有统计学意义(P<0.05),NF-SPAC组与SPAC组的细胞增殖的差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell侵袭实验和迁移实验显示:3组细胞的侵袭和迁移的差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA检测结果显示:3组VEGF的表达量的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论TSF可能参与了SPA的生物学行为,促进体外培养的SPAC增殖,对其体外侵袭和迁移无促进作用,为SPA寻找新的治疗靶点提供了方向。

3.0 T动态对比增强MRI联合扩散加权成像在鉴别唾液腺多形性腺瘤和基底细胞腺瘤中的诊断价值

目的 探讨动态对比增强MRI(dynamic contrast-enhanced MRI, DCE-MRI)联合扩散加权成像(diffusion weighted imaging, DWI)鉴别唾液腺多形性腺瘤(pleomorphic adenoma, PA)和基底细胞腺瘤(basal cell adenoma, BCA)的价值。材料与方法 回顾性分析2018年12月至2022年8月济宁市第一人民医院经病理证实的唾液腺肿瘤患者病例55例,其中PA 38例,BCA17例,从影像归档和通信系统收集所有患者的MRI影像资料,对比分析两肿瘤的时间-信号强度曲线(time intensity curve,TIC)类型、定量参数[转运常数(volume transfer constant, Ktrans)、渗出速率常数(the rate constant, Kep)、血管外细胞外容积分数(fractional volume of the extravascular-extracellular space, Ve)、血浆分数(plasma fraction, Vp)]、表观扩散系数(apparent diffusion coefficient, ADC)值。通过受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估DCE-MRI联合DWI对PA和BCA的鉴别能力。结果 PA的平均ADC值为(1.74±0.36)×10-3 mm2/s,高于BCA[(1.32±0.13)×10-3 mm2/s],差异有统计学意义(P<0.05)。17例BCA的TIC中B型5例、C型11例,38例PA的TIC中A型27例、C型10例。DCE-MRI定量参数中,PA的Kep值小于BCA,而Ve值大于BCA,P均<0.05。PA和BCA的组间Ktrans和Vp值差异无统计学意义。ADC值、TIC、Kep值和Ve值的曲线下面积(area under the curve, AUC)值分别为0.875、0.808、0.822和0.747,多参数联合的AUC值为0.895~0.952。结论 TIC、Kep值、Ve值、ADC值均有助于鉴别唾液腺BCA与PA,多参数联合进一步提高了其诊断效能。

HER2基因在唾液腺恶性多形性腺瘤细胞增殖、周期、凋亡中的作用

目的:通过体外抑制唾液腺恶性多形性腺瘤(malignant pleomorphic adenoma,MPA)中人表皮生长因子受体2(Human epithelial growth factor receptor 2,HER2),分析其与肿瘤细胞增殖、周期和凋亡等恶性生物学行为的相关性,以期评估其作为靶向治疗位点的可能性。方法:检测MPA细胞系中HER2蛋白表达及基因扩增情况,应用靶向抑制剂处理肿瘤细胞,检测肿瘤增殖、周期、凋亡等生物学行为的改变,HER2蛋白表达改变及其对下游通路的影响。采用SPSS 16.0软件包进行独立样本t检验。结果:SM-AP1、SM-AP4细胞中均存在HER2蛋白表达及HER2基因扩增,应用HER2靶向抑制剂可以显著降低肿瘤细胞的增殖能力,阻滞细胞周期进程,诱导肿瘤细胞凋亡,并且HER2下游PI3K/Akt和MAPK/ERK细胞通路受到抑制。结论:MPA肿瘤细胞系中存在HER2基因过表达及扩增,HER2在MPA恶性生物学行为中扮演重要角色。抑制HER2,可以改善MPA的恶性生物学行为。

启动子甲基化状况对唾液腺恶性多形性腺瘤体外细胞系细胞E-cadherin表达的影响

目的:通过体外改变人唾液腺恶性多形性腺瘤(malignant pleomorphic adenoma,MPA)细胞系细胞E-cadherin基因启动子甲基化情况,探讨启动子甲基化对E-cadherin表达的影响。方法:采用合适浓度的5-Aza-Cd R和TGF-β1处理MPA细胞系SM-AP4和SM-AP1细胞,分别使用蛋白免疫印迹法、亚硫酸盐测序法、实时荧光定量PCR检测用药前、后E-cadherin蛋白表达、E-cadherin基因启动子甲基化状况、m RNA表达;同时采用划痕实验、Transwell小室检测用药前、后细胞迁移能力的变化。应用SPSS13.0软件包对数据进行独立样本t检验。结果:经5-Aza-Cd R处理后,SM-AP4细胞E-cadherin启动子区甲基化率显著降低(P<0.01),E-cadherin蛋白和m RNA表达显著升高(P<0.05),相应的细胞迁移能力显著降低(P<0.05)。而经TGF-β1处理后的SM-AP1细胞表达Vimentin蛋白,E-cadherin启动子区甲基化率显著升高(P<0.01),E-cadherin蛋白和m RNA表达显著降低(P<0.05),相应的细胞迁移能力显著提高(P<0.05)。结论 :DNA甲基化是调节MPA体外细胞系细胞中E-cadherin表达的重要机制之一,E-cadherin表达升高对MPA细胞转移具有潜在的抑制作用。

唾液腺恶性多形性腺瘤细胞系中E-cadherin的表达差异及表观遗传调控机制

目的 :检测唾液腺恶性多形性腺瘤不同癌变亚型细胞系中E-cadherin蛋白的表达,探讨E-cadherin蛋白表达差异的表观调控机制。方法:采用免疫细胞化学法、蛋白印迹法和聚合酶链反应分别检测E-cadherin蛋白和m RNA在恶性多形性腺瘤的腺癌亚型细胞系SM-AP1和肌上皮癌亚型细胞系SM-AP4中的表达差异。采用亚硫酸盐测序法和染色质免疫共沉淀法检测SM-AP1和SM-AP4细胞中E-cadherin基因启动子DNA甲基化和组蛋白H3上赖氨酸9号位点三甲基化(H3K9me3)修饰状况,探讨2个细胞系中E-cadherin表达差异与基因DNA甲基化、组蛋白甲基化修饰之间的相关性。采用SPSS16.0软件包,运用两独立样本t检验、Fisher确切概率法等对数据进行统计学分析。结果:SM-AP1细胞中,E-cadherin蛋白和m RNA(n=4.97,P<0.05)表达较SM-AP4高;E-cadherin基因启动子区甲基化程度显著低于SM-AP4细胞(P<0.05)。SM-AP4细胞较SM-AP1细胞的E-cadherin基因启动子区具有较高的H3K9me3修饰结合水平。结论 :DNA甲基化可能是恶性多形性腺瘤肌上皮癌亚型中E-cadherin表达低于腺癌亚型的主要调控机制之一,H3K9me3修饰可能在E-cadherin表达下调过程中发挥协调调控作用。

唾液腺良、恶性多形性腺瘤172例临床病理分析

目的:探讨唾液腺良恶性多形性腺瘤临床病理特点.方法:对经病理复片诊断为唾液腺良、恶性多形性腺瘤的172例临床病理材料进行回顾性分析.结果:良性多形性腺瘤163例,腺瘤型52例(31.9%),肌上皮型60例(36.8%),粘液型51例(31.3%).恶性多形性腺瘤9例,恶变均为上皮性,腺癌3例,腺样囊性癌3例,粘液表皮样癌2例,腺鳞癌1例.颈淋巴结转移2例,局部复发2例,均为侵袭性癌,恶性成分都超过50%,组织学表现为高度恶性.结论:良性多形性腺瘤不同亚型预后无明显差异,恶性多形性腺瘤侵袭性癌多见,恶性成分常多于良性成分,侵袭性癌、组织学分级高度恶性者易发生颈淋巴结转移和复发.

涎腺多形性腺瘤恶变机制的研究进展

涎腺多形性腺瘤是最常见的涎腺上皮性肿瘤,多次复发或病程长者可恶变为恶性多形性腺瘤。涎腺多形性腺瘤的恶变是多因素、多基因变异的综合病变过程。研究发现,细胞遗传学改变、癌基因、抑癌基因、黏附分子及细胞外基质蛋白在涎腺多形性腺瘤的恶变过程中均有一定的作用。本文就多形性腺瘤恶变机制的研究进展作一综述。

CD44v6在涎腺多形性腺瘤及其恶变中表达的研究

目的 研究CD4 4v6在涎腺多形性腺瘤 (PA)及其恶变 (Cain -PA)中的表达 ,旨在探讨涎腺多形性腺瘤的恶变机制。方法 应用免疫组化方法检测 2 5例涎腺多形性腺瘤、2 5例涎腺多形性腺瘤恶变CD4 4v6的表达。结果 CD4 4v6在PA及Cain -PA中表达存在统计学显著差异 (P <0 .0 1)。结论 涎腺多形性腺瘤呈CD4 4v6强表达 ,恶变后呈弱表达 ,细胞间粘附力减弱 ,从而利于浸润转移。CD4 4v6在Cain -PA的原发灶及转移灶中弱或不表达 ,显示瘤细胞粘附力弱 ,易于脱离肿瘤主体发生转移。

唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中hMSH2、hMLH1蛋白的表达和意义

探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1蛋白在唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中的表达及意义。免疫组织化学SP法检测涎腺多形性腺瘤27例及癌在多形性腺瘤中蜡块标本22例,共49例标本hMSH2、hMLH1蛋白的表达情况。涎腺多形性腺瘤瘤旁正常组织、涎腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中hMSH2、hMLH1蛋白表达的阳性率分别为28.57%和42.86%、96.3%和85.19%及90.91%和86.36%。hMSH2及hMLH1在涎腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中均表达上调。

基于RNA-Seq分析挖掘唾液腺多形性腺瘤核心基因及通路

目的:筛选多形性腺瘤(pleomorphic adenoma,PA)与瘤旁唾液腺腺体间的差异表达基因,挖掘PA形成过程中的核心基因及通路。方法:采用RNA-Seq技术,检测5例PA患者的配对肿瘤与瘤旁唾液腺腺体,筛选2组间差异基因。运用蛋白互作数据库STRING分析预测差异基因所编码蛋白间的相互作用。筛选互作网络中的核心模块及核心基因,分析核心模块中激活的信号通路,预测上述模块与PLAG1可能的相互作用关系。RT-PCR验证核心基因在20例PA患者的配对肿瘤组织及瘤旁唾液腺中的表达。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:共测得3810个差异基因,其中2021个下调,1789个上调。核心模块中存在PI3K-AKT信号通路、ER受体信号通路、Rap1信号通路、cGMP-PKG信号通路的激活。PLAG1可能通过PHLPP1、LRRK2、β-catenin蛋白与核心模块发生作用。RTPCR显示,核心基因在20例PA样本及其瘤旁唾液腺组织中的差异趋势与测序结果一致,且具有统计学意义(P<0.0001)。结论:核心基因ADCY3、 ADCY5、 ADORA1、 APLN、 APP、 C5、 CCL28、 DRD2、 FPR3、 GABBR1可能在PA发生、发展过程中起着重要作用,可为预防PA复发及预后标志物筛选提供思路。PLAG1可能通过PHLPP1、LRRK2、β-catenin间接激活PI3K-AKT信号通路、ER受体信号通路、Rap1信号通路、cGMP-PKG信号通路,从而诱发PA形成。

涎腺多形性腺瘤恶变的临床特征

目的探讨涎腺多形性腺瘤恶变的临床特征。方法总结涎腺多形性腺瘤临床表征。结果几种临床表现都证实腺瘤恶变的形成。结论多形性腺瘤从良性到恶变的客观规律,是可以通过临床表征来诊断,要患者特别关注,并且值得医学同行们共同探讨和借鉴。

多形性腺瘤基因1与唾液腺肿瘤

近年来学者发现,多形性腺瘤基因1的激活和表达与多形性腺瘤及其他唾液液肿瘤的发生密切相关。多形性腺瘤基因1具有转录因子活性,通过对下游靶基因的表达调控而发挥生物学功能。对多形性腺瘤基因1及其相关基因的功能以及其在多形性腺瘤发病机制中的作用研究,在口腔颌面肿瘤领域具普遍指导意义。

Nrf2在唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中的表达及意义

目的:探讨唾液腺多形性腺瘤(SPA)及癌在多形性腺瘤(CPA)组织中的核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达及临床意义。方法:收集已经确诊的50例SPA(n=44)和CPA(n=6)及瘤旁样本的石蜡标本,采用S-P免疫组化的方法进行检测,明确Nrf2在肿瘤及正常组织的表达,同时发现Nrf2与肿瘤的组织病理学特征之间的相关性。结果:Nrf2在SPA及CPA组织中表达高于肿瘤旁组织(P<0.05),其表达程度同肿瘤的病理类型呈正相关(P<0.05),CPA中的表达率明显高于原发性(n=39)和复发性(n=5)SPA(P<0.05),在正常腮腺组织中表达率明显低于在唾液腺良恶性肿瘤表达率(P<0.05)。结论:Nrf2与SPA和CPA的生长及病理类型关系密切,对二者的预后及鉴别诊断有重要意义。