唾液酸粘蛋白单抗5E2、6C10的制备、鉴定及对胃肠癌糖链表达规律的初步探讨

目的 寻找识别新的肿瘤相关粘蛋白抗原的单抗,为阐明胃肠癌粘液糖蛋白的表达规律进而为胃肠肿瘤的预后、分型等提供参考依据。方法 以牛颌下腺粘蛋白(BSM)为免疫原免疫小鼠,以免疫脾细胞与Sp2/0细胞融合建立杂交瘤细胞株,用有限稀释法克隆化,间接ELISA及间接ELISA结合神经氨酸酶消化筛选克隆。以聚丙烯酰胺凝胶电泳,免疫印记(Western-Blot),间接ELISA结合热处理、胰蛋白酶消化、过碘酸氧化以及稀碱处理去除O-乙酰基等方法进行抗体的鉴定。以免疫组化LSAB法观察两株抗体对68例胃癌和55例肠癌粘蛋白糖链抗原的标记情况。结果 两株抗体分别命名为5E2和6C10,Western-Blot显示两株抗体均只与分子量大于220kDa的PAS染色阳性条带反应。两株单抗与BSM的反应都对热处理、胰蛋白酶消化、过碘酸氧化、神经氨酸酶消化等处理敏感。5E2还对稀碱去除O-乙酰基敏感,6C10可以部分吸收sialyl-lewis^a。单抗6C10在早期胃癌及癌旁的阳性率分别为5.5％和52.9％,进展癌及其癌旁的阳性率分别为14.0％和22.9％;在结肠癌及其癌旁的阳性率分别为30.9％和83.8％。单抗5E2在胃早期癌及其癌旁的阳性率分别为16.7％和41.2％,在进展癌及其癌旁的阳性率分别为42.0％和37.5％;在肠癌及其癌旁的阳性率分别为69.1％和91.9％。结论

小鼠大肠上皮细胞恶性转化中细胞唾液酸粘蛋白的分布及意义

采用Ｎ－甲基－Ｎ－亚硝基脲（ＭＮＵ）直肠灌注诱发小鼠实验性大肠癌，以高铁双胺－奥蓝（ＨＩＤ－ＡＢ）粘蛋白组织化学方法观察诱癌过程中大肠上皮细胞唾液酸粘蛋白组织化学改变及其与大肠上皮细胞形态恶性转化的关系，结果表明第６周起小鼠远端结肠呈唾液酸粘蛋白反应上皮细胞数量显著增加，蓝染的唾液酸粘液物质多位于细胞浆、增生的腺腔缘及腺腔分泌物，起始于大肠上皮细胞形态转化之前，峰值出现于原位癌及浸润癌形成前期。提示细胞唾液酸粘蛋白含量的增加与大肠上皮细胞恶性转化密切相关，检测细胞唾液酸粘蛋白含量改变为大肠癌前期病变的诊断提供了信息。

去唾液酸粘蛋白—多聚(L)-赖氨酸—HLA-B7 真核表达质粒复合物的合成

去唾液酸粘蛋白—多聚（Ｌ）－赖氨酸—ＨＬＡ－Ｂ７真核表达质粒复合物的合成①杨洁②聂咏梅罗超权杨英浩（中山医科大学生化教研室；广州，５１００８９）主题词蛋白水解产物／生物合成中图号Ｄ１２．７７６受体介导的内吞作用转导外源基因进入靶细胞［１］，是目前所知...