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多聚唾液酸转移酶ST8SiaⅡ的结构和功能域 被引量:1
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作者 廖思明 卢波 +6 位作者 彭立新 黄纪民 陈东 Frederic A.Troy 黄日波 周国平 《广西科学》 CAS 2017年第1期120-126,共7页
ST8SiaⅡ(STX)和ST8SiaⅣ(PST)是两个来源于哺乳动物细胞的、具有高度同源性的多聚唾液酸酶,它们已经被克隆,基因序列也已被测定。这两个酶能催化神经细胞黏附分子(NCAM)的多聚唾液酸化。NCAM是多聚唾液酸(polySlA)的主要载体。在NCAM... ST8SiaⅡ(STX)和ST8SiaⅣ(PST)是两个来源于哺乳动物细胞的、具有高度同源性的多聚唾液酸酶,它们已经被克隆,基因序列也已被测定。这两个酶能催化神经细胞黏附分子(NCAM)的多聚唾液酸化。NCAM是多聚唾液酸(polySlA)的主要载体。在NCAM多聚唾液酸化过程中,STX和PST能将活化的胞苷-磷酸-乙酰神经氨酸(CMP-Neu5Ac)传送到NCAM糖蛋白受体的N-和O-型寡聚糖链上,从而合成α-2,8-多唾液酸聚糖(polySA)。近来我们使用Phyre 2软件构建了多聚唾液酸ST8SiaⅡ酶的三维结构模型,给出了该酶中多聚唾液酸转移酶结构域(PSTD)和多聚碱性氨基酸区域(PBR)两个功能域的结构特征,认为在这两个区域中有几个氨基酸残基在引起多聚唾液酸化过程中起到了关键作用。我们的研究结果为研究ST8SiaⅡ酶催化NCAM多聚唾液酸化的分子机制提供了新的结构信息,也为和该酶所联系的肿瘤细胞转移的抑制机制和抑制物/药物的研究和设计,提供更有价值的理论依据。 展开更多
关键词 肿瘤转移 多聚唾液酸(polySia) 多聚唾液酸转移酶结构域(PSTD) 多聚碱性氨基酸区域(PBR) 多聚唾液酸转移酶Ⅳ(PST) 神经细胞黏附分子(NCAM) 多聚唾液酸 蛋白质三维结构
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多聚唾液酸转移酶研究进展 被引量:7
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作者 戴功 王丽梅 +1 位作者 杨新颖 耿美玉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期24-28,共5页
多聚唾液酸(polysialic acid,PSA)是一类线性、均一多聚α2,8连接唾液酸的独特碳水化合物,它主要通过典型的N-连接糖苷键附着在脊椎动物神经系统神经黏附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)上。PSA通过改变NCAM的黏附性调节神经... 多聚唾液酸(polysialic acid,PSA)是一类线性、均一多聚α2,8连接唾液酸的独特碳水化合物,它主要通过典型的N-连接糖苷键附着在脊椎动物神经系统神经黏附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)上。PSA通过改变NCAM的黏附性调节神经细胞发育、神经导向以及突触形成,从而在神经发育中起关键作用。PSA表达的调节具有时间和结构依赖性,NCAM的唾液酸化是由两种多聚唾液酸转移酶(polysialyltrans ferases)-ST8Sia II(STX)和ST8Sia IV(PST)所催化,它们都属于6个基因编码的α2,8唾液酸转移酶家族。STX和PST都可将多个唾液酸残基转移到含有NeuNAcα2-3(或6)Galβ1-4GlcNAcβ1-R结构的N糖链受体上;两种酶共同作用时远远大于一种酶形成的PSA量。总之,多聚唾液酸转移酶可调节PSA的合成并参与了脊椎动物的神经发育。 展开更多
关键词 多聚唾液酸 多聚唾液酸转移酶 神经黏附分子 转移 神经系统 脊椎动物 神经发育 碳水化合物 PSA ACID
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鸡α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ基因的克隆和真核表达载体的构建 被引量:3
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作者 刘媛媛 王俊亚 +6 位作者 张晓娟 陈礼朋 岳旭龙 高文明 李双亮 崔保安 李新生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期21-24,共4页
试验利用Trizol法从鸡肠道组织提取总RNA,采用特异性引物通过RT-PCR扩增出α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(α-2,3-sialyltransferaseⅠ,ST3GALⅠ)基因的cDNA片段,并将其克隆至pGEM-T easy载体,获得阳性重组质粒,再以阳性重组质粒为模板亚克隆ST3... 试验利用Trizol法从鸡肠道组织提取总RNA,采用特异性引物通过RT-PCR扩增出α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(α-2,3-sialyltransferaseⅠ,ST3GALⅠ)基因的cDNA片段,并将其克隆至pGEM-T easy载体,获得阳性重组质粒,再以阳性重组质粒为模板亚克隆ST3GALⅠ基因的完整ORF区,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,进行PCR、限制性酶切和DNA序列分析鉴定。结果表明,ST3GALⅠ基因全长1029bp,测序结果同GenBank数据库收录的序列一致,无任何密码子缺失与突变,插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上的目的基因大小方向均正确。本研究成功构建了pcDNA3.1(+)-ST3GALⅠ真核表达载体,为下一步的真核表达及对ST3GALⅠ基因的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 受体 α-2 3-唾液酸转移酶 真核表达载体
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多聚唾液酸与多聚唾液酸转移酶 被引量:3
4
作者 魏江洲 周文丽 +1 位作者 郭婷婷 冯伟华 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期473-475,共3页
多聚唾液酸(PSA)是一种在神经细胞黏附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)上表达的唾液酸聚合物,在神经发育过程中起重要作用。PSA的聚合程度会影响PSA-NCAM的功能。多聚唾液酸酶主要用于合成PSA-NCAM,两种高度同源的多聚唾液酸... 多聚唾液酸(PSA)是一种在神经细胞黏附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)上表达的唾液酸聚合物,在神经发育过程中起重要作用。PSA的聚合程度会影响PSA-NCAM的功能。多聚唾液酸酶主要用于合成PSA-NCAM,两种高度同源的多聚唾液酸转移酶ST8SiaⅡ和ST8SiaⅣ都属于唾液酸转移酶家族。多聚唾液酸转移酶中NCAM的识别域和多聚唾液酸化域是截然不同的,且一些异构酶在NCAM多聚唾液酸化中起明显的负作用。多聚唾液酸酶与很多疾病都有关系,以多聚唾液酸转移酶为标靶设计的药物也将成为神经系统及肿瘤治疗的新型药物。 展开更多
关键词 多聚唾液酸 多聚唾液酸转移酶 NCAM
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系统性红斑狼疮患者外周血白细胞唾液酸转移酶表达变化及机制探讨 被引量:1
5
作者 涂洋 陈光亮 +1 位作者 曹珊 陈晓翔 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第30期17-19,共3页
目的:观察系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞唾液酸转移酶(ST8SIA)的表达变化,并探讨其机制。方法选择SLE患者(观察组)和健康志愿者(对照组)各24例,采用RT-PCR法检测外周血白细胞ST8SIA1~6 mRNA;对有统计学意义的ST8SIA... 目的:观察系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞唾液酸转移酶(ST8SIA)的表达变化,并探讨其机制。方法选择SLE患者(观察组)和健康志愿者(对照组)各24例,采用RT-PCR法检测外周血白细胞ST8SIA1~6 mRNA;对有统计学意义的ST8SIA mRNA,采用基因芯片技术分析血浆中靶向其3′非翻译区(3′UTR)的miR-NA。结果两组外周血白细胞均无ST8SIA2、ST8SIA3、ST8SIA5 mRNA表达;观察组ST8SIA1、4、6 mRNA相对表达量分别为1.524±0.229、13.780±1.669、2.238±0.387,对照组分别为1.129±0.106、1.087±0.089、0.550±0.054;两组ST8SIA4、6 mRNA比较,P均<0.05。靶向调节ST8SIA4 mRNA的miRNA表达下降12条、升高1条,靶向调节ST8SIA6 mRNA的miRNA表达下降、升高各4条。结论 SLE患者外周血白细胞中ST8SIA4、ST8SIA6 mR-NA表达升高,与对其进行靶向调控的miRNA表达异常有关。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 α2 8-唾液酸转移酶 微小核糖核酸 聚合链反应 基因芯片
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α2,6-唾液酸转移酶(ST6GalI)的表达对结肠癌细胞唾液酸化的影响 被引量:4
6
作者 林绍强 李君武 +2 位作者 王晓玉 Wolfgang Kemmner Perter M.Schlag 《现代临床医学生物工程学杂志》 2004年第1期1-4,共4页
目的 研究结肠癌细胞LS174T转染正义和反义的α2 ,6唾液酸转移酶 (ST6GalI)cDNA对结肠癌细胞表面唾液酸化及肿瘤细胞粘附功能的影响 .方法 结肠癌细胞株LS174T转染正义ST6GalIcDNA或反义ST6GalIcDNA的部分序列的表达载体pcDNA3 .1,以R... 目的 研究结肠癌细胞LS174T转染正义和反义的α2 ,6唾液酸转移酶 (ST6GalI)cDNA对结肠癌细胞表面唾液酸化及肿瘤细胞粘附功能的影响 .方法 结肠癌细胞株LS174T转染正义ST6GalIcDNA或反义ST6GalIcDNA的部分序列的表达载体pcDNA3 .1,以RT -PCR检测转染子ST6GalImRNA的表达 ,流式细胞仪检测细胞表面α2 ,6唾液酸含量 .结果 转染正义ST6GalIcDNA的克隆显示ST6GalImRNA的表达增强以及接骨木凝集素 (SNA)与细胞表面成分的结合增加 ;而转染反义ST6GalIcDNA的部分序列的细胞克隆的ST6GalImRNA的表达减少 ,SNA与细胞表面成分的结合力降低 .结论 ST6GalI的表达直接影响细胞表面α2 ,6-连接的唾液酸水平并调节肿瘤细胞的粘附功能 .利用反义核酸技术抑制ST6GalI的表达并降低肿瘤细胞表面α2 。 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 ST6GalⅠ 基因表达 结肠癌 癌细胞 唾液酸 肿瘤转移
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COPD患者支气管黏膜唾液酸转移酶mRNA表达水平的差异性
7
作者 黄勇 毕玉田 +1 位作者 钱桂生 王兴胜 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第23期2714-2715,2719,共3页
目的比较COPD和肺功能正常的肺癌手术患者相对正常的亚段以上支气管黏膜常见唾液酸转移酶mRNA表达水平的差异性。方法肺癌患者新鲜手术切除标本取远离肿瘤部位的亚段以上支气管黏膜,用RT-PCR方法检测4种黏蛋白常见唾液酸转移酶mRNA表达... 目的比较COPD和肺功能正常的肺癌手术患者相对正常的亚段以上支气管黏膜常见唾液酸转移酶mRNA表达水平的差异性。方法肺癌患者新鲜手术切除标本取远离肿瘤部位的亚段以上支气管黏膜,用RT-PCR方法检测4种黏蛋白常见唾液酸转移酶mRNA表达水平的高低。结果COPD和肺功能正常患者支气管黏膜的唾液酸转移酶3GalⅠ、Ⅲ、Ⅳ和唾液酸转移酶6GalⅠ的mRNA表达水平均无明显差异。结论COPD患者对细菌的易感染性及在急性加重期气道黏蛋白末端唾液酸结构的增多不是疾病特异性的,而更多是与感染直接相关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 支气管黏膜 唾液酸转移酶 MRNA
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大豆皂苷Ⅰ抑制唾液酸转移酶的分子机理研究 被引量:5
8
作者 王棐 张海玲 +2 位作者 光翠娥 桑尚源 杨红飞 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期355-360,共6页
从晶体结构出发,应用分子对接和结合自由能分析,研究了唾液酸转移酶(Sialyltransferase,ST)与其抑制剂大豆皂苷Ⅰ的相互作用机理,确定了它们的作用位点、作用力类型及大小。结果表明:范德华力和静电相互作用是复合物形成的主要驱动力,... 从晶体结构出发,应用分子对接和结合自由能分析,研究了唾液酸转移酶(Sialyltransferase,ST)与其抑制剂大豆皂苷Ⅰ的相互作用机理,确定了它们的作用位点、作用力类型及大小。结果表明:范德华力和静电相互作用是复合物形成的主要驱动力,极性溶剂化能则起相反作用;8个氨基酸残基Gly149、Ser151、Met172、Asn173、Phe292、Trp300、His301、Ser325与大豆皂苷Ⅰ形成疏水相互作用,11个氨基酸残基Asn150、Tyr194、Ser271、Thr272、Gly273、Ile274、Gly291、Gly293、His302、Glu305、Glu324与大豆皂苷Ⅰ形成氢键作用;大豆皂苷Ⅰ占据了ST与底物胞苷一磷酸-β-N-乙酰神经氨酸相互作用的12个氨基酸残基中的11个,可起到竞争性抑制的作用。 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 大豆皂苷Ⅰ 分子对接 结合自由能分析
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微生物来源的唾液酸转移酶研究进展 被引量:2
9
作者 宋孟迪 曾洁 +8 位作者 贾甜 张瑞瑶 胡雅婕 高海燕 苏同超 孟可心 李光磊 孙俊良 梁新红 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第5期305-310,共6页
唾液酸转移酶属糖基转移酶家族,以唾液酸胞苷单磷酸酯(CMP-Neu5Ac)为供体底物,催化唾液酸转移至糖蛋白与糖脂末端,是合成唾液酸化寡糖途径中所必需的酶类。微生物来源的唾液酸转移酶具有较广泛的底物特异性,且容易在常见的原核生物表达... 唾液酸转移酶属糖基转移酶家族,以唾液酸胞苷单磷酸酯(CMP-Neu5Ac)为供体底物,催化唾液酸转移至糖蛋白与糖脂末端,是合成唾液酸化寡糖途径中所必需的酶类。微生物来源的唾液酸转移酶具有较广泛的底物特异性,且容易在常见的原核生物表达系统中过量表达,对酶学特性的研究及丰富唾液酸寡糖种类具有重要意义。本文综述了唾液酸转移酶的分类与微生物来源、晶体结构、催化反应机理、酶学性质、异源表达以及在唾液酸寡糖合成中的应用,并对唾液酸转移酶的未来发展方向进行了展望,以扩展这些酶在糖化学和糖生物学中的应用。 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 唾液酸 晶体结构 促反应机理 应用
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唾液酸转移酶对肿瘤中唾液酸化结构的影响 被引量:5
10
作者 钱进 章雄文 丁健 《生命科学》 CSCD 2006年第3期227-232,共6页
随着侵袭能力的增强,肿瘤细胞表面经常会出现唾液酸化糖链结构的增加。现在已经证实许多特殊的唾液酸化结构,如TF类抗原、sLew类抗原、α2-6唾液酸化的乳糖胺结构、PSA结构、神经节苷脂结构都参与细胞间的相互作用。本文综述了与肿瘤相... 随着侵袭能力的增强,肿瘤细胞表面经常会出现唾液酸化糖链结构的增加。现在已经证实许多特殊的唾液酸化结构,如TF类抗原、sLew类抗原、α2-6唾液酸化的乳糖胺结构、PSA结构、神经节苷脂结构都参与细胞间的相互作用。本文综述了与肿瘤相关的特殊的唾液酸化结构的改变与相应的唾液酸转移酶在其中发挥的作用。 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 唾液酸化的路易斯抗原 α2-8多聚唾液酸 神经节苷脂
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人胎肝唾液酸转移酶基因的克隆及测序 被引量:1
11
作者 尚杰 邱若仑 +2 位作者 金城 杨寿钧 张树政 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期277-280,共4页
根据已克隆的唾液酸转移酶的保守区的序列,以人胎肝mRNA为模板扩增出150bp的片段并测序。其中一个片段(s38)与已克隆的唾液酸转移酶的活性中心有57%~97%的同源性。根据s38的序列合成寡核苷酸并标记后用作探针... 根据已克隆的唾液酸转移酶的保守区的序列,以人胎肝mRNA为模板扩增出150bp的片段并测序。其中一个片段(s38)与已克隆的唾液酸转移酶的活性中心有57%~97%的同源性。根据s38的序列合成寡核苷酸并标记后用作探针筛选人胎肝cDNA文库。从文库中分离了一个编码α2,3唾液酸转移酶的cDNA。该cDNA序列含一个编码340个氨基酸的开放读框,推导的氨基酸序列与人颌下腺Galβ1,3GalNAcα2,3唾液酸转移酶相同,与猪颌下腺α2,3唾液酸转移酶有832%的同源性。表明从人胎肝cDNA文库中分离的cDNA所编码的蛋白为Galβ1,3GalNAcα2。 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 人胎肝 CDNA 克隆 测序
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丙型肝炎病毒感染人肝细胞系对多种唾液酸转移酶和半乳糖基转移酶表达的影响 被引量:1
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作者 刘晓宇 章晓联 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第10期5-10,共6页
目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染人肝癌细胞系Huh7.5.1细胞后与肿瘤相关的唾液酸转移酶家族和半乳糖基转移酶家族的35个糖基转移酶的表达变化。方法利用HCV感染的Huh7.5.1肝细胞模型,采用Western blot检测HCV感染后HC... 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染人肝癌细胞系Huh7.5.1细胞后与肿瘤相关的唾液酸转移酶家族和半乳糖基转移酶家族的35个糖基转移酶的表达变化。方法利用HCV感染的Huh7.5.1肝细胞模型,采用Western blot检测HCV感染后HCV非结构蛋白NS3的表达,定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测HCV感染后HCV-RNA的表达及HCV感染对Huh7.5.1细胞中35个糖基转移酶mRNA表达水平的影响。凝集素染色实验测定HCV感染对Huh7.5.1细胞中糖苷表达水平的影响。结果在HCV感染后的Huh7.5.1细胞中,发现4个唾液酸转移酶(ST3Gal III、ST6Gal NAC III、ST8Sia III和ST8Sia IV)和5个半乳糖基转移酶(B3GALT 1、B3GALT 2、B3GALT 3、B3GALT 4和B4GALNT 2)的mRNA水平明显升高11~45倍,其中变化最大的是B3GALT 1,上升45倍,其次是ST8Sia III和ST8Sia IV,分别上升37倍和39倍。进一步采用凝集素染色实验验证,发现结合末端唾液酸糖苷Neu5Acα6Gal的接骨木凝集素(elderberry lectin,EBL)在HCV感染后升高1.97倍,结合末端半乳糖苷Galβ1,3Gal NAc的尾穗苋凝集素(amaranthus caudatus agglutinin,ACA)和结合Galβ1,4Gal NAc的鸡冠刺桐凝集素(erythrina cristagalli agglutinin,ECA)分别升高3倍和4.3倍。结论 HCV感染导致人肝细胞中特定唾液酸转移酶和半乳糖基转移酶及其相应糖苷表达水平呈现明显上升。这些结果对研究HCV感染的治疗靶点和诊断标志物具有一定参考价值。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 唾液酸转移酶 半乳糖基转移 HCV感染 糖苷标志物
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不同细胞唾液酸受体类型及唾液酸转移酶与流感病毒敏感性的研究
13
作者 常吉祥 杨春光 +2 位作者 袁兵 杨子峰 张云辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期979-985,共7页
为研究人/禽流感病毒对细胞的敏感性差异,本研究选取9种常用细胞,分别以105 TCID50的人源甲型流感病毒(IAV)CA04株与禽流感病毒(AIV)Y280株感染不同细胞,检测不同细胞中流感病毒的增殖水平;利用免疫荧光试验检测细胞表面唾液酸(SA)受体... 为研究人/禽流感病毒对细胞的敏感性差异,本研究选取9种常用细胞,分别以105 TCID50的人源甲型流感病毒(IAV)CA04株与禽流感病毒(AIV)Y280株感染不同细胞,检测不同细胞中流感病毒的增殖水平;利用免疫荧光试验检测细胞表面唾液酸(SA)受体类型及其与流感病毒的结合能力;采用流式细胞术定量检测每种细胞表面的SA类型及含量;通过RT-PCR方法检测唾液酸转移酶(ST)(ST3GAL4、ST6GAL1)基因mRNA的转录水平。结果显示,感染CA04株后,MDCK、16HBE、DF-1和A549检测到了病毒滴度,但病毒低度较低为:3.2×10^2 TCID50/0.1 mL^0.95×10^1 TCID50/0.1mL。感染Y280株后,病毒滴度从高到低依次为MDCK、DF-1、Vero、293T、CHO-k1、Hep-2、A549、16HBE和BHK,病毒滴度为6.3×103 TCID50/0.1 mL^9.9×10^1 TCID50/0.1mL;免疫荧光试验结果显示,MDCK、16HBE、DF-1和A549细胞表面存在大量SAα(2-6)Gal结构的糖链,BHK细胞表面该糖链最少,MDCK、DF-1和16HBE细胞表面比其它细胞含有更多的SAα(2-3)Gal结构的糖链,因此MDCK、DF-1和A549细胞对人源流感病毒CA04株的结合能力最强,MDCK、DF-1则对AIV Y280株结合能力较强;流式细胞术定量分析结果显示,9种细胞中MDCK和DF-1细胞表面SAα(2-6)Gal糖链结构含量最高,其结合人流感病毒CA04株的能力较强;而不同细胞表面SAα(2-3)Gal糖链结构含量差异不大,其结合AIV Y280株的能力无显著差异;RT-PCR检测结果显示,MDCK、DF-1细胞的ST相关基因(ST3GAL4、ST6GAL1)mRNA转录水平高于其它细胞,BHK细胞的ST3GAL4、ST6GAL1 mRNA转录水平则最低。因此,MDCK、DF-1细胞与流感病毒的结合能力较强,而BHK细胞与流感病毒的结合能力较低。上述结果表明,SA含量、ST转录水平较高的细胞,其结合流感病毒量也较多,对流感病毒的敏感性也高;反之,则对流感病毒敏感性较低。以上结果表明,细胞表面SA含量、ST基因转录水平与结合的流感病毒量均呈正相关。本研究为进一步探究SA及ST在流感病毒感染中的作用机制奠定了基础,同时为研究人/禽流感病毒中宿主细胞选择提供了参考依据。 展开更多
关键词 流感病毒 唾液酸 唾液酸转移酶 细胞系
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乙肝病毒MHBs^t/HBx蛋白对Galβ1,3GalNAcα2,3-唾液酸转移酶的反式激活作用
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作者 丁卉平 王俊琦 金城 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期551-555,共5页
PCR方法扩增乙肝病毒MHBst、HBx基因片段 ,构建真核表达载体pcDNA3 1 MHBst 和pcDNA3 1 HBx。PCR方法从肝细胞基因组中扩增出Galβ1,3GalNAcα2 ,3 唾液酸转移酶 (ST3GalI)的启动子Psial,用Psial取代pEGFP N1的启动子pCMV构建pEGFP N1 P... PCR方法扩增乙肝病毒MHBst、HBx基因片段 ,构建真核表达载体pcDNA3 1 MHBst 和pcDNA3 1 HBx。PCR方法从肝细胞基因组中扩增出Galβ1,3GalNAcα2 ,3 唾液酸转移酶 (ST3GalI)的启动子Psial,用Psial取代pEGFP N1的启动子pCMV构建pEGFP N1 Psial。利用磷酸钙 DNA共沉淀的方法 ,将pcDNA3 1 MHBst、pcDNA3 1 HBx分别与pEGFP N1 Psial瞬时共转染至正常肝细胞QGY 770 1。流式细胞仪分析细胞平均荧光密度值发现 ,MHBst、HBx分别将ST3GalI启动子的活性上调了 35 2 %和 43 8%。研究了乙肝病毒MHBst、HBx对ST3GalI的转录调控作用 。 展开更多
关键词 乙肝病毒 MHBs^t/HBx蛋白 Galβ1 α2 3-唾液酸转移酶 反式激活作用 肝癌发生
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铁皮石斛类唾液酸转移酶基因的分子鉴定 被引量:2
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作者 张岗 王昌利 +2 位作者 李依民 沈霞 刘清 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期229-234,共6页
利用RT-PCR和RACE技术,从珍稀濒危药用植物铁皮石斛(Dendrobium officinale)中分离到一个类唾液酸转移酶(sialyltransferase-like proteins,STLP)基因,命名为DoSTLP1(GenBank注册号KC178574)。序列分析结果表明,DoSTLP1基因全长cDNA为1 ... 利用RT-PCR和RACE技术,从珍稀濒危药用植物铁皮石斛(Dendrobium officinale)中分离到一个类唾液酸转移酶(sialyltransferase-like proteins,STLP)基因,命名为DoSTLP1(GenBank注册号KC178574)。序列分析结果表明,DoSTLP1基因全长cDNA为1 340bp,编码1条由367个氨基酸组成的肽链,分子量41.66kD,等电点8.64;DoSTLP1蛋白具有唾液酸转移酶和糖基转移酶29家族的保守结构域(分别为1~357,87~346位氨基酸)、信号肽(1~27)和跨膜结构域(3~25,285~311)。多序列比对和系统进化结果显示,DoSTLP1与多种植物的STLPs基因有较高的相似性(44.7%~53.7%),而且与水稻、玉米等单子叶植物STLPs基因的亲缘关系较近。实时定量PCR分析显示,DoSTLP1基因在铁皮石斛根、茎、叶器官中为组成型表达,其转录本在石斛根中的相对表达量较高,为叶中的2.857倍,茎和叶中的表达量无显著差异。该研究为进一步解析该基因在铁皮石斛生长发育过程中的生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 铁皮石斛 唾液酸转移酶 基因表达 分子鉴定
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卵巢癌唾液酸转移酶mRNA表达的变化
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作者 Lee W.-L Juang C.-M. 朱亮 《世界核心医学期刊文摘(妇产科学分册)》 2006年第5期34-35,共2页
Aberrant glycosylation occurs in essentially all types of experimental and human cancers, and many glycosyl epitopes constitute tumor-associated antigens (for example, CA125). Many recent studies have indicated that s... Aberrant glycosylation occurs in essentially all types of experimental and human cancers, and many glycosyl epitopes constitute tumor-associated antigens (for example, CA125). Many recent studies have indicated that some, if not all, aberrant glycosylation is a result of altered sialyltransferase (ST) expression; however, there is little known of the role of the altered mRNA expression of ST in ovarian cancers. Methods. Alterations in ST mRNA expression in postmenopausal ovarian tissues, including those of normal controls (n = 24) and malignant serous ovarian cancers (n = 24), were examined by means of real-time quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RTQ-PCR). Maackia Amurensis Agglutin in type 2 (MAA) specific for α 2,3- linked NeuNAc was used for immunohistochemical staining. Results. Among these five STs, the mRNA expressions of three STs, including ST3Gal III, ST3Gal IV, and ST3Gal VI, were significantly decreased in patients with ovarian cancers, compared to the normal controls (P < 0.001). By contrast, the mRNA expressions of ST3Gal I and ST6Gal I were increased in ovarian cancer tissues, compared to those of the normal controls (P < 0.001). The ovarian epithelial carcinoma part showed strong positivity for MAA, whereas MAA staining in the stromal part was negative. Both the epithelial part and the stromal part of postmenopausal ovarian tissue showed negativity for MAA staining. However, clinico-pathological parameters, including stage, differentiation, amount of ascites, and serum levels of CA125, did not show any correlation to mRNA expression of any given-type ST. Conclusions. Our results suggest that altered mRNA expressions of α 2,3- sialyltransferase ST3Gal I, ST3Gal III, ST3Gal IV, ST3Gal VI, and α 2,6- sialyltransferase ST6Gal I are of importance in malignant ovarian cancers. An increased expression of ST3Gal I may contribute directly to increased α 2,3- linked sialylation in ovarian serous carcinoma. 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 卵巢组织 肿瘤相关抗原 唾液酸化作用 病理学参数 免疫组化染色 间质部 抗原决定簇
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唾液酸转移酶与肿瘤进展和转移 被引量:4
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作者 夏磊(综述) 王元书(审校) 崔淑香(审校) 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2009年第2期86-88,共3页
各种唾液酸转移酶应用共同的供体单磷酸胞苷活化的唾液酸(CMP—Neu5Ac),对糖链末端进行唾液酸化修饰。研究表明,各种唾液酸转移酶在正常细胞和肿瘤细胞中的表达有显著差异,它们通过改变细胞膜末端糖链唾液酸化的结构或者数量,影... 各种唾液酸转移酶应用共同的供体单磷酸胞苷活化的唾液酸(CMP—Neu5Ac),对糖链末端进行唾液酸化修饰。研究表明,各种唾液酸转移酶在正常细胞和肿瘤细胞中的表达有显著差异,它们通过改变细胞膜末端糖链唾液酸化的结构或者数量,影响肿瘤进展和转移。研究肿瘤细胞中各种唾液酸转移酶的表达,对肿瘤防治有重要意义。 展开更多
关键词 唾液酸转移酶 唾液酸 肿瘤转移 肿瘤侵润
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α-2,6唾液酸转移酶(ST6Gal1)的cDNA克隆、原核表达及生物活性研究 被引量:1
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作者 侯小强 高玉伟 +4 位作者 孙培录 冯娜 夏咸柱 杨松涛 段德明 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期17-22,共6页
从HepG2细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增α-2,6唾液酸转移酶基因,构建于pMD-18T克隆载体中,经序列测定后与GenBank中报道的已知序列比对完全一致,再将已知目的序列插入原核表达载体pET-28a(+)中。将构建正确的原核表达载体转化表达受体菌B... 从HepG2细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增α-2,6唾液酸转移酶基因,构建于pMD-18T克隆载体中,经序列测定后与GenBank中报道的已知序列比对完全一致,再将已知目的序列插入原核表达载体pET-28a(+)中。将构建正确的原核表达载体转化表达受体菌BL21(DE3)中,IPTG诱导其进行表达并鉴定目的蛋白,对鉴定正确的目的蛋白复性后经N i2+亲和层析柱纯化获得高纯度的α-2,6唾液酸转移酶蛋白。然后用霍乱弧菌神经氨酸酶处理健康鸡红细胞,清除鸡红细胞表面所有类型的唾液酸寡糖链;再用表达的α-2,6唾液酸转移酶以CMP唾-液酸作为底物在霍乱弧菌神经氨酸酶处理的鸡红细胞表面标记上SAα2,6 Gal受体。将标记有SAα2,6Gal受体的鸡红细胞应用微量血凝试验和流式细胞仪进行检测,以验证所表达蛋白的生物活性。结果表明,原核表达的α-2,6唾液酸转移酶具有较好的生物活性。 展开更多
关键词 α-2 6唾液酸转移酶 原核表达 生物特性
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慢性阻塞性肺病患者支气管黏膜唾液酸转移酶mRNA表达水平的差异性 被引量:1
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作者 黄勇 钱桂生 姜鹏 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2007年第1期42-44,共3页
目的比较慢性阻塞性肺病(COPD)和肺功能正常的肺癌手术患者相对正常的亚段以上支气管黏膜常见唾液酸转移酶mRNA表达水平的差异性。方法肺癌患者新鲜手术切除标本取远离肿瘤部位的亚段以上支气管黏膜,用RT-PCR方法检测4种黏蛋白常见唾液... 目的比较慢性阻塞性肺病(COPD)和肺功能正常的肺癌手术患者相对正常的亚段以上支气管黏膜常见唾液酸转移酶mRNA表达水平的差异性。方法肺癌患者新鲜手术切除标本取远离肿瘤部位的亚段以上支气管黏膜,用RT-PCR方法检测4种黏蛋白常见唾液酸转移酶mRNA表达水平的高低。结果 COPD和肺功能正常患者支气管黏膜的唾液酸转移酶3 Gal Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ和唾液酸转移酶6Gal Ⅰ的mRNA表达水平均无明显差异。结论 COPD患者对细菌的易感染性及在急性加重期气道黏蛋白末端唾液酸结构的增多不是疾病特异性的,而更多是与感染直接相关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺病 支气管黏膜 唾液酸转移酶 MRNA
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α-2,6唾液酸转移酶在BHK细胞中的表达
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作者 侯小强 高玉伟 +2 位作者 孙培录 夏咸柱 杨松涛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期22-24,共3页
目的在BHK细胞中表达α-2,6唾液酸转移酶(ST6Gal1),为其相关研究奠定基础。方法提取人肝癌HepG2细胞总RNA,经RT-PCR扩增α-2,6唾液酸转移酶的cDNA,克隆入载体pMD18-T中,测序后将目的基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒... 目的在BHK细胞中表达α-2,6唾液酸转移酶(ST6Gal1),为其相关研究奠定基础。方法提取人肝癌HepG2细胞总RNA,经RT-PCR扩增α-2,6唾液酸转移酶的cDNA,克隆入载体pMD18-T中,测序后将目的基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-ST6Gal1,并转染BHK细胞,免疫荧光法检测α-2,6唾液酸转移酶的表达。结果克隆的α-2,6唾液酸转移酶基因与GenBank中报道的已知序列完全一致,重组真核表达质粒转染的BHK细胞表面SAα2,6Gal含量增加。结论α-2,6唾液酸转移酶在BHK细胞中获得了有效表达,为流感病毒受体的研究提供了技术支持。 展开更多
关键词 α-2 6唾液酸转移酶 BHK细胞 克隆 表达
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