唾液酸酶活性测定诊断细菌性阴道病的评价

通过细菌性阴道病的Amsel法、革兰染色法、唾液酸酶活性法的分析 。

唾液酸酶活性测定快速诊断细菌性阴道病

目的:评估唾液酸酶活性测定在细菌性阴道病(BV)快速诊断中的应用价值。方法:选取360例妇科门诊病人,采集阴道分泌物,分别行唾液酸酶活性检测和Amsel标准诊断,所得结果进行统计分析。结果:以Amsel为金标准,唾液酸酶活性检测法诊断BV的敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值分别为94.8%、90.3%、87.9%和95.9%,二法比较,符合率为92.2%,Kappa=0.842(P<0.05),结果高度一致,且不受阴道毛滴虫、阴道念珠菌、淋球菌和支原体等感染的影响。结论:唾液酸酶活性检测法诊断BV具有简便、快速、准确等优点。

阴道唾液酸酶与胎膜早破和早产的关系

胎膜早破和早产是导致新生儿疾病和死亡的主要原因。近年的研究认为孕期感染与早产密切相关。细菌性阴道病（bacterial vaginosis，BV）是妇产科常见的感染性疾病，发病率为15％～45％,患BV孕妇胎膜早破及早产的机会是健康者的2倍。诊断BV的标准中，pH值和胺试验受到各种因素的影响，如阴道出血、滴虫性阴道炎，阴道液性状的观察又不能排除主观因素影响。阴道分泌物中唾液酸酶活性的测定是目前诊断BV一个敏感指标，可以克服上述缺点。

唾液酸酶法与多胺法对细菌性阴道病的检测比较

目的探讨唾液酸酶法及多胺法在诊断细菌性阴道病的价值。方法以革兰氏染色法为标准,评价唾液酸酶法及多胺法的灵敏度和特异性。结果唾液酸酶法灵敏度和特异性分别为85.6%与90.8%,多胺法分别为94.6%与87.5%,染色法的阳性率低于多胺法的阳性率。结论提示:唾液酸酶法检测是诊断BV(Bactcria Vaginasis,BV)的客观、简便、有效的方法。

宫内乙醇暴露对新生大鼠脑唾液酸含量的影响

研究了宫内乙醇暴露对新生大鼠脑唾液酸含量及唾液酸酶活性的影响。 Wistar母鼠在孕期的第 7、8、1 3和 1 4天暴露于乙醇 (灌胃给予 ) ,对出生后 3天 (PD3 )、5天 (PD5 )和 1 0天 (PD1 0 )的新生大鼠测定其脑唾液酸含量和唾液酸酶活性。结果表明 ,仔鼠在PD3、PD5的脑唾液酸含量显著增加 。

质膜型唾液酸酶NEU3活性对骨肉瘤MG-63细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨质膜型唾液酸酶(NEU3)活性对骨肉瘤MG-63细胞在体外增殖及凋亡的调控作用。方法体外培养MG-63细胞,以抗NEU3抗体免疫荧光染色,显示NEU3在MG-63细胞中的定位;以0 nmol/L唾液酸酶活性抑制剂(DANA)处理组或0 μg/ml抗NEU3抗体处理组为空白对照组,以10、20、50 nmol/L DANA或0.5、1.0、2.0 μg/ml抗NEU3抗体处理24 h或48 h后,采用CCK-8比色法、流式细胞术分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率,Western blotting法检测癌基因相关蛋白Ras蛋白和Bcl-2蛋白的表达水平。结果免疫荧光染色结果显示,NEU3表达定位于MG-63细胞质中。作用48 h后,0、10、20、50 nmol/L DANA处理组细胞增殖抑制率分别为0、15.10%±3.23%、41.46%±2.31%、64.68%±4.12%,差异具有统计学意义(F=99.90,P<0.001),不同DANA浓度组间两两比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05);0、0.5、1.0、2.0 μg/ml抗NEU3抗体封闭处理48 h后,MG-63细胞增殖抑制率分别为0、9.34%±1.53%、19.66%±4.18%、42.50%±5.68%,差异具有统计学意义(F=25.67,P<0.001),不同抗体浓度组间两两比较,除0.5 μg/ml与1.0 μg/ml组比较差异无统计学意义外(P>0.05),其余组间差异均具有统计学意义(均P<0.05)。采用不同浓度DANA(0、10、20、50 nmol/L)处理MG-63细胞24 h后,凋亡率分别为4.05%±0.07%、4.15%±0.23%、12.85%±1.48%、8.29%±0.86%,组间差异具有统计学意义(F=23.21,P<0.001),不同DANA浓度组间两两比较,除0 nmol/L与10 nmol/L、20 nmol/L与50 nmol/L处理组间差异无统计学意义外(P>0.05),其余组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05);以不同浓度NEU3抗体(0、0.5、1.0、2.0 μg/ml)处理MG-63细胞24 h后,细胞凋亡率分别为4.05%±0.07%、20.13%±2.97%、20.29%±2.82%、20.58%±0.70%,组间差异有统计学意义(F=15.36,P=0.001),不同抗体浓度组间两两比较,0 μg/ml与各处理组间差异有统计学意义(均P<0.05),而各处理组间差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting结果显示随DANA和NEU3抗体浓度升高,Bcl-2蛋白和Ras蛋白的表达逐渐降低。结论抑制NEU3酶活性可抑制骨肉瘤细胞MG-63的存活,促进该细胞的凋亡,其作用机制可能是通过下调癌基因相关蛋白Ras和Bcl-2的表达实现的,提示NEU3可能是治疗骨肉瘤的潜在药物靶点。

2-去氧-2,3-去氢-N-乙酰基神经氨酸8-硫酸酯、9-硫酸酯衍生物的合成及其生物活性

对 2 去氧 2 ,3 去氢 N 乙酰基神经氨酸 (Neu5Ac2en)的 8 羟基和 9 羟基进行选择性硫酸酯化 ,以比较不同取代位置的硫酸酯基对唾液酸酶抑制活性的影响。采用三苯甲基氯保护 9 羟基后 ,对 8 羟基进行选择性硫酸酯化 ;在 4,7,8 三羟基乙酰化后 ,酸性条件下水解 9 三苯甲基醚 ,对9 羟基进行选择性硫酸酯化。得到 7个结构全新的Neu5Ac2en 8 硫酸酯衍生物、9 硫酸酯衍生物。初步生物活性试验表明 ,这些化合物均具有一定的唾液酸酶抑制活性 ,9 硫酸酯衍生物的酶抑制活性高于 8 硫酸酯衍生物。

细菌性阴道病与宫内节育器的关系

目的:探讨宫内节育器(IUD)与细菌性阴道病(BV)的关系,为安全使用IUD提供依据。方法:采用唾液酸酶活性法对观察组328例置IUD妇女进行BV检测,以同期体检的74例未置IUD妇女作为对照。从置IUD的类型、置IUD后是否出血、有无合并其他病原体感染等对两组妇女进行对比。结果:置IUD妇女BV阳性率为29.6%,对照组为13.5%,两组比较,差异有显著性(P<0.01)。BV与IUD的类型无关,而与置IUD后出血有关。置IUD妇女中BV阳性者合并其他病原体感染的几率明显高于BV阴性组。结论:放置IUD与发生BV有关,置IUD后出血会增加BV的危险性;置IUD妇女中BV阳性者合并其他病原体感染的几率升高。

结直肠癌中Neu3基因的表达及产物活性的检测

目的探讨神经苷节脂特异性的唾液酸酶(Neu3)基因与人类结直肠癌的关系。方法用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法检测8例结直肠癌组织和正常黏膜之间Neu3mRNA的表达差异;用硫巴比妥酸方法(TBA)检测32例结直肠癌组织和正常黏膜中唾液酸酶活性。结果在转录水平,8对结直肠癌组织和正常组织中,癌组织中Neu3mRNA的表达明显高于正常组织中Neu3mRNA的表达水平;在蛋白质翻译水平,32例结直肠癌组织中的唾液酸酶活性平均为10.60U/mg,32例正常黏膜组织中的唾液酸酶活性平均为5.51U/mg(P<0.05)。结论Neu3基因的编码产物神经苷节脂特异性的唾液酸酶与结直肠癌细胞的分化和生长密切相关。Neu3基因可能与人类结直肠癌有关。

雌激素化小鼠感染普雷沃菌引起细菌性阴道病的模型研究

目的：利用雌激素化小鼠构建普雷沃菌（ Prevotella）感染引起细菌性阴道病（ bacterial vaginosis, BV）的动物模型。方法17β-戊酸雌二醇芝麻油溶液腹腔注射小鼠,然后用对数期普雷沃菌稀释液定量接种小鼠阴道,于不同时间点取小鼠阴道洗液分离培养普雷沃菌,并测定洗液中唾液酸酶活性；接种后2 d、7 d和21 d分别扑杀10只小鼠,取子宫角、膀胱和肾脏,匀浆后分离培养普雷沃菌。结果普雷沃菌可在雌激素化小鼠阴道中感染14 d以上,21 d时可观察到分离菌数的明显下降；感染小鼠阴道分泌物中唾液酸酶活性明显增高,并可查见线索细胞；高剂量感染时细菌可扩散到小鼠子宫角。结论雌激素化小鼠可作为BV 的一种实验动物模型。