唾液链球菌对小鼠口腔黏膜慢性炎症的治疗作用

目的:利用口腔黏膜慢性炎症模型,对唾液链球菌(Streptococcus salivarius,Ss)的抗炎作用进行初步研究。方法:(1)健康成年SPF级C57BL/6小鼠75只,随机分为5组,空白对照(CON)组、慢性炎症(CI)组、唾液链球菌治疗(CI+SS)组、糖皮质激素治疗(CI+GC)组和单独使用唾液链球菌(CON+SS)组各15只。4周后收集病损部颊黏膜,经苏木素-伊红(HE)染色后观察其病理变化及炎性细胞浸润情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测病损局部白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)和叉头框蛋白3(Foxp3)的mRNA表达改变,采用免疫荧光染色法检测病损局部IL-6的蛋白表达情况。(2)健康成年SPF级C57BL/6小鼠45只,随机分为3组,CON组、CI组及CI+SS组各15只。4周后收集外周血,通过酶联免疫吸附法检测血清中IL-17A的表达水平,采用流式细胞术检测外周血Th17/Treg细胞比例。结果:(1)与CI组相比,CI+SS组病损局部炎性细胞浸润减少,IL-1β、IL-6和TNF-α的表达降低,IL-6阳性细胞减少(P<0.001);(2)CI+SS组病损组织中IL-10、IL-17和Foxp3的表达降低(P<0.01),血清IL-17A的表达降低(P<0.001),外周血Th17/Treg细胞比例下降(P<0.001)。结论:Ss局部使用具有改善口腔黏膜慢性炎症的作用,其机制可能是通过改善Th17/Treg分化失衡从而维持局部免疫平衡。

唾液链球菌在口腔感染性疾病中的应用进展

口腔内复杂多样的微生物相互作用、相互影响,共同维持微生态平衡。当这种动态平衡被打破,致病菌不断增殖成为优势菌,便导致龋病等口腔感染性疾病的发生。唾液链球菌作为常见的益生菌,在治疗和预防口腔相关疾病中有着广泛的应用前景。本文就唾液链球菌在维持口腔健康中的相关研究进行综述,主要介绍其在防治龋病、口腔异味、咽炎扁桃体炎、口腔念珠病和口腔扁平苔藓(OLP)等常见口腔疾病中的应用,并对其机制进行相关阐述,以期为后续唾液链球菌防治口腔疾病的进一步深入研究提供参考。

唾液链球菌可能在过敏性鼻炎发生、发展中起关键作用

过敏性鼻炎是困扰众多民众的慢性疾病,越来越多研究者开始关注鼻腔菌群与过敏性鼻炎的关系。中国医学专家的最新研究证实,唾液链球菌通过与过敏性鼻炎患者鼻腔黏膜相关蛋白结合,促进其粘附定植和富集,并加重过敏性鼻炎的炎症反应,在对过敏性鼻炎的发生、发展中起到关键作用。因此,筛选鼻腔菌群标志物并确定其功能,将为临床鉴别、诊断以及更精准的疗效评估,提供靶点和实验室依据。

响应面法优化唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基

采用响应面方法对唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基进行了优化。以MRS培养基作为基础培养基,采用Plackett-Burman(PB)设计法,对12种乳酸菌生长促进因子以及培养基的初始pH等13个因素对唾液链球菌嗜热亚种STX2生长的影响进行评价。筛选出CaCl2与豆粕水解液为STX2的生长强化因子,且培养基的初始pH值也是影响该菌体生长的关键因子,而其他物质对STX2增菌量的影响不显著。然后用旋转中心组合设计及响应面分析法确定强化因子的最佳浓度以及最佳的培养基初始pH值。在优化培养基中,STX2的菌体浓度达到6·8×108cfu/mL,比优化前的1·5×108cfu/mL提高了4·5倍。

唾液链球菌嗜热亚种发酵乳风味成分分析

本实验使用同时蒸馏萃取-气谱-质谱(SDE-GC-MS)技术对5株唾液链球菌嗜热亚种S.t-9、S.t-17YA、S.t-1703CA、S.t-1703D和S.t-03发酵乳中风味物质进行了定性及定量分析,分别鉴定出24种、20种、13种、20种、21种风味物质,共涉及6大类:酸类化合物、酯类化合物、醇类化合物、羰基化合物、芳环和杂环化合物,35种物质。另外,5株菌代谢主要风味物质2,3-丁二酮的能力大小为:S.t-1703D>S.t-1703CA>S.t-17YA>S.t-03>S.t-9,除S.t-9菌代谢2,3-丁二酮量较低外,其它4种菌代谢丁二酮的能力差异不大。

唾液链球菌嗜热亚种Y-2细胞转化法制备γ-氨基丁酸

研究反应pH值、反应温度、重金属盐、表面活性剂、底物浓度、菌体质量浓度和磷酸吡哆醛添加量对Streptococcus salivarius subsp.thermophilus Y-2细胞转化法生产γ-氨基丁酸的影响。获得反应体系的最佳组成为:湿菌体25g/L、BaCl2 40mmol/L、Triton X-100体积分数0.02%、L-谷氨酸单钠盐(L-monosodium glutamate,MSG)47.5g/L和L-谷氨酸(L-glutamic acid,L-Glu)90.0g/L。该体系在40℃、pH 4.5和搅拌速度100r/min的最适转化条件下进行反应72h,转化液GABA产量达到了(87.16±4.33)g/L,细胞平均生产力为(48.42±2.41)mg/(h.g),摩尔转化率为(97.60±4.71)%。

唾液链球菌嗜热亚种荚膜多糖生理功能特性研究

通过对唾液链球菌嗜热亚种的研究发现 ,细胞固有发酵活性、抵抗外界不良环境能力与荚膜无关。破坏唾液链球菌嗜热亚种LCX2 0 0 1的荚膜 ,会使发酵速度加快 ,但同时对外界不良环境的抵抗力下降。这些研究结果表明 ,有无荚膜 ,或荚膜大小对同一亚种所表现出来的不同生理特性没有决定作用 ;破坏荚膜 ,会影响细胞体与外界物质交换能力 ,对细胞体许多生理功能有影响 ;荚膜起到阻止外界物质的进入细胞和细胞内产生的乳酸向外界释放的作用。

唾液链球菌嗜热亚种Y-2产谷氨酸脱羧酶的影响因子确立

从产酶和细胞生长较好的MRS培养基出发,对Streptococcus salivarius ssp.thermophilus Y-2产谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)的影响因子进行探讨,结果当培养基组成和培养条件为蛋白胨15g/L、牛肉膏12.5g/L、蔗糖12.5g/L、柠檬酸二铵2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、K2HPO42.0g/L、CaCl2 2.0g/L、Tween 80 1.0ml、pH7.0、接种量2%(V/V)、发酵温度37℃、发酵时间12h时,较有利于菌株Y-2产GAD。Plackett-Burman设计法研究表明培养基初始pH值和K2HPO4为影响菌株Y-2产GAD的主要影响因素。经对菌株Y-2产GAD影响因素的筛选,新获得的培养基在组成上与MRS培养基相比已发生显著变化,GAD活力提高了1.3倍。

唾液链球菌嗜热亚种LCX2001胞外多糖分批发酵动力学

对唾液链球菌嗜热亚种LCX2 0 0 1生物合成胞外多糖 (EPS)的动力学进行了研究 ,基于Logistic equation方程和Luedeking piret方程 ,得到了描述发酵过程的动力学模型和模型参数。该模型反映了细胞生长、乳酸生成、EPS生物合成和基质消耗之间的关系 ,模型的拟合结果与实验值吻合较好 ,误差小于 1 0 %。

唾液链球菌在口臭治疗中的研究进展

口臭主要是指由口腔内厌氧菌发酵产生的挥发性硫化物引起的口腔异味。传统的机械治疗方法和化学治疗方法虽然可以短期内改善口臭状况,但长期疗效不尽如人意。唾液链球菌属于口腔正常菌群,与健康者相比,口臭者口腔中唾液链球菌数量较少。研究表明,唾液链球菌可以产生某种细菌素,对口臭相关细菌有抑制作用。本文综述了唾液链球菌在口臭预防和治疗中的研究进展。

固定化唾液链球菌生产γ-氨基丁酸的研究

以唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcus salivariussubsp.thermophilusY-2)为供试菌株,考察了卡拉胶、明胶和海藻酸钙等材料将此菌株固定化的效果,并通过比较固定化细胞的谷氨酸脱羧酶(glutamatedecarboxylase,GAD)活性及γ-氨基丁酸的产量和载体机械强度,确定了海藻酸钙作为固定化细胞的适宜载体。优化后得到的最适固定化条件(W/V)为:海藻酸钠2%,CaCl214%,菌体25%,凝胶平均颗粒直径1.64 mm,在此条件下测得固定化细胞的GAD活性为游离细胞的1.2倍。细胞多批次应用稳定性试验证明:固定化细胞较游离细胞有着更稳定的GAD活性,反复使用60 h后,固定化细胞GAD活性仍能保持其初始活性的90%以上,γ-氨基丁酸的积累量达到7.97 g/L。

酒精性肝硬化并发唾液链球菌性腹膜炎

自发性细菌性腹膜炎是失代偿期肝硬化患者常见的严重并发症之一,其腹水细菌培养阳性率较低,而能给出阳性培养结果的致病菌多为需氧革兰氏阴性杆菌,革兰氏阳性球菌和厌氧菌等相对少见。我们报告了较为少见的唾液链球菌引起的自发性细菌性腹膜炎1例,并对提高其检出率和临床诊断率进行了分析。

唾液链球菌K12防治口腔及相关疾病的研究进展

自唾液链球菌K12(Streptococcus salivarius K12,Ss K12)于1989年从一名健康儿童的唾液中分离出来后,其针对某些细菌感染性疾病的预防和治疗潜能日益受到研究者们的重视。本文就Ss K12在预防和治疗口臭、咽炎扁桃体炎、中耳炎、念珠病、B族链球菌感染等疾病的相关研究进行综述,以期为Ss K12临床应用及进一步深入研究提供有益指导。

固定化唾液链球菌的酶学性质研究

以海藻酸钙为载体包埋唾液链球菌嗜热亚种Y-2的菌体细胞,对固定化细胞催化合成γ-氨基丁酸进行了较详细的研究。研究结果表明:固定化细胞谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)反应的最适温度为40℃,同时具有良好的温度稳定性。固定化细胞酶活最适反应pH为3.8。细胞经固定化后pH稳定性明显增加,GAD酶活回收率普遍高于游离细胞。0.1%Triton X-100具有较强的酶活促进作用。固定化细胞的GAD在酶促反应中并不存在底物抑制现象。在上述最优条件下进行菌体生产力测试,固定化细胞转化L-谷氨酸单钠盐11 h后,转化液γ-氨基丁酸的浓度达到了2.79 g/L。

唾液链球菌在室内空气污染中的监测及应用

室内空气污染与人类生理、生活和生产活动有着密切的关系。众所周知细菌总数是评价室内空气微生物污染常用的指标之一。但它不能直接反映与人群生理、生活活动有关的污染。目前有学者提出以唾液链球菌(SS)作为人群生理、生活活动污染空气的卫生指示菌。本文在其基础上对不同室内(如学习、吸烟)SS含量变化及其与其他污染指标的关系进行了研究。

唾液链球菌尿素酶结构亚基的克隆和表达

目的:克隆和表达唾液链球菌尿素酶结构亚基UreA、UreB、UreC。方法:用已构建的含唾液链球菌57.I尿素酶基因簇的重组质粒为模板,分别克隆、双酶切、连接、转化,构建含结构基因的表达质粒,IPTG诱导表达,亲和层析纯化蛋白。结果:成功构建表达质粒,经诱导、亲和层析,获得高纯度、高浓度的UreA、UreB、UreC 3种目的蛋白。结论:成功诱导纯化唾液链球菌尿素酶的结构亚基,为今后各亚基的酶活分析和抗体制备等研究奠定基础。

唾液链球菌BD3900作为口腔益生菌的特性

从口腔中分离得到一株唾液链球菌BD3900,在体外试验中发现,该菌具有极强疏水作用(95.8%)和静电作用(表面电荷量≥88.6%)有利于黏附于口腔中,能耐受100μg/mL的溶菌酶,存活能力较强;具有较高的自聚性(15%~20%)及与变形链球菌(Streptococcus.mutans)的共聚作用,在蔗糖存在时,与变形链球菌共聚率高达64.3%;与变形链球菌共培养时,可以抑制变形链球菌生物膜的形成,抑制率为67.1%。说明BD3900是一株具有预防龋齿潜力的口腔益生菌。

常用表面活性剂对唾液链球菌与食窦魏斯氏口腔益生菌的影响

以PEG-40氢化蓖麻油(RH-40)、PEG-60氢化蓖麻油(RH-60)、椰油酰胺丙基甜菜碱(CAB-35)、月桂酰肌氨酸钠(LS-97)、椰油酰甘氨酸钠(AK-301)、十二烷基硫酸钠(SDS) 6种口腔护理产品常用表面活性剂为研究对象,以食窦魏斯氏菌和唾液链球菌为实验益生菌菌株,探究不同质量浓度表面活性剂对口腔益生菌生长的影响。改良牛津杯法结果表明,益生菌对质量浓度10 g/L的6种表面活性剂均敏感;微量肉汤稀释法测定结果显示,不同质量浓度的不同表面活性剂对口腔益生菌的影响不同。质量浓度≤0.078 g/L的RH-60,质量浓度≤0.156 g/L的RH-40对益生菌的生长具有促进作用;0.156~0.625 g/L的RH-60,0.02 g/L的CAB-35,质量浓度≤0.039 g/L的LS-97、AK-301对益生菌的生长无显著影响;而质量浓度≥0.313 g/L的SDS、LS-97、AK-301,质量浓度≥1.25 g/L的CAB-35则完全抑制益生菌的生长。质量浓度>0.156 g/L的RH-60、RH-40比相同质量浓度其余表面活性剂对益生菌的抑制作用弱。低质量浓度的AK-301、CAB-35、LS-97,各质量浓度RH-60、RH-40可优先考虑应用于口腔清洁护理产品中。

唾液链球菌57.I尿素酶抗体的制备和鉴定

目的 :利用基因克隆和表达的多肽制备唾液链球菌57.I尿素酶的特异性多克隆抗体。方法 :获得唾液链球菌57.I尿素酶最大的结构亚基ureC的克隆,IPTG诱导表达、纯化并定量,用其免疫新西兰大白兔,获得抗血清和多克隆抗体,采用Western印迹法鉴定其特异性。结果:获得了纯化UreC蛋白,以其作为抗原免疫,制备出多克隆抗体。经Western印迹试验表明,该多克隆抗体可识别UreC目的蛋白条带,其相对分子量约为62 kD,与预测分子量相符。结论:所制备的多克隆抗体可识别UreC蛋白,能够与唾液链球菌57.I尿素酶抗原特异性结合,为深入研究尿素酶的功能及其与龋病的关系提供了有力工具。