啮齿类动物致癌性试验统计学方法的使用现状

啮齿类动物致癌性试验是新药研发中非临床安全性评价的重要组成部分。致癌性试验周期较长、数据量大,其统计学方法选用的合理性、科学性将可能影响试验结果的结论。首先介绍了目前致癌性试验常用的生存分析和肿瘤发生率统计方法;其次,汇总了生存分析和肿瘤发生率统计方法的选用情况;最后,通过比较申报方、美国食品药品监督管理局审评方和美国国家毒理学项目中心在统计学方法选用的差异,分析和讨论了这些差异的来源和影响,并总结了致癌性试验统计分析设计思路。希望通过对以上内容的汇总和分析,能够为新药非临床致癌性试验提供参考。

啮齿类动物致癌性试验的关注要点

啮齿类动物致癌性试验的目的是确定候选药物在动物中是否具有致癌性,以及如果存在致癌性风险,这种风险是否会转化至人类。药物相关的致癌作用可能表现为肿瘤发生率增加、背景肿瘤发生潜伏期缩短或罕见肿瘤的发生。本文重点讨论啮齿类动物致癌性试验中的一些具体而关键的内容,包括试验设计、实施、报告和结果解释分析的考虑要点。本文重点阐述致癌性试验进行的时间、试验设计的关键方面(剂量选择、种属选择、如何处理早期死亡和试验组终止等)、试验报告的一般内容和注意事项、致癌性试验数据的统计分析和结果阐述分析等。使用综合证据权重(WoE)方法解释致癌性试验结果,尤其对啮齿类动物致癌试验发现是否与人体致癌风险相关的评价是至关重要的。

浅谈rasH2-Tg小鼠短期致癌性试验的设计要点

rasH2-Tg小鼠是当前转基因替代模型中应用最广泛的短期致癌性试验模型小鼠,对遗传阳性致癌物和非遗传阳性致癌物均敏感,且自发肿瘤率较低。目前国内外相关指导原则还没有针对该转基因小鼠致癌性试验的详细设计要求,本文通过汇总并分析了2013—2022年在美国获批上市且采用该转基因小鼠进行的51个新药的致癌性试验申报资料,并结合实际工作经验对试验设计要点进行整理论述,为国内新药致癌性试验的开展提供参考。

建立我国自主知识产权的致癌性小鼠模型

致癌性试验是药物非临床安全性评价的重要内容之一。当前国内外普遍采用并认可基于ICH S1B指南建立的药物非临床致癌性试验替代方案。遗传修饰致癌性小鼠模型是替代方案中“卡脖子”的关键技术问题。从1997年ICH S1B指南发布至今,我国制药行业主要依赖进口获得小鼠模型,其价格高昂、进口周期长、条件严苛,且由于模型资源唯一,制药行业承受着成本高昂和供应链不稳的双重压力。本文概述了国内外致癌性试验相关指导原则,介绍了国内外主要的致癌性小鼠模型,包括Tg.rasH2、KI.C57-ras、p53^(+/-)小鼠等的构建、验证与应用历程,并展望了建立我国自主知识产权的致癌性小鼠模型以及标准化生产供应的途径。

非临床毒性试验和致癌性试验动物死亡原因分析方法简介

本文简要介绍了美国国家毒理研究中心动物死亡原因分类、美国毒性病理学会颁布的判定毒性试验死亡原因的建议、英国亨廷顿生命科学公司病理部致癌性试验幼龄SD大鼠的死亡原因分析、美国华盛顿大学比较医学和比较病理学系啮齿类动物试验死亡原因分析推荐方法等内容,目的是为我国药物非临床安全性评价领域毒性病理学家更好地分析动物死亡原因及解释毒性试验和致癌性试验结果提供参考。

医疗器械监管中致癌性试验研究进展

目的:为完善我国医疗器械监管,提高医疗器械致癌性方面的研究水平提供一定参考。方法:通过查阅相关文献,介绍医疗器械的定义分类以及致癌性试验的有关模型,并且对现有医用材料致癌性试验进行论述。结果与结论:医疗器械监管中的致癌性试验是在对试验动物进行浸提液或植入物暴露试验后测定其致癌潜能的试验,根据试验结果初步估计产生不良影响的剂量指标,为建立人体暴露的安全标准提供参考依据。当前我国医疗器械相关的规范性文件有所欠缺,提高国产医疗器械的检测技术和相关标准,实现医疗器械风险性评价有助于完善监管体系,加快相关医疗器械产品进入市场。

人支气管上皮细胞恶性转化系统替代动物长期致癌试验的基础研究

以体外试验方法替代动物体内试验进行新药及各种健康相关产品的安全性评价可以减少动物用量，降低实验成本，提高检测效能。用于确认化学物质致癌性的长期动物致癌试验因需数百只啮齿类动物终身染毒和观察而成为安全性评价实验中成本最高、耗时最长的困难试验，亟需研究寻找有效的体外试验替代方法。80％的人类肿瘤都是起源于上皮细胞的癌症，本研究设想用人支气管上皮细胞恶性转化系统替代长期动物致癌试验来检测化学物质的致癌性。

合成洗涤剂的促癌性研究——小鼠皮肤二阶段致癌试验

以经典的小鼠二阶段皮肤致癌试验,测试了合成洗涤剂烷基苯磺酸钠及脂肪醇环氧缩合物的促癌性能。烷基苯磺酸钠有巴豆油样明显的促癌作用,而脂肪醇环氧缩合物则有抑癌作用。

慢性毒性联合致癌性试验中SD大鼠血液部分生理生化参考值的研究

目的研究两年慢性毒性联合致癌性试验中SD大鼠的体质量、死亡率、血常规值和血生化值的变化。方法SPF级雄性SD大鼠135只,雌性138只,4～17周龄间每周测量体质量1次,18～108周龄间每4周测定动物体质量1次并计算动物的死亡率;分别于8周龄、30周龄、56周龄、82周龄和108周采血,检测血常规和血生化指标。结果雌性大鼠在6～108周的体质量与雄性大鼠比较具有显著性差异(P<0.05);82～108周龄是大鼠死亡率增长的快速期。随着周龄的增加,雌鼠和雄鼠血液指标的变异系数增大。性别对大鼠的血常规和血生化指标具有明显的影响,但雌鼠与雄鼠比较具有显著性差异的血液指标,随着周龄的增加而减少。结论在进行安全性评价试验中,性别、周龄对SD大鼠体质量、血常规值、血生化指标均有较大的影响,因此,雌雄宜分开统计,并需使用相同周龄的动物背景数据作为参考值范围。

中、美、日三国啮齿类饲料样品比较分析——24个月长期啮齿类致癌性实验的饲料选择

目的评估饲料品质、供应风险及价格,为24个月长期致癌性试验寻找最佳的饲料及饲料供应商。方法将日本进口MF18饲料,美国进口LabDiet饲料以及北京科澳生产的啮齿类饲料样品分别包装,委托专业检测实验室对常规营养成分、毒理及微生物指标进行检测,评估饲料品质;对各来源饲料的运输风险、非可控因素等可能影响饲料品质及稳定供应的方面进行评估;兼顾饲料价格作为参考评估因素。结果经评估,3种饲料品质均符合饲料国标GB14924-2001*的要求;以毒性研究关注的毒理指标作为评价标准,则3种饲料品质排序为:MF18饲料(最佳)—>LabDiet饲料(较佳)—>科澳国产饲料(佳);进口饲料的运输及供应稳定性相比存在较大风险;国产饲料价格相对便宜但未成为关键评估因素。结论经过综合评估,特殊定制的本地国产饲料被认定为是国家药物安全评价监测中心24个月致癌性试验用的最佳饲料。

用NIH3T3细胞转化试验对松花江江水潜在致癌性的研究

为探讨松花江江水潜在致癌性，检测了哈尔滨市上游１５ｋｍ处江水对ＮＩＨ３Ｔ３细胞的恶性转化作用。试验结果表明：乙醚提取物各剂量组均对细胞有一定毒性，能诱发典型的细胞转化灶，其转化率呈现剂量－效应关系。

亚硒酸钠对人和哺乳动物细胞、细菌的诱交作用研究及其致癌性的初步评估(摘要)

大量文献报道亚硒酸钠具有抗突变及致突变的双重生物效应,但各作者的实验结果有不一致现象。病因流行病学显示微量元素硒与人类肿瘤发生率呈负相关。为进一步探索硒的使用安全性,本研究利用体外培养人外周血淋巴细胞及活体小鼠、微生物三种系统,并从基因突变,染色体畸变(包括体细胞及生殖细胞),微核效应(包括经胎盘微核试验)。

毒性试验中评估化学物致癌性的数学模型

毒性试验的主要目的之一是研究化学物的致癌性。作者曾应用有关概率方法和试验的灵敏度、特异度,求得化学物在结果群条件下是致癌物的概率。这就是比值评估法。现介绍比值评估法的两种应用:(1)

FDA关于致癌性试验“特别方案评估”的流程和相关法规的介绍与探讨

目的:致癌性试验是药物非临床安全性评价和上市风险控制的重要组成部分,由于其试验周期长、费用高,且试验设计、实施以及结果评估和解释十分复杂,FDA要求申办方在致癌性试验正式开展前,预先向药品审评中心(CDER)提交"特别方案评估"(Special Protocol Assessment,SPA)的申请文件,针对拟开展的啮齿动物致癌性试验设计,征求FDA的审评意见。本文将详细介绍并探讨美国FDA关于致癌性试验SPA的流程及相关法规的要点,以期为国内药物研发机构、临床前合同研究组织(Contract Research Organization,CRO)、注册申报机构以及监管机构提供参考。方法:结合FDA致癌性试验"特别方案评估"指导原则的要求和相关工作经验,从致癌性试验方案提交FDA审评部门前的准备、提交程序、SPA审评文件材料内容的关注要点,以及FDA相关审评部门和致癌性评估执行委员会(ECAC)内部审评流程等方面予以介绍。结果与结论:申办方应了解并熟悉致癌性试验SPA文件提交和评估的过程,并严格按照法规要求,加强与监管部门的沟通交流,从而获取科学性意见和建议,为顺利开展长期致癌性试验提供帮助。

对使用小鼠骨髓微核试验评化学物致癌性价值的评论

对使用小鼠骨髓微核试验评化学物致癌性价值的评论过去许多年来，小鼠骨髓微核试验（简称ＭＮ试验）被用来检验了许多种人类致癌物以及相关的啮齿类动物遗传毒物，并无一例外地在临床征象出现之后就可观察到ＭＮ试验阳性，且大多在比较低的绝对剂量水平下就可出现强的反应...

海南霉素的遗传毒性研究及其致癌性预测2．海南霉素体内致突变性研究

海南霉素是我国研制成功的第一个聚醚类抗生素。在已对其进行体外致突变性检测的基础上，本文选择了２种体内试验方法，对其体内致突变性作了进一步研究。１．体内骨髓细胞染色体畸变分析；根据海南霉素的小鼠急性毒性试验结果，设立以下剂量组：０．１３、０．６４和１．２７ｍｇ／ｋｇ，经口接毒，每日一次，连续５日，同时设溶剂和阳性对照组。试验结果经ｔ－检验为阴性；２．体内骨髓微核试验，根据海南霉素的小鼠急性毒性试验结果，设以下剂量组：０．６４、１．２７和２．５４ｍｇ／ｋｇ，采用Ｈｅｄｄｌｅ（１９８４）提出的４次接毒和２４ｈ采样的方案，同时设溶剂和阳性对照组。试验结果经ｔ－验为阴性。本研究结果与以往体外致突变试验结果相符，海南霉素不具致突变作用。

燃煤烟气对实验动物潜隐性损害的研究

目的 探讨燃煤烟气 (主要是SO2 )对健康的潜在危害作用。方法 将实验家兔分别喂养在燃烧固硫煤、普通煤及不烧煤 (空白对照 )环境中 ,连续观察 90d ,监测 3种实验环境中SO2 的浓度 ;实验前、实验中 (45d)、实验后 (90d) 3次测定家兔的外周血淋巴细胞的DNA损伤情况 (彗星试验 ) ;实验结束时 ,作支气管和肺的病理切片观察。结果 普通煤组 2 4hSO2 平均浓度为 13 0 4mg/m3 ,是固硫煤组的 4 86倍(2 6 8mg/m3 ) ,是空白对照组的 31 80倍 (0 4 1mg/m3 )。普通煤组和固硫煤组家兔的淋巴细胞DNA损伤率有随时间和SO2 浓度增加而逐渐增加的趋势 ,实验 90d后 ,彗星细胞阳性率普通煤组为 10 36 % ,固硫煤组为 5 4 2 % ,空白对照组仅为 1 73% ,彗星细胞阳性率与SO2 浓度存在一定的非线性剂量 -效应关系(R2 =0 784 ,P <0 0 1)。病理结果表明 ,普通煤组有 1例家兔支气管上皮重度鳞形化生伴不典型增生细胞。结论 燃煤烟气能引起细胞DNA损伤 。