液相色谱串联质谱检测啶菌噁唑及其降解产物在土壤和水中的残留

本研究建立了液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时检测土壤和水中啶菌噁唑及其8种降解产物的多残留分析方法。土壤样品经乙腈提取后,弗罗里硅土净化;水样品分别采用直接用0.22μm水系滤膜过滤及乙腈提取的方式。净化后的样品采用Poroshell 120 EC-C_(18)色谱柱,以乙腈和0.2%甲酸水作为流动相进行梯度洗脱,再使用高效液相色谱串联质谱检测分析。结果表明:啶菌噁唑及其降解产物在土壤和水中的定量限分别为1.0μg/kg和0.1μg/L,其在土壤和水中的标准工作曲线分别在0.05~10μg/L和0.1~50μg/L范围内表现出良好的线性关系,决定系数(R 2)均大于0.99。啶菌噁唑及其降解产物在土壤中的平均回收率为71%~111%,相对标准偏差为0.9%~10.9%;在水中的平均回收率为80%~111%,相对标准偏差为0.1%~7.5%。应用该方法对北京4地的地表水进行检测,均未检出啶菌噁唑及其降解产物。该方法简便、准确、灵敏度高,适用于啶菌噁唑及其降解产物在土壤和水中的残留检测。

啶菌噁唑对番茄灰霉病菌的抑菌作用研究

采用生物测定方法研究了啶菌噁唑对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea不同发育阶段的影响。结果表明:其对菌落扩展、芽管伸长、分生孢子产生和菌核形成均具有显著的抑制活性,其中啶菌唑对P9-菌株菌丝生长和芽管伸长的EC50值分别为0.193和0.154μg/mL,0.5μg/mL的啶菌噁唑对菌丝生长和芽管伸长的抑制率大于77%,对分生孢子和菌核萌发的抑制率分别低于10%和40%,表明药剂对分生孢子萌发无明显抑制作用。紫外吸收分析显示,啶菌噁唑可破坏细胞的膜结构,促使菌体核酸和蛋白外渗。离体叶片毒力测定结果表明,120μg/mL的啶菌噁唑可有效抑制番茄灰霉病病斑扩展,抑制率达83.74%。

高效液相色谱法研究啶菌噁唑对番茄灰霉病菌麦角甾醇生物合成的影响

啶菌噁唑是我国研制的一种新型农用杀菌剂。本实验建立了高效液相色谱法定量分析灰霉病菌麦角甾醇含量的方法,研究了该药剂对番茄灰霉病菌麦角甾醇合成的抑制作用。结果表明,此方法具有良好的准确度和精密度,回收率为98.8%;相对标准偏差为3.0%,适用于测定番茄灰霉病菌麦角甾醇含量;番茄灰霉病菌菌丝在不同浓度啶菌噁唑和对照药剂戊唑醇处理下,药剂对其麦角甾醇合成具有明显的抑制作用,其中在0.5、10.0mg/L啶菌噁唑作用下,菌丝麦角甾醇含量分别为1.59(±0.126)和0.10(±0.011)mg/g干重菌丝,与DMIs类杀菌剂戊唑醇处理相比,没有显著性差异;与空白对照相比,抑制率分别达到22.44%和95·12%;回归分析表明,药剂处理浓度对数与麦角甾醇含量抑制率的机率值表现出正相关线性关系。

创制杀菌剂啶菌恶唑生物活性及应用研究(Ⅰ)——番茄灰霉病

啶菌恶唑(试验代号:SYP-Z048)是一种结构新颖、作用方式独特的新型杀菌剂,具有保护、治疗效果及良好的内吸传导性。对子囊菌、担子菌和半知菌引起的多种植物病害具有良好的防治作用。啶菌恶唑对番茄灰霉病具有很高的离体杀菌活性和优异的田间防治效果。室内离体试验啶菌恶唑对番茄灰霉病(Botrytiscinerea )的EC50值为0.206 /ml;1998～2002年多点的田间小区试验结果表明:啶菌恶唑在处理剂量200～400 g a.i./hm2、施药2～3次、间隔期6～8d的条件下对番茄灰霉病有良好的防治效果,防效优于目前生产上推广使用的多菌灵、腐霉利、菌核净、嘧霉胺等常规杀菌剂。

创制杀菌剂啶菌恶唑的生物活性及应用研究(Ⅲ)——番茄叶霉病

啶菌恶唑(SYP-Z048)对番茄叶霉病有较高的杀菌活性,离体活性EC50值为0.29g/ml,盆栽试验结果EC90为90.66g/ml;田间小区试验结果表明:25%啶菌恶唑乳油使用剂量为200～400ga.i./hm2,施药2～3次,能有效控制番茄叶霉病的发生与危害,防效与腈菌唑相当,优于多菌灵、甲基硫菌灵及代森锰锌。

创制杀菌剂啶菌恶唑的生物活性及应用研究(Ⅱ)黄瓜灰霉病

啶菌恶唑是一种结构新颖、作用方式独特的新型杀菌剂,具有保护、治疗效果及良好的内吸传导性。对子囊菌、担子菌和半知菌引起的多种植物病害具有良好的防治作用。啶菌恶唑对黄瓜灰霉病具有很高的杀菌活性,室内离体试验结果啶菌恶唑对黄瓜灰霉病 (Botrytis cinerea Pers) 的EC50值为0.199μg/ml;1998～2002年多点的田间小区试验结果表明:啶菌恶唑对黄瓜灰霉病具有良好的防治效果,在200～400 g a.i./hm2处理剂量下、施药2～3次、间隔期6～8d可有效控制黄瓜灰霉病的发生与危害。防效优于目前生产上推广使用的多菌灵、腐霉利、菌核净、嘧霉胺等常规杀菌剂。

番茄早疫病菌对啶菌噁唑敏感基线建立及药剂作用方式初探

从中国山西、内蒙古、山东、海南、江苏、福建和陕西省（自治区）不同市、县从未使用过啶菌噁唑的露地或保护地采集并经单孢分离获得166株番茄早疫病菌,采用菌丝生长速率法测定了病原菌群体对啶菌噁唑的敏感性。结果表明：啶菌噁唑对番茄早疫病菌的EC50值范围在0.11~2.29 mg/L之间,敏感性频率呈正态分布,其均值（0.56±0.39）mg/L可作为番茄早疫病菌对啶菌噁唑田间抗性监测的敏感基线;不同采集地菌株对啶菌噁唑的敏感性存在差异,其中采自福建省的菌株敏感性最高,而山西省大同、晋中和长治市的菌株敏感性最低。200 mg/L啶菌噁唑对番茄早疫病防治具有优异的保护和治疗作用,且接菌前4 d内施药和接菌后1~2 d内施药防效最佳。研究表明,啶菌噁唑对番茄早疫病防治具有良好的实际应用前景。

采前3种杀菌剂喷施对樱桃番茄采后品质的影响及啶菌噁唑残留检测

以金珠樱桃番茄为试材,研究采前杀菌剂喷施对采后樱桃番茄发病率、质量损失率和食用品质的影响,并测定樱桃番茄果实中啶菌噁唑残留变化。结果表明:采前喷施杀菌剂显著降低了金珠樱桃番茄采后发病率,提高了樱桃番茄果实中VC和可溶性固形物含量,减缓了VC和可溶性固形物含量贮藏期间的损失;但对质量损失率和可滴定酸含量的影响不显著(P<0.05)。对樱桃番茄采后贮藏保鲜效果最好的杀菌剂为啶菌噁唑,喷施质量浓度为0.4 g/L。采前喷施啶菌噁唑后,樱桃番茄中啶菌噁唑残留在采前和采后均呈下降趋势;且采后樱桃番茄中啶菌噁唑残留下降的速度比采前下降的慢,贮藏温度越低,下降越慢。

灰葡萄孢菌对啶菌噁唑的敏感性基线及抗药突变体的诱导与生物学性状

从河北省不同地区未使用过啶菌噁唑的保护地中采集黄瓜或番茄灰霉病果、病叶,经单孢分离获得102株灰葡萄孢菌,采用菌丝生长速率法测定其对啶菌噁唑的敏感性,所得EC50值在0.04600.1991μg/mL之间,平均为（0.1182±0.0363）μg/mL,其敏感性呈连续单峰曲线分布,可作为灰葡萄孢菌对啶菌噁唑的敏感性基线。采用紫外线诱导获得了7株抗药突变体,抗药突变体的菌落直径、菌丝干重、产孢量和致病性明显低于其亲本菌株,继代培养9代后抗药突变体的抗药性倍数下降。

利用啶菌噁唑福美双组合增效结果评价Wadley方法影响因子

利用实验室通过菌丝速率生长法测得的对啶菌噁唑敏感(EC50平均为0.094 03μg/mL)与抗性灰霉病菌株(EC50平均为2.664 1μg/mL)进行复配组合试验。Wadley方法是评价杀菌剂混剂具有增效作用与否经常采用的方法,对我国杀菌剂复配生产和应用具有重要指导作用。本研究从其增效系数与不同菌株、不同测定方法、药剂复配组合比例及EC50的相关性,来评价Wadley方法的影响因子。

杀菌剂啶菌噁唑的高效液相色谱分析

建立了一种用反相高效液相色谱测定啶菌噁唑的定量分析方法。采用C18ODS色谱柱，以甲醇-水（75：25，体积比）作为流动相，流速1．0mL／min，检测波长220nm。啶菌噁唑色谱图显示两个吸收峰，分别为两个同分异构体Z体和E体。在400～700μg／mL浓度范围内，标准溶液浓度和吸收峰面积之间有良好的线性关系，回归方程为Y=4．8467X＋232．85，相关系数r为0．9992；对原药溶液及其制剂溶液测定的重复性SR分别为0．0040和0．0047。该方法准确、精密，适用于啶菌噁唑的定量分析。

高效液相色谱-质谱法分析啶菌噁唑在番茄灰霉病菌中的代谢行为

采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)分析了杀菌剂啶菌噁唑在番茄灰霉病菌液体摇培体系中的代谢动态。啶菌噁唑液相色谱定量检测法的线性回归方程为y=54.5x+11.2(r=0.9997),在2.07～72.34 mg/L范围内,方法回收率和精密度符合农药痕量分析要求。代谢影响因子研究结果显示,培养24 h孢子初萌发阶段的灰霉病菌对药剂代谢能力显著优于后期菌丝生长阶段。啶菌噁唑代谢量与接菌量呈正相关。代谢动态研究表明,在0.05,0.10和0.21 mg/L添加浓度下,啶菌噁唑与灰霉病菌经过44 h的共培养,分别降解为初始浓度的53.8%,58.2%和68.6%,代谢随药剂浓度降低而增快,而在不含菌的培养基中降解率低于0.6%(0.21 mg/L)。药剂处理灰霉病菌培养液经HPLC分离获得4个疑似代谢产物峰,其中化合物M2为分子量257的含氯代谢产物。啶菌噁唑在灰霉病菌菌体中发生了代谢作用,代谢速度受菌龄、接菌量和药剂浓度的影响。

氟吡菌酰胺与啶菌噁唑混配对灰葡萄孢的联合毒力

采用菌丝生长速率法测定了氟吡菌酰胺与啶菌噁唑不同配比(质量比2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4)混配对灰葡萄孢XSZH1的联合毒力,以及最佳增效配比对XSHF6、XSHF2、17RC12和XSHF7等4株灰葡萄孢的联合毒力,并在田间验证了最佳组合对番茄灰霉病的防治效果。结果显示,氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1和1∶4混配时,对灰葡萄孢XSZH1具有毒力增效作用,前者的增效作用最明显,增效系数为1.69。氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1混配时对其他4株灰葡萄孢菌株也显示出毒力增效作用,且在田间有效剂量为150～250g·hm-2时,对番茄灰霉病的防治效果为80.50%～90.13%。可见氟吡菌酰胺与啶菌噁唑以质量比2∶1混配可以有效地控制番茄灰霉病,适合在田间应用推广。

表面活性剂对啶菌噁唑防治番茄灰霉病的增效作用

以番茄灰霉病菌为靶标菌,采用菌丝生长速率法、菌丝干重法和离体叶片法分别测定了有机硅、蓖麻油、吐温、烷基萘磺酸盐、烷基酚聚氧乙烯醚、木质素、氮酮及磷酸酯盐等18个品种的表面活性剂对啶菌噁唑的增效作用。结果表明:采用不同的毒力测定方法,表面活性剂与杀菌剂所表现出的协同作用有所差异。其中0201B、NP-7、TX100在生长速率法和菌丝干重法中均表现出对啶菌噁唑的增效作用,而离体叶片法中仅有添加SilwetL77的处理可显著提高药剂防效,对菌丝的抑制活性最高达83.69%,而对照的抑制率为52.09%。

25%啶菌恶唑乳油及其复配制剂对灰霉病的防治效果

对25%啶菌恶唑EC及其与乙霉威、福美双复配后的制剂30%啶菌恶唑·乙霉威SC、40%啶菌恶唑·福美双SE防治灰霉病的效果进行了评价,两年的试验结果均表明,25%啶菌恶唑EC防治灰霉病效果明显,最高防效达80.80%,且复配后的两种制剂均具有明显增效作用,是蔬菜上防治灰霉病的优良杀菌剂。

杀菌剂啶菌恶唑对番茄灰霉病和叶霉病田间防效试验

啶菌恶唑是沈阳化工研究院研制生产的一种新型杀菌剂。经室内抑菌活性和田间试验结果表明，啶菌恶唑对番茄灰霉病菌和叶霉病菌具有较高的抑菌活性和田间防效。EC加值分别为0．2055μg／ml和0．3509μg／ml；在200-400g／hm^2的处理剂量下，施药3次后，25％啶菌恶唑乳油对番茄灰霉病和叶霉病的防效分别为85．58％-89．79％和83．87％-89．14％，均优于当地常用药剂的防效。苗期在2g／L使用剂量下未见药害。

10%啶菌噁唑微乳剂的研制

介绍了一种以水为介质的环保型绿色农药新制剂—10%啶菌唑微乳剂,简述了该剂型的特点、乳化剂及溶剂品种的筛选,并且考察了水质对微乳剂配制的影响,考察了配制的微乳剂低温、热贮、乳化和对原药分解率等性能,表明该微乳剂品种分解率低,质量稳定,使用安全,社会效益显著。

灰葡萄孢菌对啶菌恶唑的抗药性研究初报

以灰葡萄孢菌为试验耙标,通过室内药剂驯化、紫外灯诱变,获得抗性突变体,并对抗性突变体的适合度进行测定,以评价新型杀菌剂啶菌恶唑的抗性风险。结果表明,经药剂驯化10代,抗性突变体的EC50值与敏感菌株无明显差异。在诱导14代后,EC50有所上升,但是抗性突变体的生长速率、产孢量等明显低于敏感菌株。因此,初步推断啶菌恶唑是一种抗性风险较低的杀菌剂。

福美双与啶菌恶唑复配对灰葡萄孢活性的协同抑制作用

为了明确福美双与啶菌恶唑复配对灰葡萄孢Botrytis cinerea的协同抑制作用,首先采用菌丝生长速率法对保定与承德不同地区的灰霉菌株进行复配试验,筛选出福美双与啶菌恶唑的最佳增效组合5:1。同时测定了福美双与啶菌恶唑的最佳增效组合5:1对孢子和菌核的抑制活性以及对菌丝内容物含量的影响。结果显示,其5:1组合与对照、单剂进行比较,其5:1组合对孢子萌发、菌核的产生和萌发和可溶性糖、可溶性蛋白含量具有显著抑制作用。利用离体叶片法对灰葡萄孢活性进行检测,5:1组合处理在病斑直径、发病率、产孢量和孢子萌发率方面较对照、单剂差异显著,其抑制作用最大。综上所述,福美双与啶菌恶唑复配对灰葡萄孢活性具有协同增效抑制作用。

25%啶菌恶唑对桃褐腐病的抑菌率与田间防效

通过试验,明确25%啶菌恶唑乳油对桃褐腐病菌的离体抑菌及田间防治效果。抑制菌丝生长试验结果表明,25%啶菌恶唑乳油对桃褐腐病菌EC 50值为0.0105 mg/L,低于对照药剂腈苯唑(EC 50值=0.077 6 mg/L)、丙森锌(EC 50值=0.338 5 mg/L)、多菌灵(EC 50值=0.865 3 mg/L)、甲基硫菌灵(EC 50值=0.459 1 mg/L);田间试验结果表明,25%啶菌恶唑乳油100 g a.i./hm^2的防效与腈苯唑悬浮剂100 ga.i./hm^2相当,高于对照药剂丙森锌、多菌灵、甲基硫菌灵对桃褐腐病的防效。