化痰祛瘀方对人喉癌原代细胞STAT3信号通路影响

目的:观察化痰祛瘀方(HTQYF)对喉癌原代细胞STAT3信号通路的影响。方法:取病理检查诊断为喉鳞状细胞癌患者喉癌组织,组织贴壁法分离喉癌细胞,以喉癌细胞Tu212作为阳性对照,运用细胞免疫荧光技术鉴定细胞,通过CCK8实验探讨HTQYF对喉癌原代细胞增殖的影响,并计算细胞抑制率,Western Blot、PCR法检测不同组别STAT3、Cyclin D1、P27蛋白和mRNA表达情况。结果:HTQYF对喉癌原代细胞具有明显的抑制作用,随着药物浓度的升高,抑制率不断上升,浓度为3.2、6.4mg/mL时,平均抑制率分别为47.3%、89.9%;与空白组比较,各剂量组能显著抑制喉癌原代细胞STAT3蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),同时高剂量组上调P27蛋白(P<0.01),而各组对Cyclin D1蛋白表达无影响;高剂量组可显著抑制喉癌原代细胞STAT3、Cyclin D1mRNA表达(P<0.01),但是对P27mRNA表达无影响。结论:通过组织贴壁法成功培养出人喉癌原代细胞,HTQYF能抑制原代喉癌细胞增殖,且能抑制STAT3的表达,有可能是调控下游Cyclin D1和P27信号因子起作用。

IFN-γ对原代喉癌细胞增殖及血管内皮生长因子-C转录的影响

目的研究IFN-γ对体外培养的原代喉癌细胞的作用。方法采用MTT比色法观察IFN-γ对原代喉癌细胞生长的影响。实时PCR法观察IFN-γ对原代喉癌细胞血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因表达的影响。结果 IFN-γ对原代喉癌细胞生长的抑制作用呈剂量依赖性;1000U/mLIFN-γ作用于原代喉癌细胞后48h后,VEGF-C基因转录水平明显下调。结论 IFN-γ抑制原代喉癌细胞的增殖,下调VEGF-C基因表达,为寻求喉癌免疫治疗提供了新途径。