双能量CT非线性融合和噪声优化的虚拟单能量图像技术在喉鳞状细胞癌中的应用

目的:探讨双能量CT线性融合图像(linear blending imaging,LBI)、非线性融合图像(nonlinear blending image,NBI)和噪声优化的虚拟单能量图像(noise-optimized virtual monoenergetic image,VMI+)技术在喉鳞状细胞癌中的应用价值。方法:回顾性分析2019年6月至2022年3月61例经病理证实为喉鳞状细胞癌患者的双能量CT资料。双能量图像采用LBI[融合系数为1(80 kV)和0.6(M0.6)]、NBI和VMI+(40 keV、55 keV)技术重建。比较5组图像的客观图像质量[对比噪声比(contrast-tonoise ratio,CNR)、肿瘤CT值、噪声]和主观图像质量(肿瘤边界评分和整体图像质量评分)。结果:40 keV的CNR、肿瘤CT值和肿瘤边界评分均明显高于80 kV、M0.6、NBI和55 keV,差异均有统计学意义(均P<0.05)。NBI的整体图像质量评分明显高于80 kV、M0.6、40 keV和55 keV,差异均有统计学意义(均P<0.05)。NBI的噪声明显低于80 kV、40 keV和55 keV,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:在喉鳞状细胞癌的双能量CT中,采用VMI+技术(40 keV)能提供更好的CNR、肿瘤CT值和肿瘤边界,采用NBI技术能提供更低的噪声和更好的整体图像质量。

lncRNA NEAT1降表达人喉鳞状细胞癌细胞增殖凋亡变化及与miR-214靶向关系

目的观察长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录体1(NEAT1)降表达的人喉鳞状细胞癌(LSCC)细胞增殖凋亡变化,探讨其与微小RNA-214(miR-214)的靶向关系。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测人永生化表皮细胞Hacat和人LSCC细胞系(FD-LSC-1、Hep-2、TU177)中lncRNA NEAT1、miR-214,选择TU177细胞为受试细胞。取对数生长期TU177细胞,分为甲、乙组,分别转染si-lncRNA NEAT1(敲低lncRNA NEAT1表达)、si-NC(乱序无意义序列),培养至24 h时采用CCK8法观察两组细胞增殖情况、采用平板克隆形成实验观察两组细胞克隆形成情况、采用流式细胞术观察两组细胞周期和细胞凋亡情况、采用RT-qPCR法检测两组细胞lncRNA NEAT1及miR-214。另取对数生长期TU177细胞,分为一二三四组,一组顺序转染WT-lncRNA NEAT1、miR-214 mimic,二组顺序转染WT-lncRNA NEAT1、miR-NC,三组顺序转染MUT-lncRNA NEAT1、miR-214 mimics,四组顺序转染MUT-lncRNA NEAT1、miR-NC。采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA NEAT1及miR-214的靶向关系。结果与乙组相比,培养24、48、72 h时甲组TU177细胞OD值低,培养14 d时甲组TU177细胞克隆形成数少,甲组TU177细胞G0/G1期细胞比例高、S期细胞比例低,细胞凋亡率高(P均<0.05);与乙组相比,转染24 h时甲组TU177细胞lncRNA NEAT1相对表达量低、miR-214相对表达量高(P均<0.05)。培养48 h时一、二、三、四组TU177细胞细胞荧光素酶活性分别为0.63±0.08、0.99±0.01、1.02±0.02、0.98±0.03,与二组相比,一组细胞荧光素酶活性低(P<0.05)。结论敲低lncRNA NEAT1表达可抑制TU177细胞的增殖和克隆,阻滞细胞周期于G0/G1期,并促进细胞的凋亡。TU177细胞中lncRNA NEAT1与miR-214靶向相关。lncRNA NEAT1可能通过与miR-214靶向结合,抑制TU177细胞的增殖克隆,阻滞细胞周期于G0/G1期,促进细胞的凋亡。

长链非编码RNA核富集转录体1促进喉鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的机制研究

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录体1(NEAT1)NEAT1对喉鳞状细胞癌(LSCC)细胞迁移和侵袭的影响,并进一步分析miR-429/锌指E-盒结合同源异形盒1(ZEB1)轴在其中发挥的作用。方法慢病毒转染建立稳定敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞,通过RT-qPCR检测细胞lncRNA NEAT1表达以验证转染效率,通过Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,通过Western blot检测细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达。通过生物信息学分析miR-429与lncRNA NEAT1和ZEB1 mRNA间的潜在结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-429与lncRNA NEAT1以及miR-429与ZEB1 mRNA结合。将miR-429抑制剂转染敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞,通过Western blot检测细胞ZEB1表达。进一步检查敲减ZEB1对抑制miR-429的敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞迁移、侵袭和EMT的影响。结果敲减lncRNA NEAT1降低LSCC细胞lncRNA NEAT1表达,抑制细胞迁移和侵袭并下调细胞N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达。miR-429与lncRNA NEAT1和ZEB1 mRNA间存在潜在结合位点,且miR-429与lncRNA NEAT1以及miR-429与ZEB1 mRNA结合。抑制miR-429逆转了敲减lncRNA NEAT1对LSCC细胞ZEB1表达的抑制作用。此外,敲减ZEB1逆转了抑制miR-429对敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞迁移和侵袭的促进作用及EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达的上调作用。结论lncRNA NEAT1促进LSCC细胞迁移和侵袭,其机制可能与海绵化miR-429上调ZEB1表达促进LSCC细胞EMT有关。

喉鳞状细胞癌组织中ATF6和IFN-α的表达与临床病理特征及预后的相关性研究

目的 探讨转录激活因子6(activating transcription factor 6,ATF6)和干扰素α(interferon α,IFN-α)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)组织中的表达及意义。方法 选取2015年3月~2020年3月于河南科技大学临床医学院/河南科技大学第一附属医院入院治疗的100例LSCC患者,收集整理其肿瘤部位、分化程度、淋巴结转移等临床病理特征;采用免疫组织化学法检测组织中ATF6和IFN-α的表达;采用Spearman法分析LSCC组织中ATF6与IFN-α表达的相关性;用Kaplan-Meier法分析LSCC组织中ATF6,IFN-α表达与患者三年生存率的关系;采用COX回归分析LSCC患者一年死亡的影响因素。结果 ATF6在LSCC组织中阳性率(76.00%)明显高于癌旁正常组织(13.00%),IFN-α在LSCC组织中阳性率(29.00%)明显低于癌旁正常组织(74.00%),差异具有统计学意义(χ^(2)=80.352,40.536,均P<0.05);TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、浸润深度为深层、发生淋巴结转移的LSCC患者ATF6阳性表达比例均显著高于TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、浸润深度为浅层、未发生淋巴结转移的LSCC患者(χ^(2)=7.310,9.223,5.123,均P<0.05)。TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、浸润深度为深层、发生淋巴结转移的LSCC患者IFN-α阴性表达比例均显著高于TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、浸润深度为浅层、未发生淋巴结转移的LSCC患者(χ^(2)=8.564,5.021,5.203,均P<0.05);LSCC组织中ATF6与IFN-α表达具有负相关性(r=-0.415,P<0.05);ATF6阳性表达组LSCC患者三年生存率(50.00%)显著低于ATF6阴性表达组(83.33%),IFN-α阳性表达组LSCC患者三年生存率(82.76%)显著高于IFN-α阴性表达组(47.89%)(Log rank χ^(2)=8.002,10.854,均P<0.05)。ATF6(HR=1.735,95%CI:1.159~2.598),IFN-α(HR=0.624,95%CI:0.439~0.886)均是LSCC患者死亡的影响因素(P<0.05)。结论 LSCC组织中ATF6阳性表达率升高、IFN-α阳性表达率下降,均与患者临床病理特征及预后密切相关。

转录因子HOXC13通过上调PCNA表达促进喉鳞状细胞癌AMC-HN-8细胞的恶性生物学行为

目的:本研究旨在探讨转录因子HOXC13在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达、功能及可能的调控机制。方法:常规培养LSCC细胞,将其分为sh-NC组、sh-HOXC13组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-HOXC13组、pcDNA3.1-PCNA组和sh-HOXC13+pcDNA3.1-PCNA组,用转染试剂将相应核酸和质粒转染各组细胞。用数据库数据分析HOXC13mRNA在LSCC组织中的表达;收集2019年1月至2022年12月在联勤保障部队第九八〇医院耳鼻咽喉头颈外科手术切除的62对LSCC组织及配对的癌旁组织,免疫组织化学法检测中国人LSCC组织中HOXC13蛋白的表达,qPCR检测中国人LSCC组织、癌旁组织以及各组细胞中HOXC13和PCNAmRNA的表达,MTS法检测各组AMC-HN-8细胞的增殖能力,平板克隆实验检测各组AMC-HN-8细胞的克隆形成能力,Transwell小室实验检测各组AMC-HN-8细胞的迁移和侵袭能力,双萤光素酶报告基因实验和染色质免疫沉淀技术(ChIP)验证HOXC13与PCNA之间的结合关系。结果:HOXC13和PCNA在LSCC组织和细胞中均呈高表达(P<0.05或P<0.01)且两者的表达水平呈正相关(P<0.01),HOXC13的表达水平与TNM分期有明显关联(P<0.01)。敲减HOXC13可明显抑制AMC-HN-8细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01),过表达HOXC13则促进TU686细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。HOXC13可与PCNA启动子区结合并调控其转录。敲低PCNA可部分逆转HOXC13对AMC-HN-8细胞的恶性生物学行为的促进作用(均P<0.01)。结论:HOXC13通过上调PCNA促进LSCC细胞的恶性生物学行为,HOXC13是LSSC临床诊断和治疗的潜在靶点。

SPATS2通过激活NOTCH信号通路促进喉鳞状细胞癌进展的机制研究

目的:探究丝氨酸精子发生相关蛋白2(spermatogenesis associated serine rich 2,SPATS2)影响喉鳞状细胞癌(larynxsquamouscellcarcinoma,LSCC)增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)发生的分子机制,从而为寻找LSCC筛查、诊断和治疗的潜在靶点提供理论依据。方法:从TCGA数据库中下载LSCC临床及RNA-seq数据并进行整理,从中提取SPATS2的mRNA表达数据,并用R 4.3.1进行分析作图;用R4.3.1进行单基因差异分析后所得基因集进行基因本体分析(gene ontology,GO)和基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA);用CCK8、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、Western blot验证敲减或过表达SPATS2后细胞的增殖、迁移和侵袭能力,用qRT-PCR检测目的基因mRNA水平变化,并用ImageJ、GraphPad Prism8和IBM SPSS Statistics 25对结果进行定量与统计学分析。结果:通过生信分析发现,LSCC组织中SPATS2的mRNA水平显著高于癌旁组织(P<0.001),且高水平SPATS2不利于患者生存(P=0.021)。过表达或敲减SPATS2后,细胞的增殖、迁移、侵袭能力及波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、NOTCH1、cleaved-NOTCH1的表达水平、NOTCH信号通路下游靶基因的mRNA水平均随之升高或降低。在过表达SPATS2的同时抑制NOTCH信号通路可以逆转由单独过表达SPATS2导致的细胞增殖、迁移、侵袭能力增强和EMT水平升高的结果。结论:SPATS2能够通过影响NOTCH信号通路影响LSCC细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT等恶性表型,进而影响LSCC进展。

HMGB 1在浸润性喉鳞状细胞癌发生和发展中的作用及临床意义

目的:浸润性喉鳞状细胞癌(invasive laryngeal squamous cell carcinoma,I-LSCC)早期诊断、早期干预治疗是降低其发病率和病死率的关键。本研究旨在探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)在I-LSCC发生和发展中的作用及临床意义。方法:收集2009年11月至2011年6月北京同仁医院病理科的石蜡包埋标本281例,包括I-LSCC 123例、喉黏膜异型增生(laryngeal precursor lesions,LPLs)103例(其中低级别异型增生31例、高级别异型增生49例、原位癌23例)及声带息肉(vocal polyp,VP)55例。应用免疫组织化学染色检测标本中HMGB1及Ki-67的表达,其中HMGB1阳性强度和阳性率得分相加总分为0~7(0~4分为低表达,5~7分为高表达);Ki-67阳性率≥50%为高表达,<50%为低表达。结果:HMGB1在I-LSCC中的表达(4.35±1.33)高于在LPLs(3.12±0.95)及VP(2.11±0.71)中(均P<0.001)。HMGB1表达在喉黏膜低级别异型增生、高级别异型增生及原位癌之间无明显差异(P>0.05)。36.59%的I-LSCC同时具有HMGB1高表达及Ki-67高表达,且HMGB1高表达组和低表达组的Ki-67阳性率差异有统计学意义(P=0.01);33.33%的I-LSCC同时具有HMGB1高表达及淋巴结转移,且HMGB1高表达组和低表达组的淋巴结转移率差异有统计学意义(P<0.001);47.15%的I-LSCC同时具有HMGB1高表达及高临床分期(III期及IV期),且HMGB1高表达组和低表达组的临床分期差异有统计学意义(P<0.001)。HMGB1表达与年龄、性别、吸烟指数、饮酒情况及癌细胞分化程度无明显差异(均P>0.05)。HMGB1高表达的I-LSCC患者预后较HMGB1低表达的患者更差(P<0.05)。结论:HMGB1在I-LSCC中高表达,可能在I-LSCC的发生和发展中起重要作用。

喉鳞状细胞癌中HPV与TAP、CD8、HLA表达的相关性及临床意义

目的检测抑制基因蛋白16(P16)与抗原加工相关转运体(TAP)1、TAP2、人类白细胞抗原(HLA)、CD8在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨喉鳞状细胞癌中TAP1、TAP2、HLA、CD8的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的相关性及临床意义。方法选取滨州医学院附属医院2013年1月至2018年12月行手术切除的84例喉鳞状细胞癌患者的组织蜡块进行临床研究,其中男性68例,女性16例,年龄45~78岁,中位年龄63岁,采用免疫组化EnVision法检测84例喉鳞状细胞癌组织中P16和TAP1、TAP2、HLA、CD8的表达情况,分析其与临床病理特征的关系。进一步采用χ^(2)检验或Fisher精确检验、Spearman秩相关检验分析HPV感染与上述蛋白表达的相关性,采用Kaplan-Meier进行生存分析,Cox比例风险回归模型进行多因素生存分析。结果P16在喉鳞状细胞癌中的阳性表达率为11.9%(10/84),在癌旁正常组织中为阴性表达;CD8在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率为38.1%(32/84),低于癌旁正常组织[56.0%(47/84)],TAP1、TAP2、HLA在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率均低于癌旁正常组织[41.7%(35/84)比69.0%(58/84)、29.8%(25/84)比56.0%(47/84)、42.8%(36/84)比57.1%(48/84)],其中,TAP2在癌和癌旁正常组织中的表达差异有统计学意义(χ^(2)=5.80,P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中CD8的表达与临床分期有关,差异有统计学意义(χ^(2)=6.57,P<0.05);而TAP1、TAP2、HLA、P16的表达与临床病理因素无关。Spearman关联性分析结果提示TAP1表达与TAP2、CD8呈正相关(r=0.295、0.232,均P<0.05),HLA的表达与CD8的表达呈正相关(r=0.232,P<0.05)。结论TAP1、TAP2、HLA、CD8在喉鳞状细胞癌组织中低表达,提示肿瘤可能通过下调TAP1、TAP2导致HLA表达异常,从而抑制CD8免疫应答过程,进而抑制机体免疫反应,为肿瘤免疫逃逸机制提供理论支持。

周期蛋白依赖性激酶抑制因子3在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(CDKN3)在喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中的表达水平,分析其与LSCC患者临床病理特征及预后的关系。方法收集83例LSCC患者的癌组织和对应的癌旁正常组织,采用免疫组织化学法检测组织中CDKN3的表达水平。比较不同临床病理特征患者LSCC组织中CDKN3表达水平,以及不同CDKN3表达水平的患者的总体生存率。根据患者生存情况,将其分为死亡组(n=11)和生存组(n=72),比较两组的临床病理特征及LSCC组织中CDKN3表达水平。采用Logistic回归模型分析LSCC患者生存情况的影响因素。结果LSCC组织CDKN3表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05)。TNM分期为Ⅲ期+Ⅳ期、T3期+T4期、有淋巴结转移情况的患者LSCC组织中CDKN3的表达水平更高(P<0.05)。CDKN3低表达患者的总体生存率高于CDKN3高表达者(P<0.05)。生存组TNM分期为Ⅰ期+Ⅱ期、无淋巴结转移、T1期+T2期、CDKN3表达水平<0.029的患者比例高于死亡组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果提示淋巴结转移是影响LSCC患者生存情况的影响因素(P<0.05)。结论LSCC组织中CDKN3表达水平升高,其表达水平与患者临床分期和淋巴结转移有关,且CDKN3高表达患者的总体生存率较低。

lncRNA在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用

喉鳞状细胞癌是最常见的喉癌,目前手术结合放射化学治疗(简称放化疗)LSCC取得了不错的效果,但是晚期生存率仍较低,且发病机制不明确。近年来更多的研究致力于探索新的生物标志物用于预测和治疗LSCC。已经证实长链非编码RNA(lncRNA)是LSCC发生、发展中重要的调节因子。本文旨在讨论lncRNA在LSCC发生、发展中的调控作用及发生机制,为LSCC的分子生物学治疗提供参考依据。

NDRG1及nm23在喉鳞状细胞癌中的表达特点及其对喉鳞癌患者预后的影响

目的:分析N-myc下游调节基因1 (N-myc downstream regulated gene 1, NDRG1)和非转移性第23基因(non-metastatic 23rd gene, nm23)在喉鳞癌中的表达特点及其对喉鳞癌患者预后的影响。方法:利用免疫组化方法,观察喉息肉、喉乳头状瘤及喉鳞癌中NDRG1和nm23蛋白的表达特点,对25位喉鳞癌患者进行随访以了解2个因子对患者预后的影响。结果:(1) NDRG1蛋白在喉息肉中表达最弱,从喉息肉→喉乳头状瘤→喉鳞癌的表达阳性率有逐渐升高趋势,两两比较差异有显著性(P = 0.000);高、中、低分化喉鳞癌中NDRG1表达也为逐渐升高态势,高分化与中分化、低分化鳞癌间差异有显著性(P = 0.001, 0.000);T1~T2期喉鳞癌中NDRG1的表达阳性率高于T3~T4期喉鳞癌组织中的,淋巴结未发生转移组中NDRG1的表达阳性率高于淋巴结发生转移组,但差异均无显著性(P > 0.05);(2) 喉息肉与喉乳头状瘤、喉鳞癌中nm23蛋白表达差异有显著性(P = 0.000),T1~T2期喉鳞癌组织nm23蛋白表达高于T3~T4期(P = 0.000),淋巴结未发生转移组中nm23蛋白表达明显高于淋巴结发生转移者(P = 0.004);在高、中、低分化喉鳞癌中,nm23蛋白表达阳性率逐渐升高,但差异无统计学意义(P = 0.717);(3) 喉鳞癌患者NDRG1蛋白表达越强,患者死亡风险越大。结论:(1) NDRG1可能与喉鳞癌的发生、病理学分级和临床分期有关;(2) nm23低表达与喉鳞癌进展有关;(3) NDRG1蛋白表达增强有可能作为预测喉鳞癌患者预后不良的指标之一。

Hedgehog信号通路在喉鳞状细胞癌中的研究进展

喉鳞状细胞癌(ISCC)是世界上第六大恶性肿瘤,预后较差,治疗选择有限,目前还缺乏分子靶向治疗。因此,有必要确定新的生物标记物,以更好地预测疾病和有希望的目标个性化治疗。越来越多的证据表明,Hedgehog(HH)信号通路在喉组织的发展和维护中起着至关重要的作用。HH途径通常涉及胚胎发生、干细胞再生和组织再生。然而,HH通路的异常激活也与致癌和CSC调节有关。在包括基底细胞癌在内的一些肿瘤中观察到HH通路的过度活化,这些肿瘤都是用HH抑制剂成功治疗的。然而,有关HH通路的临床研究仍然很少。在本综述中,我们总结了目前的知识和最近的进展,HH通路在ISCC及其可能的影响预后和未来的治疗。

丝裂原活化蛋白激酶4、生存素基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶4(MKK4)、生存素(Survivin)基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法:选择82例喉癌患为研究对象,取手术切除的喉癌组织及癌旁正常黏膜组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法、免疫组织化学法检测MKK4、Survivin基因表达,分析其与临床病理特征的关系,随访记录喉癌患者5年生存率,并用Cox回归模型对喉癌患者预后因素进行分析。结果:喉癌组织中MKK4mRNA表达较癌旁组织下降,喉癌组织中SurvivinmRNA表达较癌旁组织升高(均P<0.05)。癌旁组织和喉癌组织MKK4蛋白阳性表达率分别为71.95%(59/82)和40.24%(33/82),Survivin蛋白阳性表达率分别为23.17%(19/82)和71.95%(59/82)(χ^(2)=16.737,χ^(2)=39.117,均P<0.01)。不同肿瘤分化程度、TNM分期及有无淋巴结转移患者MKK4、Survivin蛋白阳性表达比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。喉癌组织中MKK4和Survivin表达呈负相关(r=-0.403,P<0.05)。MKK4阳性患者5年生存率81.82%(27/33)高于阴性患者65.31%(32/49),Survivin阳性患者5年生存率62.71%(37/59)低于阴性患者82.61%(19/23),影响喉癌患者预后的因素为TNM分期和MKK4、Survivin表达(均P<0.05)。结论:喉癌组织中MKK4表达下调,Survivin表达上调,两者可能是潜在的预后标记物以及治疗靶点。

Twist2、Snail、TPX2、Aurora-A在喉鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理特征的相关分析

目的:探究扭曲蛋白2(Twist2)、转录因子(Snail)蛋白、Xklp2靶蛋白(TPX2)、极光激酶A(Aurora-A)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理特征的相关分析。方法:选取2021年1月至2023年7月大冶市人民医院收治的喉鳞状细胞癌66例为研究对象,取患者手术切除癌组织和癌旁正常组织分为喉鳞状细胞癌组与癌旁组织组。比较两组Twist2、Snail、TPX2、Aurora-A表达差异,通过ROC曲线分析Twist2、Snail、TPX2、Aurora-A表达诊断喉鳞状细胞癌的价值,并分析Twist2、Snail、TPX2、Aurora-A表达与喉鳞状细胞癌临床病理特征的关系。结果:喉鳞状细胞癌组织中Twist2阳性表达、Snail阳性表达、TPX2阳性表达、Aurora-A阳性均高于癌旁组织(P<0.05)。ROC曲线分析显示,Twist2、Snail、TPX2、Aurora-A表达诊断喉鳞状细胞癌的AUC分别为0.674、0.697、0.818、0.780,均具有较高准确性;诊断敏感度、特异度:Twist2为54.5%、80.3%;Snail为56.1%、83.3%;TPX2为69.7%、93.9%;Aurora-A为63.6%、92.4%,诊断具有一定价值。喉鳞状细胞癌组织中Twist2阳性表达、Snail阳性表达、TPX2阳性表达、Aurora-A阳性均与年龄、性别、临床分型无相关(P>0.05),但喉鳞状细胞癌组织中Twist2阳性表达、Snail阳性表达、TPX2阳性表达、Aurora-A阳性均与甲状软骨累及、TNM分期、分化程度、淋巴结转移、远处转移存在相关(P<0.05)。结论:Twist2、Snail、TPX2、Aurora-A在喉鳞状细胞癌组织中高表达,与患者临床病理特征相关密切,可作为临床诊断喉鳞状细胞癌有效指标。

喉鳞状细胞癌组织中SEPT2、CMTM6表达及其与化疗敏感性的关系

目的探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中胞裂蛋白2(SEPT2)、含CKLF样MARVEL跨膜结构域的蛋白6(CMTM6)表达变化及其与化疗敏感性的关系。方法选取2017年1月至2019年8月该院收治的117例LSCC患者作为研究对象。比较LSCC组织和对应癌旁组织中SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA表达情况,并分析LSCC组织中SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA表达与临床病理特征的关系。绘制生存曲线分析不同SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA表达LSCC患者客观缓解率和生存情况。结果LSCC组织中SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA表达高于对应癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同TNM分期和淋巴结转移LSCC患者SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA高表达组的客观缓解率低于SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA低表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。生存曲线分析显示,SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA高表达组总生存率低于SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA低表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LSCC患者SEPT2 mRNA、CMTM6 mRNA呈高表达,其表达情况与LSCC TNM分期、淋巴结转移、化疗敏感性和预后有关。

老年喉鳞状细胞癌中PAC-1、CD62P、SLC7A11表达及临床意义

目的 分析老年喉鳞状细胞癌患者血小板表面血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa纤维蛋白原受体(PAC-1)、血小板P-选择素(CD62P)、SLC7A11的表达水平及临床意义。方法 收集我院2016年1月至2021年1月收治的老年喉鳞状细胞癌患者87例(喉癌组),另选取本院同期收治声带息肉患者87例(对照组)。收集患者血液及病理检查标本,采用流式细胞术通过单抗免疫荧光标记测定特异性荧光抗体结合血小板阳性率,进行PAC-1、CD62P检测,免疫组化SP法检测SLC7A11表达。分析PAC-1、CD62P、SLC7A11表达与患者预后的关系。结果 喉癌组中PAC-1、CD62P阳性表达率高于对照组,SLC7A11高表达率(28.74%)低于对照组(62.07%),差异具有统计学意义(P<0.05)。87例患者中预后良好69例,预后不良18例,预后不良组中PAC-1、CD62P阳性表达率高于预后良好组,SLC7A11高表达率(94.44%)高于预后良好组(53.62%),差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良者临床分期、颈部淋巴结转移占比明显高于对照组(P<0.05),两组在年龄、性别、分化程度上比较无差异(P>0.05)。以临床分期、颈部淋巴结转移、PAC-1、CD62P、SLC7A11作为自变量,进行多因素Cox回归分析结果显示:临床分期、颈部淋巴结转移、PAC-1、CD62P、SLC7A11是影响患者预后的独立因素(P<0.001)。结论 PAC-1、CD62P、SLC7A11在老年喉鳞状细胞癌患者中均呈高表达,且与患者预后情况密切相关,或可作为患者预后评估的参考指标。

聚ADP-核糖聚合酶-1在喉鳞状细胞癌细胞DNA氧化损伤及凋亡中的作用

目的探究聚ADP-核糖聚合酶-1(PARP1)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及其对LSCC细胞DNA氧化损伤与凋亡的影响。方法收集40例患者的LSCC组织及癌旁组织样本,采用免疫组化染色和qRT-PCR检测LSCC组织与癌旁组织中PARP1的表达。采用不同浓度Menadione诱导LSCC细胞系Hep-2,MTT法检测不同浓度诱导下细胞增殖抑制率。将Hep-2细胞随机分为对照组(正常培养)、Men组(20μmol/L Menadione处理)、Men+PARP1抑制剂组(20μmol/L Menadione+10μmol/L PARP1抑制剂Olaparib共处理)。MTT法计算各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞内活性氧(ROS)水平;细胞免疫荧光染色观察各组细胞DNA损伤标记分子γ-H2AX焦点生成情况;Western blot测定各组细胞γ-H2AX、DNA-PKcs、BRCA1、LIG4、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达;Hoechst33258染色观察各组细胞凋亡情况。结果LSCC组织中PARP1阳性表达率及PARP1 mRNA表达均明显高于癌旁组织(P<0.01)。Hep-2细胞经不同浓度Menadione诱导后,细胞增殖抑制率均升高(P<0.05)。与对照组比较,Men组和Men+PARP1抑制剂组的细胞增殖抑制率升高,细胞ROS水平升高,γ-H2AX焦点形成明显增加,γ-H2AX蛋白表达上调,DNA-PKcs、BRCA1、LIG4蛋白表达均下调,细胞出现浓缩、碎裂的蓝色凋亡体,Caspase-3和Caspase-9蛋白表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05),且Men+PARP1抑制剂组以上变化较Men组更明显(P<0.05)。结论PARP1在LSCC组织中高表达,抑制其表达能够进一步加重Menadione诱导的Hep-2细胞DNA氧化损伤,并促进细胞凋亡。

长链非编码RNA CCAT1在喉鳞状细胞癌的表达及其意义

目的探析长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肠癌相关转录因子1(colorectal cancer associated transcription factor 1,CCAT1)在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的表达及其临床意义。方法选取进行手术治疗LSCC患者的喉癌组织及癌旁非癌组织标本32对。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析lncRNA CCAT1在LSCC组织中的表达及其与临床病理特征的相关性分析。应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析lncRNA CCAT1诊断LSCC的临床价值。结果lncRNA CCAT1在LSCC组织中相对表达量(2.677±1.672)明显高于癌旁组织(1.551±1.211)(P<0.05);lncRNA CCAT1表达水平与患者是否吸烟及肿瘤的分化程度有关,吸烟患者的表达量(2.966±1.646)高于未吸烟患者(1.113±0.657),高、中分化的癌组织表达量(2.365±1.405)低于低分化癌组织(3.788±2.170)(P<0.05)。lncRNA CCAT1预测诊断LSCC的曲线下面积为0.724,诊断敏感度为68.80%,特异度为62.50%。结论lncRNA CCAT1在LSCC组织中高表达,其表达可能与LSCC的发生发展有关。

PHLPP与喉鳞状细胞癌转移的相关性及作用机制研究

目的探讨PH值域和亮氨酸丰富重复蛋白质磷酸酶蛋白(PHLPP)与喉鳞状细胞癌转移的相关性及作用机制。方法采用回顾性研究方法,选取2016年7月至2022年7月在河北工程大学附属医院治疗的89例喉鳞状细胞癌患者病灶标本,同时选取病灶周边正常组织作为对照。采用免疫组织化学法检测PHLPP蛋白表达;同时选取喉鳞状细胞癌HEP-2细胞株,随机分为PHLPP沉默组、PHLPP过表达组和空白对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖,采用Transwell小室试验检测各组细胞迁移和侵袭,采用蛋白质印迹法检测各组PHLPP、BAX、PI3K和p-AKT蛋白表达。结果喉鳞状细胞癌组织PHLPP蛋白阳性表达率为38.20%,明显低于正常组织(95.51%),差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、有远端转移的患者PHLPP蛋白阳性表达率分别为20.59%、17.50%、0,均显著低于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、无远端转移(79.41%、82.50%、100.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP沉默组细胞培养24、48、72 h时吸光度值明显高于PHLPP过表达组和空白对照组;PHLPP过表达组细胞培养24、48、72 h时吸光度值明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP沉默组细胞迁移和侵袭数均明显高于PHLPP过表达组和空白对照组(P<0.05);而PHLPP过表达组细细胞迁移和侵袭数均明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP过表达组PHLPP、BAX蛋白表达量均明显高于PHLPP沉默组和空白对照组,而PI3K、p-AKT蛋白表达量均明显低于PHLPP沉默组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);PHLPP沉默组PHLPP、BAX蛋白表达量均明显低于空白对照组,而PI3K、p-AKT蛋白表达量均明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论喉鳞状细胞癌组织PHLPP表达下调,与临床分期、淋巴结转移和远处转移有关;调控PHLPP表达对癌细胞增殖、迁移和侵袭有所影响,可能与调控BAX、PI3K和p-AKT蛋白有关。

喉鳞状细胞癌中泛素结合酶E2C、胞浆磷蛋白-1表达与预后相关性

目的探讨泛素结合酶E2C(UBE2C)、胞浆磷蛋白-1(STMN1)在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)中的表达水平及与预后的相关性。方法选取2015年2月至2017年2月在该院进行手术治疗中取得的97例喉鳞癌组织标本作为喉鳞癌组,另外选取对应的癌旁组织标本作为癌旁组。采用免疫组化法检测UBE2C和STMN1在不同组织标本中的表达情况;通过χ^(2)检验分析UBE2C、STMN1表达与喉鳞癌患者临床病理特征的关系;采用多因素Cox回归分析影响喉鳞癌患者预后的相关因素。结果喉鳞癌组UBE2C阳性率高于癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05);喉鳞癌组STMN1阳性率高于癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、T分期为T_(3)~T_(4)期、有淋巴结转移的喉鳞癌患者UBE2C、STMN1阳性率均高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、T分期为T_(1)~T_(2)期、无淋巴结转移的喉鳞癌患者(P<0.05)。UBE2C阴性的喉鳞癌患者5年生存率明显高于UBE2C阳性的喉鳞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05);STMN1阴性的喉鳞癌患者5年生存率明显高于STMN1阳性的喉鳞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、UBE2C阴性、STMN1阴性的喉鳞癌患者5年生存率明显高于临床分期分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、UBE2C阳性、STMN1阳性的喉鳞癌患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、UBE2C阳性、STMN1阳性表达是喉鳞癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论UBE2C、STMN1在喉鳞癌患者中主要呈阳性表达,且与喉鳞癌患者预后密切有关,有望成为喉鳞状细胞癌预后评估的指标。